怎麼檢測脂肪用化學方法

1. 脂肪的鑒定設計實驗 脂肪的鑒定可以不用顯微鏡,應如何設計實驗

[思路分析]
化學方法:取一粒花生(或向日葵,蓖麻)種子,剝去紅色的種皮,用一片葉子做徒手切片,挑選最薄一片,置載玻片上,滴加蘇丹III溶液,移至酒精燈上加熱,促進著色,製成臨時裝片,置顯微鏡下觀察,可見到花生子葉細胞內含有桔紅色的圓球形的顆粒,即為油滴,因為蘇丹III溶液與脂肪作用,呈桔紅色反應,注意細胞內油滴的含量和分布情況.
[解題過程]
物理方法:烘烤花生種子後,把子葉放在白紙上用手指擠壓,白紙上會出現透明的油跡,說明子葉中含有脂肪

2. 高中生物如何對脂肪進行檢測

1、材料的選取：
含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。
2、步驟：
製作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央。
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精)。
製作裝片(滴1～2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片)。
鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)。

3. 如何檢測生物組織中的糖類，脂肪，和蛋白質

一．實驗目的：嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質
二．實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應.
1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉澱.即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）.
3．蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應.（蛋白質分子中含有很多肽鍵,在鹼性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應.）
4.澱粉遇碘變藍色.
三．實驗材料
1．做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨.（因為組織的顏色較淺,易於觀察.）
2．做脂肪的鑒定實驗.應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3-4小時（也可用蓖麻種子）.
3．做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清.
四、實驗試劑
斐林試劑（包括甲液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水.
五、方法步驟：
（一） 可溶性糖的鑒定
1.制備組織樣液.
蘋果或梨組織液必須臨時制備，因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋.
2.注入2mL組織樣液.
3.注入1mL新制的斐林試劑,振盪.
（現配現用、先混後加）
應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配製、儲存,使用前才將甲、
乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測.
斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加熱：試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鍾,觀察到溶液顏色：淺藍色 → 棕色 → 磚紅色（沉澱）
最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者.
也可用酒精燈對試管直接加熱.
防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷；
縮短實驗時間.
（二）脂肪的鑒定
取材、切片、製片：花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水.

干種子要浸泡3-4小時,新花生的浸泡時間可縮短.
浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形.切片要盡可能薄些,便於觀察.
染色：在子葉薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ（染色3分鍾）或蘇丹Ⅳ染液（染色1分鍾）.
染色時間不宜過長.
漂洗：用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用於洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察.同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴.
用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片.
滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡.
鏡檢：先低後高（高倍鏡用法：移物換器時針反）,低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒.
裝片不宜久放.
時間一長,油滴會溶解在乙醇中.
三、蛋白質的鑒定
制備組織樣液.（浸泡、去皮研磨、過濾.）黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆漿以節約實驗時間.加樣液約2ml於試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3-4滴,搖勻,溶液變紫色.
A液和B液也要分開配製,儲存.鑒定時先加A液後加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提
供一個鹼性的環境.A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉澱,而失效.
否則CuSO4藍色會遮蓋反應的真實顏色.可用蛋清代替豆漿.蛋清要先稀釋.
如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應後會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,並且試管也不易洗干凈.
附：澱粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化.碘液不要滴太多，以免影響顏色觀察

4. 如何測定乳脂肪的含量

乳脂肪含量的測定是根據其特性決定的。由於乳脂肪的乳濁狀態相當穩定，所以測定乳脂肪時，首先應把脂肪球膜加以破壞，這一點可藉助於醇、酸、鹼等化學處理方法來實現。常用的測定方法有蓋爾別爾（Gerber）法和巴布考克法（Babcocks）。

採用蓋爾別爾測定脂肪的具體操作方法如下：

（1）於乳脂計中加入10毫升硫酸（比重為1.82～1.825）。

（2）用11毫升專用牛奶吸管吸取11毫升混合均勻的奶樣，慢慢注入到乳脂計內，使奶於硫酸液面上（切勿混合或將奶樣沾到乳脂計頸部）

（3）用1毫升自動吸管吸取1毫升異戊醇小心注入到乳脂計內。

（4）塞緊乳脂計膠塞並用濕毛巾將乳脂計包好，以拇指壓住膠塞，塞端向下，使細部硫酸流到乳脂計膨大部，用力多次搖動使內容物充分混合，待蛋白質完全溶解，內容物變成褐色後，將乳脂計的塞端向下放入65～70℃水浴鍋中4～5分鍾。

（5）取出後置於離心機中，以800～1200轉/分離心5分鍾。

（6）在置於65～70℃水浴中4～5分鍾取出後即讀數。

Gerber乳脂計頸部一般有8個大刻度（每刻度容積為0.125毫升，總計1毫升），每個大刻度有10個小刻度，共計80個小刻度。牛奶吸管11毫升，當奶注入到乳脂計後吸管壁要沾留0.1毫升奶，因此加入到乳脂計的奶量為10.9毫升。

巴布考克法測定的具體操作方法如下：

（1）用專用牛用吸管吸取17.6毫升奶注入到巴氏乳脂瓶中，加17.5毫升硫酸（比重1.82～1.825）。

（2）搖動乳脂瓶使奶和硫酸混合，內容物成棕黑色後繼續搖動2～3分鍾。

（3）將乳脂瓶置於離心機中以700～1000轉/分離心5分鍾。

（4）取出加65℃水至瓶的頸部，再離心2分鍾。

（5）取出加熱水至刻度「4」處再離心1分鍾。

（6）取出置於65℃水浴中保溫5分鍾。

（7）取出後即讀數。

5. 怎樣檢測生物組織中的糖類，脂肪和蛋白質

糖類中還原糖(例葡萄糖、果糖、麥芽糖等)可用斐林試劑檢測。先准備組織樣液，再准備0·1g/ml的氫氧化鈉溶液、0.05g/ml硫酸銅溶液。方法步驟:1.(1)取2ml組織樣液加入1支潔凈的試管。
(2)再另取2支試管，分別加入2mlNaOH與硫酸銅溶液，再把硫酸銅溶液倒入氫氧化鈉溶液的試管，振盪混合均勻，即為斐林試劑。
(3)把新配製的斐林試劑與組織樣液,等體積混合，振盪搖勻，然後放入50~60度水浴中保溫，觀察顏色變化。如出現磚紅色沉澱，即說明有還原糖。
非還原糖(澱粉用碘液檢測即可)碘遇澱粉變藍。
脂肪用蘇丹三或蘇丹四檢測，材料可用浸泡過"的花生種子，先製成臨時裝片，再用顯微鏡觀察。或者把試劑滴加到組織樣液中，觀察顏色變化。
臨時裝片製作:用刀片先在花子葉切開，然後做徒手切片，放在清水中，然後用毛筆蘸取最薄的一片放在載玻片中央，滴加蘇丹三溶液染色3到5分鍾，用吸水紙吸取多餘染液，再用體積分數為50%酒精洗去浮色，蓋上蓋玻片。放在顯微鏡下觀察。脂肪粒被蘇丹三染成橘黃色、蘇丹四染成紅色。(上述徒手切片做不好，可在花生子葉上
刮取少量粉末，直接塗在載玻片上來替代。

蛋白質用雙縮脲試劑來檢測。雙縮脲是由A液(0.1g/ml的氫氧化鈉)、B液(O.01g/mL的硫酸銅溶液組成。)
使用時取組織樣液(用蛋清稀釋液或豆漿)一2mL加入潔凈試管，然後先滴加1mLA液，振盪試管搖勻，再滴加3~4滴硫酸銅溶液，搖勻。蛋白質遇雙縮脲生成紫色。

6. 鑒定脂肪的實驗步驟

脂肪可以被蘇丹3染成橘黃色或被蘇丹4染成紅色。可以根據這些化學試劑所產生的顏色反應，鑒定生物組織的脂肪的存在。

脂肪是由甘油和脂肪酸組成的三醯甘油酯，其中甘油的分子比較簡單，而脂肪酸的種類和長短卻不相同。脂肪酸分三大類：飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸。

(6)怎麼檢測脂肪用化學方法擴展閱讀：

脂肪的生物合成包括三個方面：飽和脂肪酸的從頭合成，脂肪酸碳鏈的延長和不飽和脂肪酸的生成。脂肪酸從頭合成的場所是細胞液，需要CO2和檸檬酸的參與，C2供體是糖代謝產生的乙醯CoA。反應有二個酶系參與，分別是乙醯CoA羧化酶系和脂肪酸合成酶系。

首先，乙醯CoA在乙醯CoA羧化酶催化下生成，然後在脂肪酸合成酶系的催化下，以ACP作醯基載體，乙醯CoA為C2受體，丙二酸單醯CoA為C2供體，經過縮合、還原、脫水、再還原幾個反應步驟，先生成含4個碳原子的丁醯ACP，每次延伸循環消耗一分子丙二酸單醯CoA、兩分子NADPH，直至生成軟脂醯ACP。

產物再活化成軟脂醯CoA，參與脂肪合成或在微粒體系統或線粒體系統延長成C18、C20和少量碳鏈更長的脂肪酸。在真核細胞內，飽和脂肪酸在O2的參與和專一的去飽和酶系統催化下，進一步生成各種不飽和脂肪酸。高等動物不能合成亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸，必須依賴食物供給。

7. 脂肪檢測方法

體內脂肪的方法，脂肪含量越來越受到重視，所以脂肪檢測非常重要，如果脂肪含量高，一定要通過嚴格控制飲食以及適量的運動，將體重控制在正常范圍，脂肪增多容易患心腦血管疾病。

常規的脂肪檢測方法，需要到醫院做脂肪肝的檢查，可以做肝臟的超聲，脂肪肝的患者往往脂肪都是增多的，通過肝臟的超聲可以判斷是輕度脂肪肝，重度脂肪肝還是中度脂肪肝，重度脂肪肝的人往往體內脂肪是很多的。
脂肪檢測方法可用索式提取法：

一、索式提取法（經典方法）

1、原理：

樣品經前處理後，放入圓筒濾紙內，將濾紙筒置於索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加熱迴流，使樣品中的脂肪進入溶劑中，回收溶劑後所得到的殘留物，即為脂肪（粗脂肪）
採用這種方法測出遊離態脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。

2、 適用范圍與特點

索氏提取法適用於脂類含量較高，結合態的脂類含量較少，能烘乾磨細，不宜吸濕結塊的樣品的測定。此法只能測定游離態脂肪，而結合態脂肪無法測出，要想測出結合態脂肪需在一定條件下水解後變成為游離態的脂肪方能測出。

另外此法是經典方法，對大多數樣品結果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。

8. 脂肪可用什麼試劑來檢測檢測過程是什麼

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

步驟:

1:首先取一粒浸泡過的花生種子，右手持刀片，將子葉削去一片，形成一個平面。

2、用滴管在花生子葉薄片上滴上幾滴蘇丹3染液，染色兩到三分鍾。

3、用吸水紙吸去薄片周圍多餘的染液，滴上1到2滴酒精溶液，洗去浮色。

4、製成臨時裝片。

5、用高倍鏡觀察。

注意事項:

①切片要薄，如厚薄不均就會導致觀察時有的地方清晰，有的地方模糊。

②酒精的作用是：洗去浮色

③使用顯微鏡觀察
④使用不同的染色劑染色時間不同

9. 脂肪可用什麼試劑來檢測檢測過程是什麼

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

步驟:

1:首先取一粒浸泡過的花生種子，右手持刀片，將子葉削去一片，形成一個平面。

2、用滴管在花生子葉薄片上滴上幾滴蘇丹3染液，染色兩到三分鍾。

3、用吸水紙吸去薄片周圍多餘的染液，滴上1到2滴酒精溶液，洗去浮色。

4、製成臨時裝片。

5、用高倍鏡觀察。

注意事項:

①切片要薄，如厚薄不均就會導致觀察時有的地方清晰，有的地方模糊。

②酒精的作用是：洗去浮色

③使用顯微鏡觀察
④使用不同的染色劑染色時間不同

10. 脂肪的辨別方法

脂肪可以被蘇丹3染成橘黃色或被蘇丹4染成紅色。可以根據這些化學試劑所產生的顏色反應，鑒定生物組織的脂肪的存在。

脂肪是由甘油和脂肪酸組成的三醯甘油酯，其中甘油的分子比較簡單，而脂肪酸的種類和長短卻不相同。脂肪酸分三大類：飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸。

(10)怎麼檢測脂肪用化學方法擴展閱讀：

脂肪的生物合成包括飽和脂肪酸的從頭合成、脂肪酸碳鏈的延伸和不飽和脂肪酸的生成三個方面。脂肪酸的從頭合成在細胞液中發生，需要CO2和檸檬酸的參與，C2供體是葡萄糖代謝產生的乙醯輔酶a。反應涉及兩種酶系：乙醯輔酶a羧化酶系和脂肪酸合酶系。

首先，乙醯輔酶a乙醯輔酶a羧化酶催化下生成的，然後系脂肪酸合酶的催化下，醯基載體ACP、乙醯輔酶a的C2受體，丙二酸醯基輔酶a為C2捐贈，通過縮合、還原、脫水；

然後恢復幾個反應步驟，正如奧丁醯ACP包含四個碳原子，每個擴展循環消費分子丙二酸醯基輔酶a，NADPH的兩個分子，直到生成軟脂醯機場核心計劃。

產物活化為softenyl輔酶a，參與脂肪合成或擴展為C18、C20和微粒體系統或線粒體系統中少量碳鏈較長的脂肪酸。在真核細胞中，飽和脂肪酸在O2和特定的去飽和酶系統的催化下進一步生成各種不飽和脂肪酸。高等動物不能合成亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸，必須依靠食物供應。