A. 基因功能鑒定的方法有哪些
基因功能鑒定的方法
1、轉基因技術
2、基因敲出技術
3、基因沉默技術
轉基因技術是將外源基因導入受體細胞，室外源基因隨即整合到受體細胞的染色體上，並隨者受體細胞的分裂並將外源基因遺傳給後代，從而獲得攜帶外源基因的轉基因生物方法。
基因敲出技術是採用動物胚胎肝細胞介導定向基因轉移，使動物體內的特定基因喪失功能的技術。
基因沉默技術是針對mRNA的操作，旨在抑制基因表達產物的生成。
B. 新基因功能的研究方法
基因功能的研究思路主要包括:
1.基因的亞細胞定位和時空(發育期或梯度葯物處理濃度, 不同組織/器官)表達譜;
2.基因在轉錄水平的調控(可以通過genome walking PCR或通過已有的資源庫尋找該基因的啟動子等轉錄調控區域, 通過單雜交或ChIP等技術, 尋找該基因的轉錄調控蛋白)
3.細胞生化水平的功能研究(也就是蛋白蛋白作用復合體的尋找驗證,具體方法有酵母雙雜交, GST pulldown, co-IP, BRET, FRET, BiFc等等,對該基因的表達產物做一個細胞信號轉導通路的定位)
4.gain-of-function & loss-of-function: 也就是分別在細胞和個體水平,做該基因的超表達和knockdown(或knockout), 從表型分析該基因的功能.
功能研究應從完整的分子-細胞-個體三個層次研究, 綜合分析.
關於基因的表達和定位，可以這樣去做：
1. mRNA水平檢測基因表達：選擇表達目的基因的組織/細胞（發育不同時期、機體不同部位、加處理因素...），提取RNA，反轉錄，做RT-PCR或real time RT-PCR，檢測基因的表達情況/變化。
（或者以northern blot、Rnase protection assay方法，檢測基因的mRNA表達情況/變化。）
2. 蛋白質水平檢測基因表達：選擇相應的組織/細胞，以Western blot、免疫組化（OR免疫熒光)檢測目的蛋白的表達。
3. 檢測目的蛋白的細胞定位：將目的基因克隆至帶熒游標簽（如GFP）的表達載體，在適合的模式細胞中表達，在活細胞中觀察蛋白的細胞定位。
C. 細胞水平研究某一基因功能研究的主要方法
細胞水平研究某一基因功能研究的主要方法是對基因進行測序，了解基因的形成以及應在表現形式上對人體和細胞方面的變化。可以在細胞水平上通過基因工程或基因剪輯研究細胞的整體發育狀況