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細菌毒素檢測方法有哪些

發布時間:2022-12-13 22:45:39

⑴ 病菌毒性測定方法有哪些

Wolfe等提出了田間直接測定法和室內測定法,後者又可分菌落計數法和孢子計數法

(1)田間直接測定:在田間暴露一組單基因鑒別品種幼苗,經一定時間後取回,保濕,使降落在葉片上的孢子萌發和侵入,在發病後測定每一個品種產生的病斑數,據此計算毒性頻率以標准感病品種上的病斑數為計算的基數

(2)室內間接測定:有兩種方法,第一種為病斑計數法,將所採集的混合病葉樣本用沉降塔接種一套鑒別品種葉段,離體培養,發病後以各品種葉段上的病斑數與感病品種葉段的病斑數比較,計算毒性頻率第二種方法為孢子計數法,用沉降塔接種盆栽幼苗或離體葉片,接種葉發病產孢後,洗脫孢子,配製孢子懸液,用血細胞計數板鏡檢計數孢子數目,換算單位葉面積產孢數,據以計算毒性頻率

用上述方法,都可得到單個毒性因子單獨出現的頻率(實測值),根據這一頻率,可計算2個或多個因子組合的頻率(理論值)各個鑒別品種上所得孢子,可用來再接種整套鑒別品種,計算各毒性因子頻率,用此第二次測得的基因頻率,可計算具有2個毒性因子的表型頻率(實測值),若再將每個品種產生的孢子,第三次接種整套鑒別品種,用所得結果,就可進一步估計具有3個毒性因子的頻率(觀測值)

⑵ 內毒素的檢測方法和原理

本法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭氏陰性菌產生的細菌內毒素 以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規定的一種方法
細菌內毒素檢查包括濁度法和顯色基質法 供試品檢測時 可使用其中任何一種方法進行試驗 當測定結果有爭議的時候 除另有規定外 以凝膠法結果為准
本實驗操作過程硬防止微生物和內毒素的污染
凝膠法鱟試劑原理 鱟試劑為鱟科動物東方鱟變形細胞溶解物的冷凍乾燥品 內含能被微量細菌內毒素激活的凝膠酶原和凝固蛋白源 在適宜的條件下(溫度、pH值及無干擾物質)細菌內毒素能激活鱟試劑中的凝固酶原 使鱟試劑產生凝集反應形成凝膠 凝膠法鱟試劑是根據凝集反應所形成凝膠的堅實程度來限量檢測細菌內毒素

⑶ 有什麼比較便捷的方法可以檢測血液細菌內毒素

樓主,目前檢測細菌內毒素的方法就是動態濁度法。建議使用「血液細菌內毒素檢測試劑盒」,操作簡便、快速,僅1小時可出檢測報告。

⑷ 細菌內毒素國家葯典是怎麼檢測的

10版國家葯典
檢測內毒素可以用凝膠法
凝膠法是通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來檢測或半定量內毒素的方法。
鱟試劑靈敏度復核試驗

在本檢查法規定的條件下,使鱟試劑產生凝集的內毒素的最低濃度即為鱟試劑的標示靈敏度,用EU/ml表示。當使用新批號的鱟試劑或試驗條件發生了任何可能影響檢驗結果的改變時,應進行鱟試劑靈敏度復核試驗。

以上摘自2010版中國葯典《細菌內毒素檢查法》

⑸ 細菌內毒素檢測鱟試劑實驗方法有哪些

鱟試劑法就是細菌內毒素檢測方法,它包括凝膠法和光度測定法。
凝膠法又分為限度實驗和半定量實驗。
光度測定法是定量實驗,分為濁度法和顯色法,其中濁度法又分為動態濁度法和終點濁度法,顯色法又分為動態顯色法和終點顯色法還有重組鱟試劑法

⑹ 細菌內毒素的檢測方法和原理是什麼

我國葯典收載的細菌內毒素檢測方法為鱟試驗法,包括2種方法,即凝膠法和光度測定法,後者又包括濁度法和顯色基質法。當各種檢測法得到的檢測結果不一致時,以凝膠法的檢測結果為准。
鱟試驗法有定性和定量之分,其按試驗方法還可進一步分為凝膠法、動態濁度法、終點濁度法、動態顯色法和終點顯色法。

原理:
凝膠法是應用鱟試劑可與內毒素發生凝集反應的原理來定性或半定量檢測內毒素的一種鱟試驗法,檢測時鱟試劑需以除熱原水(內毒素檢查用水)復溶後使用,通過觀察有無凝膠形成作為檢測終點。
濁度法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化來檢測內毒素含量的鱟試驗法,其中動態濁度法檢測反應混合物濁度升高至某一預先設定的吸光度時所需的時間或濁度升高的速率。
動態顯色法和終點顯色法都屬顯色基質法。顯色基質法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物游離出生色團的多少來檢測內毒素含量的鱟試驗法,根據產物色度計算內毒素水平,又被稱為比色法。

如何檢測細菌毒素

細菌毒素分內毒素和外毒素兩種。
內毒素可用鱟試劑法靈敏檢出。
外毒素可以與其相應的抗體進行特異性反應檢出,常用的ELISA,補體試驗等

⑻ 細菌內毒素檢測步驟,詳細的

檢測方法: 1、每套器具中,注入80mL水,放置37度保溫至少1小時. 這就是A溶液了。2、這種情況下,內毒素要求(限值)就是 0.25EU/mL. 3、買靈敏度是0.25EU/mL的鱟試劑。4、內毒素制備0.5EU/mL濃度,作為陽性對照,葯典中的C溶液。5、制備B溶液,這個可能要用近似法來制備,取5EU/mL的內毒素溶液 0.2mL與1.8mL的A溶液混合,漩渦混合至少30秒,就成近似的B溶液了。6、加樣反應,取 8 支鱟試劑,全部加0.1mL的細菌內毒素檢查用水復溶。然後分別加A、B、C溶液,0.1mL, 還有加細菌內毒素檢查用水,0.1mL, 每種溶液平行兩管。7、放到37度水浴或乾式的恆溫儀中反應60分鍾,就可以看結果了。8、B、C溶液的反應管必須要陽性,就是輕輕倒轉180度過來,鱟試劑安瓿里的反應溶液形成了凝膠體,不滑落。 而D溶液,就是細菌內毒素檢查用水那2管,必須要陰性,這樣3個滿足了,就說明你的試驗成功了。最後看A溶液的反應情況,陽性就說明原套器具每套大於20EU。否則就合格,小於20EU了。 當然,1管陽性,1管陰性就要重新復查了,方法看葯典。

⑼ 細菌內毒素的檢驗方式有什麼

細菌內毒素檢查法是判斷供試品中細菌內毒素是否符合規定。 內毒素(Endotoxin)即革蘭氏陰性菌細胞壁的脂多糖,其毒性成分為類脂A。菌體死亡崩解後釋放出來。細菌內毒素檢查包括兩種方法,即凝膠法和光度測定法,後者包括濁度法和顯色基質法。供試品檢測時,可使用其中任何一種方法進行試驗。當測定結果有爭議時,除另有規定外,以凝膠法結果為准。

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