A. 核酸檢驗方法
核酸檢測具體流程如下:
1. 核酸提取
使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動化儀器等商品化試劑或設備並按說明書操作。提取RNA時應注意防止RNA降解。DNA應置於-20℃保存,RNA和需長期保存的DNA應置於-80℃保存。
2. 逆轉錄合成cDNA
逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。
3. PCR擴增反應(使用二次擴增的套式PCR擴增方法)
PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶等)、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板(DNA或cDNA)。在擴增儀中,按照設定的程序進行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。
4. 擴增產物定性分析
擴增產物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法,與分子量標准比較,判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內。其它擴增產物分析方法還有限制性內切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動化核酸擴增儀使用酶聯比色分析或熒光探針雜交等原理測定。
5.結果判定和完成報告單
(1)實驗成立的條件:每一次檢測需同時做兩個陽性對照、兩個陰性對照,只有陽性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒有擴增出任何片段、雙份平行樣品結果一致的情況下實驗才成立,可以作出核酸陽性或陰性反應結果的判定。
(2)HIV核酸檢測陽性:發現核酸陽性反應,應該重復採集樣品進行復測,復測結果呈核酸陽性反應則判定為核酸陽性,復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果,需進一步隨訪檢測。
(3)HIV核酸檢測陰性:只可報告本次實驗結果陰性。
(4)應在完成檢測後5個工作日內發出檢測報告。
B. 核酸檢測是怎麼檢測
核酸檢測是通過磁分離技術將病毒核酸分離,可檢查艾滋病、乙肝或丙肝,還可用於新冠病毒的檢查。核酸檢測是採用PCR擴增方法進行檢測血液中是否存在病毒核酸,是利用磁珠上標記特異性吸附特異性核酸,然後在通過磁分離技術將病毒核酸分離出來,適合用來檢查艾滋病、乙肝或者丙肝等疾病的感染。核酸檢查是准確度比較高,靈敏度高的醫學方法,但是核酸檢查的成本高,需要去三甲醫院才可以進行檢查,而且核酸檢查適合於目前的新冠狀病毒感染者,可以及時的區分出患者。
C. 核酸檢測的方式都有什麼
核酸檢測主要有酸檢測試劑、抗體檢測兩種方法,第一種方法通常是通過咽拭子進行PCR檢測,基因擴增,然後再進行核酸檢測。 而抗體檢測是選擇抽血,抽血的方法得出結果看,觀察其抗體滴度是否升高,這種情況常常是指在抽血前常出現不能產生抗體的情況。
核酸檢測是一種「進行時」檢測,通過聚合酶鏈反應等方法檢測病毒基因組中特定的核酸序列,從而判斷被檢測者此刻是否感染了病毒。
與核酸檢測不同,新冠病毒抗體檢測顯示的是哪些人曾經被感染。抗體檢測又被稱為血清學檢測,目的是檢測血液樣本中的抗體。人體感染病毒後,會產生IgM或IgG抗體。
被感染初期,人體會迅速產生IgM抗體,以抗感染;相比之下,產生IgG抗體的速度更慢,但IgG抗體保留時間更長。抗體檢測就是檢測血清中是否有這些特異性抗體,以確定被測試者是否曾被感染。
(3)冰島核酸檢測方法擴展閱讀:
六種人不宜做核酸檢測
一、釆樣前30分鍾,對於有吸煙、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸檢測,以免影響檢測的准確度。
二、進食太飽的人不宜做核酸檢測,否則容易發生惡心嘔吐,影響採用結果的准確性。
三、核酸檢測前有口服抗病毒和抗感染的葯物的,應推遲做核酸檢測,避免影響檢測結果。
四、若是進行鼻拭子采樣的話,對於鼻咽部有病症的急性期,如出血、水腫等人群可以暫不予檢測。
五、剛進行核酸檢測時出現惡心嘔吐的人,應暫緩做核酸檢測,需等檢測者緩解後再予以進行。
六、被采樣者用手或其他物品觸及拭子采樣冠、棉簽的前端的不宜進行,否則容易造成污染,影響檢測結果,需更換進行重做。
D. 核酸檢測的方法
核酸檢測主要是鼻拭子或咽拭子法,經由鼻孔或口腔插入取得上呼吸道分泌物標本後送實驗室檢測。核酸檢測主要是指目前對於新型冠狀病毒肺炎的一種確診的實驗手段,核酸檢測一般分為鼻拭子、咽拭子或者肺泡灌洗液以及痰液,通過呼吸道的標本,我們在實驗室里可以檢測2019新型冠狀病毒的核酸,從而作為臨床診斷的一個重要的依據。那臨床上目前最常採用的檢測方法是鼻拭子或者是咽拭子,操作的時候由醫護人員採用特製的長柄取樣的棉簽,經由鼻孔或者經由口腔插入到鼻腔及咽腔中,在咽喉壁或者鼻腔的粘膜上進行塗抹,取得上呼吸道分泌物標本,這個標本取出之後再送到實驗室進行相關的核酸檢測。在做的過程中患者不用緊張,可能會有一些輕微的不適例如惡心,相信配合好醫護人員的話,能夠很快完成這個檢查,不會給您帶來很大的影響。
E. 核酸檢測怎麼做
核酸檢測需要去正規的醫院或者防疫中心進行檢測。
檢測步驟:
1、首先,核酸檢測盒子,也就是現在用於新冠狀病毒檢測的方式,這個盒子中主要檢測「法寶」採用咽拭子。用咽拭子擦拭咽後壁及雙側咽扁桃體處各5-10次,且不斷旋轉拭子。
2、醫務人員進行留樣,將拭子頭浸入細胞保存液中,折斷尾部後立即旋緊管蓋子。
3、保存,將樣本管放入密封袋中及時送檢,而送檢過程中需要嚴格的運輸環境,2-8攝氏度保存。
4、操作核酸提取(反應管理),將滅活病毒後的樣本進行核酸提取,用於後續檢測。
5、熒光PCR核酸檢測,也就是.上機器檢測,將提取物進行熒光PCR擴曾反應,需要70--80分鍾。
(5)冰島核酸檢測方法擴展閱讀:
1、新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。
2、通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。
3、感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。
F. 核酸的檢測
核酸的檢測其實可以檢測出部分病毒,比如艾滋病和新型冠狀病毒之類的,不過核酸的檢測在檢測前是有注意事項的,比如能不能吃東西,能不能抽煙喝酒等等,這都可能影響檢測結果,接下來我們來具體了解一下核酸的檢測知識吧。
核酸的檢測試劑及顏色變化
核酸的檢測有試劑的檢測,那麼核酸的檢測試劑及顏色變化是什麼樣的呢?
核酸的檢測試劑及顏色變化為:紅色是陽性,綠色是陰性。最常用的病毒快速檢測方法主要有兩大類:核酸檢測,核酸(DNA 或 RNA)是病毒的遺傳物質,篩選其中獨一無二的特徵核酸序列進行檢測可准確確定病原體。
還有抗原抗體免疫檢測,病毒作為抗原可激發人體免疫反應產生抗體,可以通過抗原抗體特異性相互結合的特性進行檢測。當然,不論是哪種檢測技術,只有操作簡單,設備要求低,速度快,效率高才是王道。例如:針對新冠病毒的檢測,主要是通過基於實時熒光PCR技術原理研發的核酸檢測試劑進行快速確診,基於抗體檢測技術原理研發的核酸檢測試劑進行補充檢測。
核酸的檢測方法有哪幾種
核酸的檢測方法並不只是有一種的,具體核酸的檢測方法有哪幾種呢?
核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,取咽喉部上皮細胞的檢測,檢測方法一般是受檢測者張口發出「啊——」的聲音,檢測人員用棉簽採取樣本,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。還有是鼻咽拭子採集,一般是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣,一般檢測很有可能會有嘔吐的感覺,所以需要忍耐一下。
陽性(+)和陰性(-)是實驗結果的判別方式之一,被稱為定性檢查。核酸檢測陽性代表感染了病毒。核酸檢測的操作要求較高,若因采樣不當導致樣本病毒含量低,或運輸儲存條件不當等情況,都有可能導致核酸檢測可能出現假陰性結果。
核酸檢測前注意事項
核酸檢測前是有一些准備事項的,具體核酸檢測前注意事項有哪些呢?
核酸在檢測前,應當注意的是不要過度地吃東西,另外要少喝水,如果是在鼻子有症狀或者是有咽喉症狀的話,盡量不要去檢測核酸。首先我們要知道這個核酸的檢測,它是確定新型冠狀病毒肺炎的一個很重要的方法。
其實通過核酸檢測的結果,可以確診或者是排除患者的新冠病毒的診斷,或者是確診或者是排除。在檢測的時候,醫護人員會拿一個非常長的棉簽,我們叫咽拭子,在咽後壁進行旋轉、取樣,如果我們吃太多的食物,很可能會引起惡心反射、咳嗽反射,從而導致誤吸,一定要空腹。但是如果我們有咽喉部或者鼻部的炎症,也不適合去采樣,容易出現大出血,所以還是等情況穩定的時候去做核酸。
核酸的檢測時間怎麼算
核酸的檢測結果不會馬上出來,那麼對於核酸的檢測時間怎麼算呢?
核酸的檢測一般是從做完核酸采樣之後開始算時間。對於發熱門診患者的核酸檢測,應在6小時內報告結果,並努力將報告時間縮短至4小時。對於普通門急診患者、住院患者和護理人員的核酸檢測,原則上應在12小時內報告結果。對於願意接受檢測的人的核酸檢測,結果通常在24小時內報告。
目前,核酸的檢測採用實時定量PCR方法被廣泛應用於檢測COVID-19特異性核酸片段。測試時,醫生會用類似拭子的拭子擦拭扁桃體和咽凹附近的分泌物,或通過鼻腔清除鼻咽後部的分泌物,然後將其放入試管中,然後送到檢驗部門做相應的病毒核酸檢測。核酸檢測通過五個步驟完成:取樣、樣品保留、保存、核酸提取和計算機檢測。
G. 做核酸檢測的正確方法
5月11日,武漢市新冠肺炎疫情防控指揮部涉疫大數據與流行病學調查組印發緊急通知,決定以10天為期,在武漢市范圍內開展全員新冠病毒核酸篩查。而在全國各地也有一些朋友好奇,核酸檢測到底檢測哪個部位?鼻咽拭子和口咽拭子有何不同?做核酸檢測時有哪些注意事項?
首都醫科大學附屬北京地壇醫院感染中核酸檢測標本可以採集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子統稱為咽拭子,經口的為口咽拭子,經鼻的就是鼻咽拭子。
口咽拭子
鼻咽拭子
做核酸檢測時,我們需要注意什麼呢?
在做核酸檢測前2小時盡量避免進食,以免引起嘔吐;
采樣前30分鍾不應吸煙、喝酒、咀嚼口香糖等;
檢測者需要正確佩戴口罩,檢測前取下口罩,檢測後立即戴好,可准備一個備用口罩,污染後方便及時更換;
在採集鼻咽拭子前檢測者應告知採集人員是否鼻中隔彎曲及鼻腔手術史,過程中可能出現鼻部酸癢感,刺激打噴嚏,可立即用紙巾或手肘遮擋;
鼻咽拭子採集後可能出現少量鼻腔出血,一般不需要特殊處理,如出血量較多請及時到醫院進行處理;
在採集口咽拭子時檢測者頭後仰,張口發出「啊」音,有助於暴露咽喉,但過程中會出現刺激性乾咳、惡心、嘔吐等症狀,檢測者可配合採集人員盡量放鬆、深呼吸;
核酸檢測前後都需要注意手部衛生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭雙手。
血清抗體檢測不受飲食影響 無需空腹
一般感染新冠病毒7-10天後,人體會產生針對病毒的特異性抗體。最先出現的是IgM抗體,隨後會出現IgG抗體,所以檢測這些特異性抗體,可以判斷人體是否感染過病毒,而檢測方法就是血清抗體檢測。
血清抗體需要抽取檢測者2-4mL的靜脈血液進行檢測,檢測結果不受飲食和葯物影響,因此檢測前不需要空腹。
為落實好新冠肺炎疫情常態化防控,全國各地陸續公布「核酸檢測機構名單」,推動重點人群「應檢盡檢」、其他人群「願檢盡檢」。目前國家衛生健康委推出「核酸檢測機構查詢」服務,在國務院客戶端上線,目前已有北京、天津、河北、遼寧、黑龍江、上海、江蘇、安徽、福建、山東、河南、湖北、湖南、廣東、廣西、海南、四川、貴州、雲南、寧夏、新疆生產建設兵團上傳的1226家檢測機構。
H. 核酸幾種方法
1.定磷法。簡單快捷,靈敏度高,但易受蛋白質和核苷酸影響。
2.定糖法。靈敏度高,但特異性差,戊糖也會產生反應,容易產生干擾。
3.紫外線吸收法。適用於濃度大的核酸溶液,而人體感染新冠病毒後,咽部所含的病毒量極少,無法通過此種方法被檢測。
4.熒光法。目前廣泛被使用的是熒光定量RT-PCR檢測法,通過對標本進行逆轉錄擴增、使病毒片段達到一定數量,可以被檢測到,但是由於受采樣標本、運輸等多種因素影響,也有假陰性的可能。
I. 核酸檢測是怎麼檢測是抽血嗎
有些病毒的檢查需要抽血進行的,那麼像核酸檢測是怎麼檢測,是抽血嗎?
核酸檢測可通過抽血檢查,這也是診斷新冠狀病毒性感染的主要依據,一般連續兩次核酸檢測陽性即可診斷新冠狀病毒性感染。新冠狀病毒的核酸檢測也可以採用咽拭子或抽血的方法來檢測,如果均為陽性,則可診斷為新冠狀病毒。此外還可對新型冠狀病毒肺炎患者進行肺部ct及血常規、c反應蛋白、凝血等檢查。如有發熱、乾咳、乏力等症狀,應及時到醫院化驗血常規及核酸檢查,以明確是否有新的冠狀病毒感染。
不過目前核酸檢測的主要流程是採集咽拭子,目前新冠肺炎核酸檢測主要是採取咽拭子的方法,也可以用吸痰的方法吸取氣管內的分泌物。常用的咽拭子方法是通過一種長的棉棍從鼻孔或者口腔進入到咽後壁,刮取咽喉壁黏膜的分泌物做檢測,所以一般會有相關的痰熱淤積與喉嚨部。