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血葯濃度分析樣品定量分析的方法

發布時間:2024-07-10 05:35:52

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『貳』 阿那格雷hplc分析方法

【摘要】研究目的:為測出十二名健康志願者單次口服鹽酸阿那格雷膠囊和多次口服給葯後,不同時刻血漿樣品中阿那格雷的濃度。本次研究建立了一種靈敏度高、分析時間短、重現性好、樣品處理簡便,適於樣品高通量分析的LC-MS/MS(液相色譜-質譜法)定量方法。通過試驗數據對口服鹽酸阿那格雷膠囊後的體內葯動學進行分析,為阿那格雷後期臨床安全性、合理用葯提供了可靠的依據。研究方法:使用乙醚-二氯甲烷(2:1,v/v)作為提取試劑,對阿那格雷血漿樣品採用液-液萃取法進行前處理,柱溫調節到35C,流速選擇1.0mL/mi(n分流體積比1:1),吸清液層30μL進行LC-MS/MS檢測分析。阿那格雷與內標格列吡嗪經AscetnisC18柱(4.6×150mmI.D.,5μm粒徑),在流動相為甲醇-0.1%甲酸水(80:20,v/v)的色譜系統中予以分離之後,再通過高效液相質譜進行分析檢測。選用MRM模式,即多重反應監測技術,選擇ESI(電噴霧離子化源)作為離子源,正離子模式掃描阿那格雷和內標格列吡嗪,分別以m/z256.3m/z199.0和m/z446.1m/z321.0為定量分析的離子反應。為了確保建立的阿那格雷定量分析方法有效可靠,試驗對如下指標進行了全面的方法學確證:包括其特異性、線性范圍、最低定量下限、准確度、精密度、基質效應、提取回收率和穩定性等。對招募的十二名健康志願者,口服給予鹽酸阿那格雷膠囊各1mg以及多次口服1mg劑量後,為測出不同時刻採集的血漿中阿那格雷的濃度,使用已經建立好的HPLC-MS/MS定量方法來進行分析。為了了解阿那格雷在人體內的葯代動力學所具備的特點,我們使用DAS3.0和SPSS17.0軟體算出相應的葯代動力學參變數並用統計學方法闡明其葯代動力學參變數的特徵。研究結果:為了測出人體血漿中阿那格雷的濃度,此次實驗創建了快速靈敏、准確可靠、重現性極好且穩定的HPLC-MS/MS測定方法。結果表明:在待測物和內標格列吡嗪出峰時間處均沒有外源性和內源性物質影響的情況下,阿那格雷血漿樣品的定量線性范圍是0.1-100ng/mL,LLOQ是0.1ng/mL,本方法線性良好(r=0.9971),且定量范圍較寬。日內精密度(日內RSD)<5.92,日間精密度(日間RSD)<10.4,准確度為3.11%-4.04%,以上值均<±15%。阿那格雷低、中、高三個濃度回收率分別是96.1±3.6%、99.5±1.2%、104±0.91%。內標格列吡嗪回收率也穩定,結果精密可重現。阿那

『叄』 體內葯物分析的樣品測定

體內樣品分析常用的方法有免疫分析法和色譜分析法 。
免疫分析法是基於抗體與抗原或半抗原之間的高選擇性反應而建立起來的一種生物化學分析法。具有很高的選擇性和很低的檢出限,可以應用於測定各種抗原、半抗原或抗體。免疫分析法分為熒光免疫法、發光免疫法、酶免疫法及電化學免疫法等非放射免疫法和放射免疫法,測定的量可以達到μg甚至ng的水平。這些分析方法多配有專用設備和試劑,操作相對簡便,適合常規實驗室使用,多應用臨床治療葯物監測。
色譜分析包括:氣相色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)和色譜-質譜聯用(GC-MS、LC-MS)等,這些方法適用於復雜樣品中微量葯物的專屬准確定量,多用於葯代動力學研究。 由於體內樣品取樣量少、葯物濃度低、內源性物質的干擾(如無機鹽、脂質、蛋白質、代謝物)及個體差異等多種因素影響體內樣品測定,為了保證方法的可靠性,必須在建立體內樣品分析方法的同時對方法進行驗證。
(一)特異性
必須證明所測定的物質是原形葯物或特定的活性代謝物,內源性物質和相應的代謝物及同時服用的其他葯物不得干擾樣品的測定。對於色譜法至少要提供6個不同來源的空白體內樣品色譜圖、空白體內樣品外加標准物質色譜圖(註明濃度)及用葯後的體內樣品色譜圖。
(二)標准曲線與線性范圍
根據所測定物質的濃度與響應的相關性,用回歸分析方法獲得標准曲線。標准曲線的高低濃度范圍為線性范圍,在線性范圍內濃度測定結果應達到試驗要求的精密度和准確度。
必須用至少6個濃度建立標准曲線,應使用與待測樣品相同的生物介質,線性范圍要能覆蓋全部待測濃度,不允許將線性范圍外推求算未知樣品的濃度。建立標准曲線時應隨行空白體內樣品,但標准曲線不包括零點。
標准曲線上各濃度點的實測值與標示值的偏差(bias)在可接受范圍內時,可判定標准曲線合格。偏差可按下式計算:
式中,回歸值系將各濃度點的響應值代人標准曲線計算所得的濃度值;標示值系指制備標准曲線時,各相應濃度點的配製濃度。
標准曲線上各濃度點偏差的可接受范圍一般規定為:最低濃度點的偏差在±20%以內,在其餘各濃度點的偏差在±15%以內。只有合格的標准曲線才能用於臨床待測樣品的濃度計算。當線性范圍較寬時,推薦採用加權最小二乘法(weighted least square method)進行同歸計算。
(三)定量下限
定量下限(LLOQ)是標准曲線上的最低濃度點,:要求至少能滿足測定3~5個半衰期時樣品中的葯物濃度,或Cmax的1/10~1/20時的葯物濃度,其准確度應在真實濃度的80%~120%范圍內。RSD應小於20%,S/N應大於5.應由至少5個標准樣品測試結果證明。
(四)精密度與准確度
要求選擇高、中、低3個濃度的質控(quality control,QC)樣品同時進行方法的精密度和准確度驗證。其中,低濃度接近定量下限(lower limit of quantitation,LLOQ),在LLOQ的3倍以內;高濃度接近標准曲線的上限(即定量上限,upper limit of quantitation,ULOQ),中間選一個濃度,每一濃度至少測定5個樣品。
精密度用QC樣品的批內(intra-batch)和批間(inter-batch)RSD表示,RSD一般應小於15%,在LLOQ附近應小於20%.
在測定批內RSD時,每一濃度至少制備並測定5個樣品。為獲得批間RSD應至少在不同天連續制備並測定3個分析批,至少45個樣品。
准確度是指用特定方法測得的體內樣品濃度與真實濃度的接近程度,一般應在85%~115%范圍內,在LLOQ附近應在80%~120%范圍內。
(五)樣品穩定性
根據具體情況,對含葯體內樣品在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時間進行穩定性考察,以確定體內樣品的存放條件和時間。還應注意考查儲備液的穩定性以及樣品處理後的溶液中分析物的穩定性,以保證測試結果的准確性和重現性。
(六)提取回收率
應考察高、中、低3個濃度的提取回收率。其結果應一致、精密和可重現。
(七)質控樣品
質控(QC)樣品系將已知量的待測葯物加入到生物介質中配製的樣品,用於質量控制。
(八)質量控制
應在體內樣品分析方法驗證完成之後開始測試未知體內樣品,每個樣品一般測定一次,必要時進行復測。每個分析批均應建立相應的標准曲線,並隨行測定高、中、低3個濃度的QC樣品,每個濃度至少雙樣本。並應均勻分布在未知樣品測試順序中。當一個分析批中未知樣品數目較多時,應增加各濃度QC樣品數,使QC樣品數大於未知樣品總數的5%,QC樣品數的增加以組(高、中、低3個濃度)為單位。QC樣品測定結果的可接受標准為:偏差應小於15%,低濃度點偏差應小於20%,最多允許1/3不在同一濃度的QC樣品結果超限。如QC樣品測定結果不符合上述要求,則該分析批未知樣品測試結果作廢。濃度高於ULOQ的未知體內樣品,應採用相應的空白介質稀釋後重新測定。
(九)測試結果
應詳細描述所用的分析方法,引用已有的參考文獻,提供每個分析批的標准曲線、質控樣品及未知樣品的測試結果及計算過程。還應提供全部未知樣品分析的色譜圖,包括全部相關的標准曲線、質控樣品的色譜圖,以供審查。 (一)治療葯物監測的對象
對於治療安全濃度范圍窄、治療劑量與中毒劑量接近、毒副作用強、具有非線性葯代動力學特徵、長期使用葯效和毒性不明確、以及聯合用葯可能發生相互作用的葯物,通常都應當進行監測。應當進行治療葯物監測的葯物包括部分抗癲癇葯、抗心律失常葯、強心苷類葯、抗生素、抗精神病葯、抗哮喘葯、抗惡性腫瘤葯和一些解熱鎮痛葯,如表7-1所示。部分應當進行治療葯物監測的葯物的治療濃度范圍和中毒濃度,如表7-2所示。治療葯物監測示例見第十章第一節「苯巴比妥體內樣品的分析。
(二)在葯代動力學研究中的應用
地高辛在臨床上用於心衰治療,其有效濃度(0.8~2.0ng/ml)與中毒濃度(>2.4ng/ml)接近。消除半衰期長,成人的約為36小時、兒童的約為30小時,屬一級動力學。地高辛在腸部被吸收,60%~90%以原型經腎小球濾過或腎小管排泌,僅有約10%在體內通過氫化、水解、結合等反應代謝,另有約7%發生腸-肝循環。
以毛地黃毒苷為內標,對人血漿和尿液中地高辛濃度LC-MS測定如下。
(1)樣品處理方法精密吸取血漿1.0ml,置具塞離心管中,精密加入內標溶液(20ng/ml)50μl,加濃氨水100μl和甲基叔丁基醚5.0ml,振盪混勻30分鍾後,3000×g力離心10分鍾,分取有機層,置另一離心管中,在減壓離心條件下揮千,殘留物用100μl 含0.25mmol/L醋酸鈉的甲醇-水(40:60)流動相溶解,14000×g力離心2分鍾,取上清液15μl進行LC-MS分析。尿樣用空白血漿按1:10或1:50稀釋後照血漿方法處理和測定。
(2)色譜和質譜條件色譜柱C8(2.1mm×50mm,5μm)柱,流動相含0.25mmol/L醋酸鈉的甲醇(A)-水(B)梯度洗脫,流速0.25ml/min.電噴霧正離子化,噴霧電壓5000V,傳輸裂解電壓250V,乾燥氮氣溫度350℃,流速10.0L/min,噴霧口氣壓25psi.選擇性離子【M+Na】+監測(SIM),m/z分別為803.4(地高辛)和787.4(毛地黃毒苷)。
(3)測定結果血漿濃度線性范圍為0.05~1.5ng/ml,應用於人體葯代動力學研究,測得女性受試者口服0.25mg地高辛後的典型血漿濃度-時間曲線如圖7-2所示,其尿液48小時累積排泄量為30.2%。

『肆』 阿司匹林的含量怎麼測定

阿司匹林含量測定綜述08葯學1班:冉賢飛x0dx0a阿司匹林片為常用的解熱、鎮痛葯,收載於(中國葯典2000年版)二部。原含量測定方法為酸、鹼中和滴定法。目前市場上流通的解熱、鎮痛葯物中,含阿司匹林或以阿司匹林為主葯的較多。除了中國葯典的原含量測定方法以外,針對各個劑型有多種含量測定的方法。如採用高效液相法測定其含量,可消除其他含有酸、鹼的物質對其測定的干擾,可更有效的控制制劑的質量。方法操作簡便,專一性強,結果准確。也有用數學模型進行計算的如近紅外漫反射技術,其原理是根據標樣集中樣品的近紅外光譜運用化學計量學方法建立光譜特徵值(如吸光度)與待測成分之間的數學關系(簡稱數學模型)x0dx0ax0dx0a1.阿司匹林及阿司匹林制劑的含量測定x0dx0a阿司匹林及阿司匹林制劑的含量測定有多種方法,其中包括葯典所載的酸、鹼中和滴定法x0dx0a及紫外分光光度法,高效液相法等。x0dx0a1.1阿司匹林酸鹼滴定法:x0dx0a直接滴定:方法:取本品0。4g,精密稱定,加中性乙醇20ml,溶解,加酚酞指示液3d,用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/l)滴定。每1ml滴定液相當於18。02mg的C9H8O4x0dx0a水解後剩餘滴定:方法:取本品1.5g,精密稱定加氫氧化鈉滴定液(0.5mol/l)50.0ml,混合,緩緩煮沸10min,放冷,加酚酞指示液,用硫酸滴定液(0.25mol/l)滴定剩餘的氫氧化鈉。x0dx0a兩步滴定法:取本品10片,精密稱定,研細,精密稱取片粉適量(約相當於阿司匹林),加中性乙醇20ml,振搖使阿司匹林溶解,加酚酞指示液3d,滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/l)至溶液顯粉紅色。加定量過量的氫氧化鈉滴定液(0.1mol/l)40ml,置水浴上加熱15min並時時振搖,迅速放冷至室溫,用硫酸滴定液(0.05mol/l)滴定剩餘的鹼。根據消耗的滴定液體積及滴定度計算含量x0dx0ax0dx0a1.2阿司匹林制劑的電極法測定x0dx0a儀器與試劑:電極電位和溶液酸度測試均使用pHs—loC型數字式酸度離子計;參比電極為232型飽和甘汞電極;試劑均為分析純,實驗用水為去離子水經高錳酸鉀處理後蒸餾而得。x0dx0a電極制備:將載體物質三苄基錫辛酸酯20mgl聚氯乙烯(PVC)0.33g和增塑劑鄰硝基苯基辛醚o.65g溶解於四氫呋喃(THF)3g中,攪拌澄清後將其傾倒於40mm×40mm的水平玻璃板上。待THF揮發完後(約需l2h)即得到具有彈性的PVC膜。用打孔器切下直徑10mm的圓片並用含5%PVC的THF溶液粘於PVC電極桿端,放置數小時,晾乾後電極桿內充以0.1mol/L的水楊酸鈉溶液作為內參比溶液並以Ag/AgCl絲作為內參比電極導出至離子計。電極使用前需於0.01mol/l水楊酸鈉溶液中浸泡2h進行活化處理。電極及備用膜長期不使用時可洗凈後.置於氮氣氛圍下保存。在此條件保存,電極的各項性能指標至少可於5個月內維持穩定。x0dx0a阿司匹林制劑的分析:待測樣品的處理:阿司匹林易水解得到水楊酸根離子,且反應定量。因此,通過對水楊酸根離子的測定即可得出樣品中的阿司匹林含量。阿司匹林片(A)和復方阿司匹林片(B)均處理如下:將適量葯品(10片)研製成粉狀,精密稱取1—1.5g.在0.5mol/LNaOH溶液25m1中加熱迴流1h後過濾,定容至250ml。吸取lOm1濾液,用稀硫酸調至pH5.5,再用PH5.5的磷酸鹽緩沖液定容至100mI作為待瀾液。使用所配電極通過標准溶液法和樣品加入法.分別測定葯品A和B經前述處理後所得試樣中的水楊酸根離子濃度,通過換算得出葯劑中阿司匹林的含量x0dx0ax0dx0a1.3HPLC法測定阿司匹林片的含量x0dx0a儀器與試葯儀器:高效液相色譜儀;CLASS—LC工作站。色譜柱:ODSC18色譜柱(150mmx4.6mm,填料:Kromasil,粒度:5um)。試葯阿司匹林對照品,甲醇(色譜純試劑),冰醋酸、鹽酸(分析純試劑)。x0dx0a取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當於阿司匹林10mg),置100m1量瓶中,加0.1mol/l鹽酸溶液適量,超聲使阿司匹林溶解,放冷至室溫,加0.1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液5m1,置25m1量瓶中,加0.1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度,格勻,取20ul注入液相色譜儀,記錄色譜圖。另取阿司匹林對照品適量,加0.1mol/l鹽酸溶液溶解並稀釋製成每lm1中約含阿司匹林20ul的溶液,取20ul同法測定。按外標法以峰面積計算,即得。x0dx0ax0dx0a1.4動力學光度法測定痕量乙醯水楊酸x0dx0a原理:碘對Ce4+和As的氧化還原反應有明顯的催化作用,乙醯水楊酸和碘容易發生取代反應,使碘的濃度降低,導致碘的催化作用減弱,由此建立動力學光度法測定痕量乙配水楊酸的新方法。x0dx0a儀器和試劑:721型分光光度計;PHS—3C酸度計;超級恆溫水浴。0.01mol/lCe(SO4)20.013mol/LAS2O3,5mol/lH2S04,5mg/lKI用時稀釋至0.25mg/l;150mg/l乙醯水楊酸標准溶液用時稀釋至所需濃度;5%醋酸馬錢子鹼;實驗用水為二次蒸餾水。x0dx0a實驗方法:於一系列25m1比色管中准確加入0.25mg/lKI溶液1.0m1,5mol/lH2S04溶液1.25m1,0.013mol/LAS2O3溶液1.0ml,乙酸水楊酸標准溶液(或樣品溶液),加蒸餾水至25m1刻度線。搖勻並放人35土0.1度的水浴中,恆溫後加入0.01mol/lCe〔S04)21.0ml,立即搖勻,迅速放回水浴中。反應10min後,加入0.5mol/l,0.5%的醋酸馬錢子鹼終止反應並與Ce4+—顯色,置於沸水浴中煮沸3min,取出冷卻至室溫。用1cm比色皿,在波長520nm處,以蒸餾水為參比,測定吸光度A。x0dx0ax0dx0a2.以阿司匹林為主葯的含量測定x0dx0a雖然其成分組成有差異,但大多仍是根據阿司匹林的化學或色譜性質加以分離並測定其含量。x0dx0a2.1反相高效法相色譜法測定阿司匹林可待因片中阿司匹林含量x0dx0a儀器和試劑:Hp-1050液相色譜儀及UV檢測器,HP3396積分儀。磷酸可待因對照品、阿司匹林對照品。甲醇、醋酸鈉、冰醋酸均為分析純試劑,阿司匹林磷酸可待因復方制劑(試製品)。x0dx0a液相色譜條件:色譜柱ODSC18(10mm,300mm×4mm)流動相:甲醇—0.03mol/L—l醋酸鈉(冰醋酸調pH=3.5)(1:2.5);檢測波長:280nm;流速:1ml/min.x0dx0a測定方法x0dx0a混合對照品溶液配製准確稱取在105℃乾燥至恆重的磷酸可待因對照品適量。用水溶解,配製成濃度為0.8mol/l的溶液。准確稱取阿司匹林對照品約40ml置10mL容量瓶中。加入甲醇2—3mL,溶解,精密加入上述磷酸可待因溶液1.0mL,用水定容至刻度,搖勻即得。x0dx0a供試品溶液配製精確稱取樣品細粉適量(約相當磷酸可待因8mg阿司匹林400mg)置100mL容量瓶中,加入25%甲醇溶液50mL,超聲溶解5min。用25%甲醇溶液稀釋至刻度,格勻。經0.45um微孔濾膜濾過,取續濾液為供試品溶液.x0dx0a測定精密吸取混合對照品溶液和供試品溶液各10uL,分別注入液相色譜儀中。記錄峰面積。根據混合對照品溶液中磷酸可待因和阿司匹林的峰面積,計算出供試品溶液中二者的含量.x0dx0ax0dx0a2.2小兒退熱靈片紫外摺合光譜測定x0dx0a原理:摺曲線分析法是一種數學變換方法(它的數學屬性是一種新的復合導數變換)。它根據諧波分析原理,將光譜吸收曲線看作是多個數學分量加權而成。由於它提供的信息量大,可以顯示吸收曲線的細微差異,以減少相似組分的數學相關性,所以在物質定性和混合物定量方面具有明顯的優點。x0dx0a儀器與試葯:UV/VISW型裙合光譜儀及裙合光譜軟體;阿司匹林(1)對照品(含量99.89%)、苯巴比妥(2)對照品(含量99.92%)和輔料(佳木斯化學制葯廠);小兒退熱靈片x0dx0a方法與結果:對照品溶液的配製:分別精密稱取1、2對照品適量,用0.1mol/LNaOH溶液(溶劑)溶解稀釋製成1mg/m1的儲備液。再用溶劑稀釋製成適當濃度的溶液(約120ug/m1,22.0ug/m1,使1和2的吸收度在0.2—0.8),備用。模擬樣品的配製按原黑龍江地方標准葯品處方比例稱取1、2與適量的輔料混勻後,精密稱取0.2g置小燒杯中,用溶劑溶解並定容至100m1,靜置10min,再取5m1稀釋至250m1。分別吸取16、17、18、19和20m1置各25m1量瓶中,用溶劑定容,得1濃度為20—25ug/m1、2濃度為2.0—2.5ug/m1的模擬樣品溶液(使1和2的吸收度在0.2—1.2),共5份。x0dx0a樣品測定:取本品12片,精密稱定,研細,精密稱取細粉適量(約相當於10.110g,20.011g),用少量溶劑溶解後定容至50m1。按「2.3」項下方法選定的最佳摺合區間(245—295nm),經摺合光譜自動採集該區間的光譜信息,以兩組分定量分析系統軟體進行裙合運算,並計算得含量x0dx0ax0dx0a2.3近紅外漫反射技術測定精氨酸阿司匹林的含量x0dx0a原理:近紅外定量分析需要一個待測成分已知的標准樣品集(簡稱標樣集),根據標樣集中樣品的近紅外光譜運用化學計量學方法建立光譜特徵值(如吸光度)與待測成分之間的數學關系(簡稱數學模型)。當測定未知樣品時,只需測定該樣品的近紅外光譜,然後用已建好的數學模型預測出待測成分的含量。與常規的光譜定量分析不同之處是,近紅外光譜分析時所用樣品可以不經預處理,通過求解光譜矩陣與待測成分的濃度矩陣來建立數學模型,進行定量。檢測固體樣品一般採用漫反射技術,對於液體樣品的檢測用透射方法。建立數學模型的方法主要有:多元線性回歸、主成分法、偏最小二乘法等。貼演算法相對而言是一種較新的多元數據處理技術,它與逐步回歸、主成分回歸的顯著差異在於考慮全譜區各波長是光譜參數的同時,還兼顧了被分析樣品內部各成分之間的關系,因此在NIR分析中得到廣泛應用。x0dx0a儀器:Bruker公司VECTOR22/N近紅外光譜儀,帶漫反射光纖探頭波長區間4000-11000cm-1x0dx0a樣品:精氨酸阿司匹林固體粉末含阿司匹林48.0%-53.0%,蔗糖酯(片劑輔料,作為潤滑劑)x0dx0a實驗方法:用1/1000扭力天平準確稱取不同比例的精氨酸阿司匹林與蔗糖酯,共10份,分別混合均勻,用壓片機壓片,得到精氨酸阿司匹林含量不同的片劑(以此含量做為精氨酸阿司匹林片的理論含量一真值),每種各100片。從每種100片中隨機選取10片,用儀器的漫反射光纖探頭壓住葯片,每片正反面各測1次,取平均光譜做為樣品光譜。掃描區間為4000-11000cm-1,解析度為8cm-1。用Bruker公司Bruker公司quant/2軟體分析,光譜數據採用加性散射校正預處理,以消除葯片表面不同引起的誤差,即可得到測量值。x0dx0ax0dx0a2.4阿司匹林精氨酸鹽注射液含量測定x0dx0a儀器與試葯:儀器79—l電磁攪拌儀;紫外—可見分光光度計。精氨酸,阿司匹林,其餘試劑均為分析純。x0dx0a標准曲線的繪制:精密稱取阿司匹林結晶250.0mg,懸浮於250mL蒸餾水中,在40一50度水浴中不斷攪拌至溶解,冷卻後移入500ml量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。精密吸取l,2,3,4,5mL分別置於50mL量瓶中,加25mL蒸餾水,用o.1mol/LNaOH溶液調節pH至9一10,在沸水浴中加熱5min,冷卻後,用0.1mol/l鹽酸溶液調節pH至3.0一4.0,加5滴硫酸鐵銨指示液,再加蒸餾水至刻度,搖勻。在530nm波長處測定吸收度A。線性回歸得方程.x0dx0a測定含量:精密稱取阿司匹林精氨酸鹽400.0mg置l00mL量瓶中,加蒸餾水溶解,稀釋至刻度,搖勻,過濾。取續濾液5mL,置50mL量瓶中,在沸水浴中加熱數分鍾,冷卻,加25mL蒸餾水,以下同標准曲線項下處理,在530nm波長處測定吸收度A,計算阿司匹林精氨酸鹽的含量。阿司匹林精氨酸鹽的含量=(測定值/稱量值)×loo%,代入數據求得阿司匹林精氨酸鹽的含量.x0dx0ax0dx0a3.阿司匹林體內葯物分析:x0dx0a3.1反相高效波相色譜法測定阿司匹林血葯濃度x0dx0a1儀器與試葯:Waters2690高效液相色譜儀,配置有996二極體陣列檢測器及Millennium數據處理系統;旋渦混合器(上海青浦滬西儀器廠);TGL—16高速離心機(上海醫用儀器廠)。水楊酸、苯甲酸對照品(中國葯品生物製品檢定所);磷酸為分析純,乙睛為色譜純;水為超純水。x0dx0a色譜條件:色譜柱為DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5um),流動相為甲酵—乙睛—0.2%磷酸(18:32:50),檢測波長為237nm,流速為1.0ml/min。x0dx0a溶液配製:精密稱取10.10mg水楊酸對照品,用甲酵溶解,並定容至10ml,得到1.010mg/L水楊酸的儲備液,並用甲醇稀釋成不同濃度的系列溶液。精密稱取10.44mg苯甲酸,用甲酵溶解,並定容至10ml,得到1.044mg/l苯甲酸的儲備液。取lml儲備液,用甲醇稀釋至loml,得到104.4ug/ml的內標工作液。x0dx0a樣品處理與測定:精密量取血清樣品0.5nl,加入內標苯甲酸溶液(104.4ug/m1)50ul,乙睛2ml,旋渦振盪2min,15000r/min離心5min,取上清夜20ul,在上述色譜條件下進樣,分別記錄內標與樣品的色譜圖與峰面積。按外標法以峰面積計算,即得。x0dx0ax0dx0a討論x0dx0a阿司匹林及其制劑有多種分析方法,但有其共同點。HPLC分析中,檢測柱一般多採用C18柱,檢測波長為280左右。滴定法都是根據葯物中含游離羧酸的酸性進行滴定,或水解後用酸回滴。其他以數學模型等方法進行的測量,也都是基於阿司匹林的化學結構和性質。x0dx0ax0dx0a參考文獻:x0dx0a劉冬,阿司匹林制劑的電極法測定,中國醫葯工業雜志,1997,28(11):512x0dx0a王曉燕,高效液相色譜法測定復方阿司匹林片劑的含量,沈陽葯科大學學報,2002,9(1):31x0dx0a楊軍,動力學光度法測定痕量乙醯水楊酸,新鄉師范高等專科學校學報,2001,15(2):77x0dx0a南楠,反相高效法相色譜法測定阿司匹林可待因片中磷酸可待因和阿司匹林的含量,葯物分析雜志,1999,19(1):7x0dx0a侯巍,小兒退熱靈片中兩組分的紫外裙合光譜測定,中國醫葯工業雜志,2004,35(3):162喬梁,應用近紅外漫反射技術測定精氨酸阿司匹林的含量,葯物分析雜志,1998,18(5):297x0dx0a張曉雲,阿司匹林精氨酸鹽注射液的制備及其穩定性研究,西北葯學雜志,2004,19(2):71x0dx0a張麗,反相高效波相色譜法測定阿司匹林血葯濃度,中國葯房,2003,14(5):289

『伍』 請問各高手測量胰腺和血液中某葯物的濃度,除了高效液相色譜儀還有其他方法嗎有沒有測量的試劑盒什麼

葯物的測量方法是根據葯物本身性質來決定使用什麼方法的,也就是說能使用什麼方法測量,還是要看被測的是什麼葯物。現在絕大多數葯物含量的測量都是使用高效液相,優點是易操作,精度高,重現性好等,而且很多是葯典規定的。

現在的確有地塞米松試劑盒,也就是是Elisa試劑盒,但基本都是用於定性分析的,幾乎很少用來定量分析。試劑盒的分析限制中也寫明:本試劑盒檢測為陽性的樣品應該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。其中HPLC即指高效液相色譜法,GC/MS是氣相色譜法和質譜法。

因為樓主所要分析的是血葯濃度,是定量分析,所以還應用液相色譜法相對來說最為准確快捷。當然如果說是純較真說我就要用滴定法測定血葯濃度,也未必不能實現,但是不符合科學的精神和發展的規律。

高效液相色譜分析已經非常普遍了,方法也相當成熟,該用還是用了吧。

『陸』 鑽鐗╁垎鏋愶細甯哥敤瀹氶噺鍒嗘瀽娉曚笌搴旂敤鈥斺旂悊鍖栨硶

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