㈠ 細胞的計數方式有哪些
稀釋塗布平板法 血球計數板發 流式細胞計數器發 粗略計數法
㈡ 檢測體細胞數有哪些方法
目前獲得世界各國普遍承認和使用的體細胞計數方法概括起來主要分為顯微鏡人工計數法和自動計數儀計數法。
1、顯微人工計數：體細胞計數的國際標准方法為顯微鏡鏡檢法，此法准確，大部分的快速檢測方法均用此法作校準，但在制備樣品、計數鏡檢時費時、費力，不適合作為現場快速和大樣品量時使用。
2、自動計數儀計數：目前，在乳品生產中牛乳體細胞計數主要是依靠大型的體細胞儀完成的，體細胞自動計數分析研究主要有以下兩個方面:
（1）流式細胞分析法.具代表性的產品為美國Bently計數儀，福斯Fossomatic 5000，荷蘭Delta體細胞計數儀等。該法檢測速度快，適合乳品集中檢測，但儀器成本高，不能夠保留樣本，且需要熟練人工操作，經常性校正監測等。
（2）另一方面是利用數字圖像分析系統，典型產品如韓國C-reader ADAM體細胞計數儀，該法數據准確，排除人為因素影響。由於該方法是基於標准鏡檢法的一種方法，所以其在韓國已經使用該種方法代替標准法對大型自動儀器進行校正。華誠睿光的牛博士Ⅱ和牛博士Ⅲ就是這種檢測方法的典型代表。
㈢ 普通實驗室最常用的細胞計數的方法是什麼
細胞計數就是從需要計數的細胞懸液中取一定量細胞進行計數,並通過計數得知原始細胞懸液中的細胞密度以及細胞總和數.在細胞計數時,若細胞濃度太高,可進行必要的稀釋.常用的細胞計數有細胞電子記數儀計數法和細胞板計數法,但電子計數儀記數法在許多實驗室尚未完全推廣, 細胞板計數法仍是實驗室目前常用的方法.
1. 制備雞紅細胞懸液:取50ml小燒杯一隻,以一份雞血加十份0.17mol/L氯
化鈉溶液稀釋,形成一種不透明的紅色液體,此為雞紅血細胞懸液.懸液制備後應輕輕反復吹打, 使細胞充分分散.
2. 准備記數板:用酒精清潔雞血細胞懸液及專用蓋玻片,再用綢布擦凈.
3. 加樣: 細胞記數板蓋上專用蓋玻片,用無菌細口吸管吸取一滴雞血細胞懸
液,從記數板上蓋玻片的邊緣一側緩緩滴入,使之充滿記數板和蓋玻片之間的的空隙中,注意:加樣量不要過多溢出蓋玻片,也不要過少或帶有氣泡.不理想時要重新加樣,否則會影響細胞計數結果.
4. 計數:稍候片刻,將計數板放在低倍鏡下觀察計數.計算出計數板的四角大方格(每個大方格又分16個小方格)內的細胞數.計數時,只計數完整的細胞,若聚成一團的細胞 則按一個細胞計數.在一個大方格中,如果有細胞位於線上,一般計上限細胞不計下限細胞,計左線細胞不計右線細胞.
5. 計算:計完數後,需換算出每mol懸液中的細胞數.由於計數板中每一方格的面積為0.1cm2 ,高為0.01cm,這樣它的體積為0.0001cm3 即0.1mm 3 .由於1ml=1000 mm 3 ,所以每一大方格內細胞數×104=細胞數/ ml,故可按下式計算:
細胞懸液細胞數/ ml=4個大方格總數/4×104. 如計算前已稀釋,可再乘稀釋倍數.
㈣ 如何對活細胞進行計數
用台盼藍拒染法計數活細胞:
1. 徹底混合細胞懸液,取100礚樣本至一支試管中.
2. 台盼藍染色有兩種方法.一是首先用細胞培養液稀釋細胞樣本,然後用台盼藍溶液(產品號 #07050) 1/2稀釋樣本（細胞和台盼藍的稀釋比為1:1）.或者直接用台盼藍溶液稀釋樣本.
例如：1/40稀釋樣本
加入50礚 細胞懸液至950礚 IMDM+2% FBS (1/20 稀釋),混合,然後取100礚稀釋的細胞懸液加入100礚台盼藍溶液中(終稀釋度為1/40).或取20礚細胞懸液加入780礚台盼藍溶液中(終稀釋度為1/40).
3. 渦懸振盪,混合稀釋的細胞樣本.
4. 血細胞計數器的准備：首先用酒精清潔其小室和蓋玻片,然後用脫脂綿擦乾.
5. 仔細的將蓋玻片覆蓋兩個小室.
6. 用微量移液器或毛細管吸取稀釋的樣本.
7. 用微量移液器或毛細管將樣本充滿兩個小室.不要過滿或不足.
8. 計數4個大方格中細胞核的總數(1x1x0.1mm)或>100個細胞.分別死細胞和活細胞.死細胞染成藍色的死細胞(因為細胞完整性破壞,細胞吸收台盼藍),活細胞透明有折光（未染色）.
9. 活細胞計數按以下方法計算：
每個方格中活細胞總數平均值x稀釋倍數x104= 活細胞數/mL
㈤ 高中常用的細胞計數法有哪幾種分別適用於哪種情況
細胞計數法是用來計數細胞懸液中細胞數量的一種方法。一般利用計數板(血球計數板)進行。即可用於分離(散)細胞培養接種前計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,也可用於對培養物的細胞數量進行計數。不論計數的對象如何,均須制備分散的細胞懸液。 1、 制備細胞懸液 對於懸液培養的細胞,可直接進行下面的步驟2(計數與計算過程)。如果計數對象為貼壁生長的細胞,首先需將培養物制備成細胞懸液。 (1) 終止培養,將培養液吸出,用PBS洗培養物一次。 (2) 給培養瓶內加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,於37℃消化3～5min 。期間不斷在鏡下觀察。當細胞變圓接近脫壁時,棄消化液。 (3) 加入一定量的培養液(如果這些培養細胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使細胞脫壁而製成細胞懸液。 2、計數與計算過程 ( 1) 在細胞計數板中央放置計數專用的蓋玻片。 (2) 用玻璃虹吸管吸取細胞,讓虹吸管在蓋玻片上或下側的計數板凹糟處流出懸液,至蓋玻片被液體充滿為止。 (3) 置顯微鏡下計數四角大方格內的細胞總數。對於壓線的細胞只計數在上線和左線者,對於細胞團按單個細胞計數。 (4) 按下式計數細胞懸液的密度：細胞密度＝(4個大格細胞總數/4)×104個/ml 注意事項： (1) 務必使分散成單個細胞,取樣計數前,充分混勻細胞懸液。 (2) 顯微鏡下計數時,遇到2個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算。如果細胞團>10%,說明細胞分散不充分; 或細胞數<200個/10mm2或>500個/10 mm2 時,說明稀釋不當,需重新制備細胞懸液。
㈥ 到底怎樣計數細胞呢稀釋倍數怎麼算
一般來說，細胞的計數方法是：細胞數/mL=4個大格細胞總數/4×10000×稀釋倍
數
操作步驟：
1.取10ul細胞懸液與10ul台盼蘭混合均勻於1.5ml離心管中。
2.蓋上蓋玻片，取10ul混合液自血球計數盤上方加入，於10倍生物顯微鏡下觀察，活細胞不染色，死細胞被染成藍色。
3.分別計數四個大方格，得到細胞總數，再除以4，乘以稀釋倍數（本實驗為2），最後乘以104，即為每ml細胞懸液中細胞數。若細胞位於線上，只計上線與左線（計上不計下，計左不計右）。
註：
1.細胞數/ml＝4大格細胞總數×稀釋倍數×104/4；每一大格的體積為＝0.1cm×0.1cm×0.01cm＝10-4ml
2.計數板計數時，最適細胞濃度為5～10×105個/ml，此范圍外計數誤差偏大。
3.高濃度細胞懸液，可取出部分作稀釋或連續稀釋後計數。
例
活細胞數/方格：55，62，49，59；死細胞數/方格：5，3，4，6；細胞總數＝243
平均細胞數/方格＝60.75；稀釋倍數＝2；
細胞數/ml：60.75×104×2＝1.22×106；
細胞數/flask（10ml）：1.22×106×10ml＝12.2×106
存活率：225/243﹦92.6%
㈦ 用血細胞計數板計數的方法叫什麼
用血細胞計數板計數的方法叫直接計數法。
解析：1.細菌數量的統計方法一般包括：直接計數法和間接計數法。
2.直接計數法：利用特定的細菌計數板或者血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積樣品中微生物的數量。一般用血細胞計數板對酵母菌進行計數。
3.間接計數法：一般是指稀釋塗布平板法。
㈧ 細胞培養，一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數,用什麼方法計，如何操作呢
用血球計數板計數
操作步驟：
1.視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數可數為度。 2．取潔凈的血球計數板一塊，在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
3．將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣摘入一 小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區，勿使氣泡產生，並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上（不要使計數區兩邊平台沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片後，造成計數區深度的升高），然後加蓋蓋玻片（勿使產生氣泡）。
4．靜置片刻，使細胞沉降到計數板上，不再隨液體漂移。將血球計數板放置於顯微鏡的載物台上夾穩，先在低倍鏡下找到計數區後，再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。
5．計數時若計數區是由16個大方格組成，按對角線方位，數左上、左下、右上、右下的4個大方格（即100小格）的菌數。如果是25個大方格組成的計數區，除數上述四個大方格外，還需數中央1個大方格的菌數（即80個小格）。為了保證計數的准確性，避免重復計數和漏記，在計數時，對沉降在格線上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位於大方格的雙線上，計數時則數上線不數下線，數左線不數右線，以減少誤差。即位於本格上線和左線上的細胞計入本格，本格的下線和右線上的細胞按規定計入相應的格中。見右圖：即本格中計數細胞為3個。
6．對於出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數2-3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），按公式計算出每mL（g）菌懸液所含細胞數量。
7．測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈後自行晾乾或用吹風機吹乾，放入盒內保存。
計算方法（酵母為例）：
(1)16格×25格的血球計數板計算公式：
酵母細胞數/ml=100小格內酵母細胞個數/100×400×10四次方×稀釋倍數
(2)25格x16格的血球計數板計算公式:
酵母細胞數/ml=80小格內酵母細胞個數/80×400×10四次方×稀釋倍數
㈨ 細胞計數的方法
你好，很高興為你解答：
顯微鏡直接計數法：
顯微鏡直接計數法是將小量待測樣品的懸浮液置於一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上（又稱計菌器），於顯微鏡下直接計數的一種簡便、快速、直觀的方法。細胞(英文名:cell)並沒有統一的定義，比較普遍的提法是:細胞是生物體基本的結構和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成，但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現。
㈩ 血細胞怎麼做計數實驗
實驗
目的原理 了解血細胞計數的原理並掌握紅細胞、白細胞、血小板計數的方法，紅細胞計數結果結合血紅蛋白值還可以計算出紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)可作為生理機能檢查和臨床診斷的指標。用相應的稀釋液將血液稀釋若干倍(另有抗凝、固定、著色作用)，置於計數室中，在顯微鏡下計數一定容積內的血細胞數。 稀釋血液有血細胞吸管法和試管法，本實驗採用後者。
實驗對象與用品 雞或家兔。血細胞計數板、專用蓋玻片、吸血管、顯微鏡、手撳計數機、血細胞稀釋液、拭鏡紙、毛筆。
方法步驟
(一)熟悉計數室
血細胞計數板系一長方形厚玻片，常用的改良牛氏(Improved-Neubauer) 計數板在中央橫溝的兩邊各有一計數室，兩計數室結構完全相同。計數室較兩邊的蓋玻片支柱低0.1毫米。因此，放上蓋玻片時，計數板與其間距即計數室空間的高為0.1毫米(圖8-1)。在低倍顯微鏡下可見計數室被雙線劃分成９個邊長為１毫米的大方格。四角的大方格又各分為１６個中方格，這是用來計數白細胞的。中央大方格被劃分為２５個中方格，每一中方格又劃分成１６個小方格(圖8－2稱２５×１６，也有的計數板為１６×２５的，小方格面積一致)。中央大方格的四角及中心５個中方格(１６×２５者則為四角上的中方格)為紅細胞或血小板計數范圍。
(二)紅細胞計數
先用試管稀釋法制備禽類血細胞懸液：將禽類紅細胞稀釋液Ⅰ、Ⅱ分別置水浴鍋中預熱到４１～４２℃，取Ⅰ液１mL於試管中，用吸血管加入新鮮雞血(或肝素抗凝血)２０霯，再加入Ⅱ液１mL混勻，置該水浴鍋中保溫５０s左右，置室溫，即為待檢的血細胞懸液。可用於充液計數。取干潔的計數板，置於水平的顯微鏡載物台上，蓋上蓋玻片，使兩側各空出少許。搖勻血細胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置於蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細胞懸液憑毛細管作用吸入計數室內，剛好充滿計數室為宜(圖8－3)。靜置２min後計數，先用低倍鏡觀察，不均勻則拋棄。計數時用虹彩、集光器、反光鏡等調節入射光角度和強度，認清 計數室位置。採用「由上至下，由左至右，順序如弓」的順序，對壓邊線細胞採取「數上不數下，數左不數右」的原則(圖8～4)。依次計數並記錄５個中方格中分別有多少個紅細胞。
(三)血小板計數
採取血液並立即與抗凝劑混合(由於血小板具有趨向於凝集和粘附於異物表面的特性)。以血小板稀釋液(１０％EDTANa2 １０mL與０.８％NaCl９０mL組成)將血液稀釋２００倍，混勻後滴入血細胞計數室內，靜置１５min，待血小板下沉後。於高倍鏡下計數(同紅細胞 計數)。在高倍鏡下血小板呈橢圓形、圓形或不規則的折光小體分布於紅細胞間，注意與雜質相區別。也可用復方尿素稀釋液稀釋血液，應靜置２０min以上，待紅細胞充分溶解後再充液計數。
(四)計算
按計數室構造及血液稀釋倍數,將血細胞計數結果換算成每立方毫米中血細胞的個數。以每１００mL血液中的血紅蛋白量（g）乘以１０再除以紅細胞數（106/mm3）得紅細胞平均血紅蛋白量（MCN，單位μμg）。
(五)儀器洗滌
計數板、蓋玻片和測定管用清水沖洗，再用綢布或細布沾干。
要求與思考題
１.計算結果，報告中簡要說明計算過程。求出本組同學測定的均值並評價之。
２.了解各類稀釋液成分，分析各物質的作用。
注意事項
１.充液前應充分混勻血細胞懸液，充液要連續、適量，充液後應待血細胞下沉後再計
數。
２.計數板、蓋玻片、吸血管及測定管等用過後必須立即按要求洗滌干凈。
組織建議 將相同類型的計數板集中在一個組內，便於指導。本實驗屬於基本操作，各位朋友均應獨立操作得出結果。
附註：
1.本法可同時計數禽類白細胞數，計算方法也類似。
2.禽類血細胞稀釋液為：
Ⅰ液
中性紅 25.0mg
NaCl 0.9g
加蒸餾水至100.0mL
Ⅱ液
結晶紫 12.0mg
檸檬酸鈉 3.8g
福爾馬林 0.8mL
加蒸餾水至100.0mL
3.哺乳類紅細胞稀釋液可用生理鹽水或阿揚(Hayem)氏液(NaCl 1g，Na2SO4·10H2O 5g，HgCl2 0.5，加蒸餾水至200mL過濾)。白細胞稀釋液成分為冰醋酸0.1mL，1%龍膽紫1mL加蒸餾水至100mL，或直接用2%醋酸溶液。
4.血小板復方尿素稀釋液配方為：尿素10g，檸檬酸鈉0.5g，甲醛0.1mL，加蒸餾水到100mL，混合，待完全溶解後過濾。置冰箱內可保存1～2周。