pr與rna分析方法

1. RNA的提取方法步驟及原理.

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心後，裂解液分層成水相和有機相。RNA存在於水相中。

水相轉移後，RNA通過異丙醇沉澱回收。移去水相後，用乙醇可從中間相沉澱得到DNA，加入異丙醇沉澱可從有機相得到蛋白質。

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與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過鹼基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。

RNA的鹼基配對規則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。

在細胞中，根據結構功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉運RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質的模板，內容按照細胞核中的DNA所轉錄；tRNA是mRNA上鹼基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉運者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質合成的工作場所。

2. 分離DNA和RNA主要方法有哪些

[思路分析]：①取雞血細胞液（其紅細胞橢圓具核,除駱駝外,豬、羊、狗等哺乳動物紅細胞無核）,或取新鮮豬肝、菜花、洋蔥等材料.雖然在細菌的轉化實驗中提取的是無核細胞中的DNA,但一般而言,均是從具核的生物材料中提取DNA.當然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞質DNA,即線粒體DNA和葉綠體DNA.值得推介的材料是洋蔥,取材容易,操作簡便,效果明顯.將家用加鹽洗潔精與洋蔥碎屑混合研磨並過濾後,再加酒精,微搖後即出現白色的毛絮狀DNA混合物.②使紅細胞溶血破膜以及化學葯劑十二烷基磺酸鈉 SDS（洗潔精的主要成分）或三氯乙酸溶膜.在低滲溶液中,如加蒸餾水使血細胞過度滲透吸水直至破裂,同時用玻棒加速血細胞及核破裂,經一級過濾後濾出液為DNA核蛋白和RNA核蛋白.對於菜花、洋蔥等植物材料,在研磨破壞其細胞壁的同時,可考慮適量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在濃氯化鈉溶液（2 mol/L）中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化鈉溶液（0.14mol／L）中DNA的溶解度最低,蛋白質的溶解度很高而出現鹽溶現象,經二級過濾後濾出液主要為DNA粗製品.④DNA不溶於酒精,經三級過濾後,再利用乙醇沉澱法使其他物質溶於酒精而進一步純化DNA.⑤二苯胺或甲基綠鑒定法即DNA遇二苯胺（沸水浴）被染成藍色,遇甲基綠被染成藍綠色,且顏色的深淺與DNA純化程度有關.在此過程中設計對照實驗,以增強實驗中二苯胺對DNA專一性顯色結果的可信度.分離DNA和RNA主要方法有哪些

3. 檢測DNA和RNA檢測方法有什麼區別

您好！檢測DNA的方法有：1.光密度測定。2.瓊脂糖電泳凝膠檢測法。3。二苯胺法。
檢測RNA的方法有：1.光密度測定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共軛雙鍵，使鹼基，核苷，核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段強烈的吸收峰，因此核酸具有紫外吸收特性，在260nm,處是最大的紫外光吸收值，根據朗波-比爾光吸收定律來計算出核酸含量。

4. 圖示中心法則並闡明DNA、RNA和Pr的關系

再從RNA傳遞給蛋白質的轉錄和翻譯的過程，只有寄生到寄主細胞中後才發生，RNA分子產生與其序列互補的DNA分子，以及遺傳信息從DNA傳遞給DNA的復制過程.com/view/15948:
http，這個過程即為反轉錄(reverse
transcription)，在病毒單獨存在時是不能進行的。在反轉錄酶催化下，這種DNA分子稱為互補DNA(complementary
DNA)，簡寫為cDNA中心法則是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA://ke..com/view/15948://ke

5. 預對某個基因的表達（RNA和Pr水平）進行定性和定量分析，可採用的技術路線和主要實驗方法

檢測mRNA表達水平可以做RT-PCR或者northern-blot，定量分析可以做real time PCR。
檢測蛋白表達水平可以用western-blot，定量分析可以做流式細胞分析。