mrna定性或定量分析方法

A. RNA定量分析的方法有哪些

核酸總含量可用紫外吸收法和定磷法測定,用地衣酚顯色法測定RNA含量,二苯胺顯色法測定DNA含量。
如果樣品較純，直接用紫外吸收測定就行。
real-time RT-PCR需要設計引物......

B. 檢測組織中某基因mrna定量的方法有哪些

所謂基因表達,就是從DNA到mRNA再到蛋白的一個過程,基因表達水平一般是通過該基因轉錄的mRNA的多少來衡量的.每個基因轉錄產生的mRNA的量,是受到時空等多種因素調控的,個體在不同的生長發育階段,或者不同的組織水平,基因轉錄出mRNA的量都是不一樣的.例如,當某種植物長期生長在高鹽的環境里,該植物體內與抗鹽相關的基因的表達量就會增加,以適應這種高鹽環境,是植物能夠生存下來,這時植物抗鹽相關的基因表達水平就相對高,希望我的回答能夠幫你弄清這個問題,

C. 蛋白定量分析

蛋白質的定量定主要有直接紫外吸收法、Bradford法和Lorry法三種。

蛋白質中存在著含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，所以任何一個蛋白質都具有280nm附近的紫外吸收峰，在此波長范圍內，蛋白質溶液的光密度OD280nm與其濃度呈正比關系。

改良的Bradford法，蛋白質與染料考馬斯亮藍G-250結合，在一定的線性范圍內，反應液595nm處吸光度的變化量與反應蛋白量成正比，測定595nm處吸光度的增加即可進行蛋白定量。

Lorry法。蛋白質與鹼性銅溶液中的Cu2+絡和使得肽鍵伸展，從而使暴露出的酪氨酸和色氨酸在鹼性銅條件下與福林試劑反應，產生藍色，在一定濃度范圍內，其顏色的深淺與蛋白質中的酪氨酸和色氨酸的含量成正比，由於各種蛋白質中的酪氨酸和色氨酸的含量各不相同，因此在測定時需使用同種蛋白質作標准。

總RNA和DNA都可以用紫外分光光度計在260nm和280nm處測定吸光度值進行濃度換算，dsDNA換算系數為50,RNA為40,oligoDNA20,ssDNA約為37.此外260nm/280nm的比值還可以反映出RNA和DNA的純度。RNA比值應在2.0而DNA在1.8左右

mRNA的定量需要藉助其他生物方法,現在最常用的就是qPCR,就是定量PCR.其中有最常用的是real-time PCR 這種方法可以相對定量或者絕對定量出mRNA的表達水平.

D. 目的mRNA如何檢測

先提取RNA，反轉錄成cDNA，然後根據目的基因設計PCR引物，通過半定量RT-PCR確定目的基因表達。

正因為檢測的是mRNA，所以要先反轉錄成cDNA才能PCR。

E. 預對某個基因的表達（RNA和Pr水平）進行定性和定量分析，可採用的技術路線和主要實驗方法

檢測mRNA表達水平可以做RT-PCR或者northern-blot，定量分析可以做real time PCR。
檢測蛋白表達水平可以用western-blot，定量分析可以做流式細胞分析。

F. 檢測細胞中mRNA水平的方法有哪些

如果檢測一個或者少數mRNA的話，可以提取總RNA之後反轉錄，用熒光定量pcr檢測其表達量。如果需要檢測大量基因的表達的話，用基因晶元或者轉錄組測序會比較好

G. 通過什麼方法檢測mrna和蛋白質的穩定性

實時熒光定量PCR檢測mRNA的表達，然後westernblot檢測蛋白表達量。

H. 定量分析與定性分析方法

常用的定量分析方法，包括回歸分析、時間序列分析、決策分析、優化分析、投入產出分析等方法。

常用的定性分析方法，包括歸納分析法、演繹分析法、比較分析法、結構分析法等分析方法。

德爾菲法，是採用背對背的通信方式征詢專家小組成員的預測意見，經過幾輪征詢，使專家小組的預測意見趨於集中，最後做出符合市場未來發揮在那趨勢的預測結論。德爾菲法又名專家意見法，是依據系統的程序，採用匿名發表意見的方式，即團隊成員之間不得互相討論，不發生橫向聯系，只能與調查人員發生關系，以反覆的填寫問卷，以集結問卷填寫人的共識及搜集各方意見，可用來構造團隊溝通流程，應對復雜任務難題的管理技術。

德爾菲法的具體實施步驟如下：

（1）組德爾菲法 成專家小組。按照課題所需要的知識范圍，確定專家。專家人數的多少，可根據預測課題的大小和涉及面的寬窄而定，一般不超過20人。

（2）向所有專家提出所要預測的問題及有關要求，並附上有關這個問題的所有背景材料，同時請專家提出還需要什麼材料。然後，由專家做書面答復。

（3）各個專家根據他們所收到的材料，提出自己的預測意見，並說明自己是怎樣利用這些材料並提出預測值的。

（4）將各位專家第一次判斷意見匯總，列成圖表，進行對比，再分發給各位專家，讓專家比較自己同他人的不同意見，修改自己的意見和判斷。也可以把各位專家的意見加以整理，或請身份更高的其他專家加以評論，然後把這些意見再分送給各位專家，以便他們參考後修改自己的意見。

I. 想測試一個基因的MRNA表達量，用什麼方法最好如果是原位雜交和免疫組化是不是定量不準那RT-PCR呢

對於基因蛋白表達的定量一般不會用到原位雜交和免疫組化，這兩個方法的優點是更加直觀，但定量困難，適合用作定性實驗。個人認為定量實驗檢測最好用RT-PCR進行核酸層面的檢測，或者用免疫學方法直接檢測蛋白量，比如ELISA等；蛋白電泳（包括2D）可以進行半定量的實驗。另外定量實驗要注意的是選擇合適的內參，電泳要注意平衡好上樣量。

J. 定量研究和定性研究的方法是什麼

一、定量研究設計的主要方法有調查法、相關法和實驗法。

1、調查法

調查法是一種古老的研究方法，是指為了達到設想的目的，制定某一計劃全面或比較全面地收集研究對象的某一方面情況的各種材料，並作出分析、綜合，得到某一結論的研究方法。

2、相關法

相關法是指經由使用相關系數而探求變數間關系的研究方法。相關研究的主要目的，是在確定變數之間關系的程度與方向。變數關系的程度，有完全相關、高相關、中等相關、低相關或零相關等；而變數關系的方向有正相關和負相關等。

3、實驗法

實驗法是指操縱一個或一個以上的變數，並且控制研究環境，藉此衡量自變數與因變數間的因果關系的研究方法。實驗法有兩種，一種是自然實驗法，另一種是實驗室實驗法。

二、定性研究的主要方法包括： 與幾個人面談的小組訪問，要求詳細回答的深度訪問，以及各種投影技術等。

定量研究與定性研究的區別

1、著眼點不同

定量研究著重事物量的方面；定性研究著重事物質的方面。

2、在研究中所處的層次不同

定量研究是為了更准確地定性。

3、依據不同

定量研究依據的主要是調查得到的現實資料數據，定性研究的依據則是大量歷史事實和生活經驗材料。

4、手段不同

定量研究主要運用經驗測量、統計分析和建立模型等方法；定性研究則主要運用邏輯推理、歷史比較等方法。

5、學科基礎不同

定量研究是以概率論、社會統計學等為基礎，而定性研究則以邏輯學、歷史學為基礎。

6、結論表述形式不同

定量研究主要以數據、模式、圖形等來表達；定性研究結論多以文字描述為主。定性研究是定量研究的基礎，是它的指南，但只有同時運用定量研究，才能在精確定量的根據下准確定性。