諾如病毒檢測方法病原學

① 諾如病毒的診斷方法

1.臨床診斷病例：主要依據流行季節、地區、發病年齡等流行病學資料、臨床表現以及實驗室常規檢測結果進行診斷。在一次腹瀉流行中符合以下標准者,可初步診斷為諾如病毒感染：
（1）潛伏期24～48h；
（2）50%以上發生嘔吐；
（3）病程12～60h；
（4）糞便、血常規檢查無特殊發現；
（5）排除常見細菌、寄生蟲及其它病原感染。
2.確診病例：除符合臨床診斷病例條件外，在糞便標本或嘔吐物中檢測出諾如病毒。

② 如何針對一名細菌感染患者進行病原生物學的診斷

摘要：病原微生物種類繁多，變異迅速，快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前，應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶元、多聚酶鏈反應等，該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物，又稱病原體，有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強，往往造成世界性大流行，因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣，檢測周期長，而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展，病原學診斷已不再局限於病原體水平，深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶元技術等檢測方法，自動化程度高，快速省時、無污染、結果精確，可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主，將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1．1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小，大多無色半透明狀，將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速，對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用，例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和設備，在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1．2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間，檢測周期較長，不能同時處理批量樣本。為解決這一問題，各種自動化培養和鑒定系統不斷產生，傳統鑒定方法也在逐步改進，大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀，可同時做細菌鑒定和葯敏試驗，檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高，常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基，大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌，生長指數明顯高於血平板。1．3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體，包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的，將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養，再將病原體接種於相應的組織細胞中後，病原體可在其中繁殖增長，引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內，引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術，簡化了鑒定步驟，常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性，不僅可檢測樣本中病原體抗原，也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50％ ～80％ ，應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染，其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高，ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上，通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物，在外部磁場磁力的作用下，將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠，如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等，廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測，檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌，免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測，肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS．PCR檢測，檢測時間縮短到10 h，最低檢測限可達10cfu·g～，有研究者利用IMBS結合實時熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒，檢測時間大大縮短；Leon—Velarde等利用IMB8結合酶聯檢測，大大提高了沙門菌的檢測效率。3 基因檢測隨著科技水平發展，分子生物學檢測技術日新月異，對病原微生物的鑒定已不再局限於對普通外部形態結構和生理生化特性等的一般檢驗上，而是深入到了分子水平、核酸水平。病原微生物的核酸序列即基因片段都是特異的，有別於其他種或屬，檢測其特有的基因片段序列可用來鑒別病原微生物。隨著科技的發展，基因檢測技術逐漸代替其它檢測技術，成為臨床檢驗科和基礎實驗室對病原體的主流檢測技術。3．1 核酸雜交技術具有一定互補序列的核苷酸單鏈在液相或固相中按鹼基互補配對原則締成異質雙鏈的過程叫核酸雜交，其雜交雙方是所使用探針和要檢測的核酸。在病原微生物檢測中核酸分子雜交主要包括膜上印跡雜交和核酸原位雜交兩種。膜上印跡雜交是指將核酸從微生物細胞中分離出來，純化後在體外結合到一定的固相支持物上，與存在於液相中標記的核酸探針進行雜交。核酸原位雜交是指標記的核酸探針直接與細胞或組織切片中的核酸進行雜交。探針還可以用熒游標記，在熒光顯微鏡或激光掃描共聚焦顯微鏡下即可鑒別病原體還可顯示在三維空間中的位置。核酸分子雜交檢測技術與其它方法相比顯著地優點是簡便、敏感、快速、特異。Wong 等用熒游標記2個不同的寡核苷酸探針從血液標本中檢測出假單胞菌屬和不動桿菌屬的細菌，最低檢測限為10 cfu·mL～，特異度為100％ ，檢測時間不到2 h。寡核苷酸探針是針對病原體特異基因序列設計的，可以將待檢測的病原體定位在不同的分類等級，如科、屬、種、亞種「 。（病原微生物檢測技術進展）3．2 基因晶元技術基因晶元(DNA chip)又稱為DNA微陣列(DNA microarray)或DNA晶元，是生物晶元的一種 j，是核酸分子雜交技術發展延伸而來的。通過微加工技術，將數以萬計甚至百萬計的基因探針即DNA片段有規律地排列成二維DNA探針陣列，固定到矽片、玻片等固態支持物上，與標記的樣品分子進行核酸雜交，用於基因檢測工作。其測序原理與核酸雜交一樣，但解決了傳統核酸雜交技術操作繁雜、檢測效率低、自動化程度不高的缺點。基因晶元在病原微生物感染診斷上的應用，大大縮短了確診所需要的時間，而且能檢測出病原體是否耐葯、對那些抗生素耐葯、對那些抗生素敏感。Naas 等設計的基因晶元可以檢測出銅綠假單胞菌、腸桿菌屬、鮑氏菌屬中各型B一內醯胺酶類耐葯基因。蔡挺等設計的基因晶元檢測出大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑氏不動桿菌、陰溝腸桿菌對l7種抗菌葯物的耐葯率。Batchelor 等開發的基因晶元可以檢測出編碼耐超廣譜8．內醯胺酶、磺胺類、四環素類、氨基糖甙類等47個耐葯基因的大腸埃希菌和沙門氏菌。基因晶元技術同樣還有些問題有待解決，如提高晶元的特異性和檢測信號的敏感性，降低晶元的製作成本等，而且多數晶元都需要昂貴的檢測儀器，這些問題使得基因晶元到目前主要局限於實驗室研究而未能廣泛應用於臨床病原微生物的檢測與鑒定。（病原微生物檢測技術進展）3．3 PCR技術聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種在體外是用已知寡核苷酸引物引導未知片段中微量待測基因片段並進行擴增的技術。由於PCR可以對待測基因進行擴增，特別適用於病原體感染早期的診斷，但是如果引物特異性不強，可能會造成假陽性的出現。PCR技術在近20年裡發展迅速，從基因擴增到基因的克隆和改造以及遺傳分析，可靠性逐步提高。Jbara 用PCR和傳統法直接檢測75例樣本中的流感嗜血桿菌、腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌，與傳統方法相比，PCR檢測的特異度和靈敏度分別為87．3％ 和100％ 。1988年Chamberian等提出了多重PCR的概念，同一PCR反應體系裡加上二對以上引物，可同時擴增出多個核酸片段，適合大量樣本的分析與鑒定。多重PCR具有：(1)高效性，在同一反應體系內可同時檢出多種病原微生物，或對同一病原微生物的不同型別進行分型；(2)系統性，多重PCR很適宜於成組病原體的檢測，如幾種肝炎病毒同時感染；淋球菌、梅毒螺旋體、艾滋病病毒等多重性病病原體的感染；需特殊培養的無芽胞厭氧菌感染；破傷風桿菌，炭疽桿菌，產氣莢膜桿菌，鼠疫耶爾森菌等戰傷感染細菌感染；(3)經濟簡便性，多種病原體在同一反應管內同時被檢出，節省試劑、節約費用、節省時間，為臨床提供更快更多更准確的診斷信息。Reyes等 用多重PCR從90例發熱但培養陰性的兒童細菌性腦膜炎腦脊液樣本中檢測出了腦膜炎奈瑟球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌，特異度100％ ，敏感度89％。實時熒光定量PCR，在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程。具有高度靈敏、高度特異、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點。實時熒光定量PCR對性病病原體早期確診、窗口期篩查、療效檢測、基因變異分析和預後評估等具有重要價值，為流行病學調查提供幫助 J。王娉等 建立了多重實時熒光定量PCR反應體系，同一體系能同時快速檢測出耐甲氧西林和產腸毒素A的金黃色葡萄球菌。熒光基團標記的特異性引物可准確反映病原體感染和葯物療效，特別適用於不可人工培養和難以培養的病原體如病毒、衣原體等感染的診斷。基因晶元技術與多重PCR結合可以通過PCR對目的基因進行放大，通過基因晶元的熒光探針增加檢測的靈敏性和特異性，使得兩種檢測技術的優勢互補，已廣泛應用於病原微生物的檢測。將病原體特異性基因作為靶基因設計出引物與探針，進行多重PCR擴增，制備出寡核苷酸晶元，再對待測樣本靶基因進行多重PCR擴增，將擴增產物與病原菌多重PCR基因晶元檢測體系雜交，可根據雜交信號直觀地判讀樣品中所含病原體的種類、型別、毒力、侵襲力，從而對病原體進行檢測和鑒定。（病原微生物檢測技術進展）3．4 其它基因檢測技術分子生物學技術飛速發展，各種新的基因檢測手段不斷出現。Notomi等於2000年開發出一種新的環介導恆溫核酸擴增法(1oop—mediated isothermal amplifi—cation of DNA，簡稱LAMP)，針對靶基因序列上6或8個特異區域設計出4或6條引物，在具有鏈置換活性的DNA聚合酶的作用下形成環狀結構和鏈置換對目標DNA大量擴增。短短幾年LAMP已被廣泛應用於疾病診斷、食品檢驗、環境監測、生物安全等各方面心 ]。李蒙等 運用LAMP法60 min檢測了16例開放性傷口深部傷口感染分泌物中的破傷風芽孢梭菌，其中陽性為4例，最低檢測限為4 x 10 。有研究報道l2 用LAMP技術快速檢測了200例肺結核患者的痰標本，結核分枝桿菌的陽性檢出率遠遠高於培養法和染色法。多位點可變數目串聯重復序列分析(Multiple—locus Variable—nun—ber Tandem repeat Analysis，MLVA)是一種根據病原體基因組中可變數目串聯重復序列的特徵來對病原體基因分型的一種技術，廣泛應用於金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、炭疽芽胞桿菌等的基因分型與鑒定 ⋯。4 小結與展望對病原體進行快速准確的檢測和鑒定是傳染病防治工作的首要問題。隨著生物學研究由宏觀領域向微觀領域的發展，病原體檢測方法也從組織形態學水平深入到分子水平、基因水平。近年來發展起來的病原微生物高通量檢測技術樣本需要量少、快速省時、無污染、診斷結果精確、自動化程度高，相信隨著研究的不斷進展和深入，這些高通量診斷技術和方法必將在病原微生物的診斷分析方面起到越來越重要的作用，而多種檢測技術的聯合和綜合更是有著廣闊的應用前景。

③ 與其他分子生物學方法相比,用熒光探針RT-PCR法檢測諾如病毒有什麼優勢

方法包括等溫核酸擴增（NASBA）、逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）、熒光染料RT-PCR、熒光探針RT-PCR、多重RT-PCR等，是目前檢測諾如病毒應用最廣泛的方法，被稱為檢測諾如病毒的「金標准」。
NASBA直接擴增RNA來進行檢測，儀器相對簡便，通過瓊脂糖凝膠電泳、印跡雜交或者熒光檢測來鑒定結果，靈敏度低於RT-PCR；RT-PCR通過逆轉錄RNA模板、PCR擴增特異性產物，使用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定結果；熒光染料RT-PCR通過向RT-PCR反應體系中添加非特異性的熒光染料，可以在反應過程中監測擴增產物的生成量，但需要做熔解曲線分析來確定反應的特異性；熒光探針RT-PCR通過特異性的熒光探針與引物，可實時監控反應過程中特異性產物的變化，並且可以實現同一管中多個基因的檢測（多重），特異性較好，假陽性率低，檢測靈敏度可達10-100拷貝/反應，可用於取代普通RT-PCR。

④ 哪家公司有可以同時檢測諾如病毒GI和GII型的試劑RT-PCR法的

電鏡法
直接電鏡法(EM)和免疫電鏡法(IEM)，EM 法觀察的靈敏度較低，要求每毫升糞便樣品中至少有大約 106個病毒粒子，因此只能用於患病早期病毒大量排出時採集的樣本檢測。IEM 法比 EM 法的敏感性可提高 100 倍，主要應用患者恢復期血清捕捉同型抗原，從而增加檢出率。電鏡法的缺陷在於設備昂貴，不能廣泛普及；檢測結果與操作者的技能和經驗有直接關系；靈敏度相對較低；不適於大規模流行病學調查。
免疫法
包括放射免疫法(RIA)、生物素-親和素免疫法(Biotin-Avidin Immunoassy)和酶聯免疫法(ELISA)。RIA法的靈敏度比IEM 法可 提高10～100倍，可以檢測出抗體升高的水平，為流行病學提供更有參考價值的資料。RIA 法的不足之處在於它需要 6 d，且需要放射性同位素標記。為了簡化方法，美國疾病預防控制中心建立了生物素-親和素免疫法，其靈敏度與 RIA 法相當，該方法已成為美國疾病預防控制中心檢測NLV抗原和抗體的標准實驗方法之一。1992年Jiang 等重組桿狀病毒表達NV衣殼蛋白成功後，建立起的 NV 酶聯免疫檢測方法快速、靈敏、經濟，其不足之處是免疫反應的株型特異性太強，所以應用范圍還比較窄。酶鏈免疫法特異性強，靈敏度高，診斷迅速，且較經濟，是可廣泛應用的檢測方法。由於NLV培養還未成功，原來用作試劑的病毒抗原數量受到限制，用分子生物學技術已經可以人工重組NV的衣殼蛋白，從而解決了上述問題。
分子生物學檢測方法
雜交技術和逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)除了能更准確、靈敏地檢測標本中的NV，尤其是低濃度的NV感染外，最大的優點在於可以進一步對病毒進行基因型的研究，不會受到獲得分型單克隆抗體的限制，對流行病學研究具有重要意義。
等溫核酸擴增法 (NASBA)直接擴增RNA 來檢測 NV，樣品中病原RNA得到指數級擴增，產物通過瓊脂糖凝膠電泳或斑點印跡雜交鑒定結果。該方法的靈敏度略低於 RT-PCR 法；整個過程只有一步RNA擴增，避免了RT-PCR存在的RNA交叉污染；縮短了操作時間；假陽性率低。 RT-PCR檢測食物中NV存在樣品病毒量含量低，樣品量大且成分復雜等問題，因此病毒富集濃縮、樣品處理是檢測的關鍵，其中有兩個重要方面影響檢測結果，一是樣品中病毒濃縮後的回收率，二是抽提核酸的完整程度和純度。
病毒濃縮
病毒濃縮 NV 濃縮方法一般分為兩大類，一類為有機絮凝沉澱法，主要使用聚乙二醇（PEG）沉澱，PEG 是具有強烈吸水性以及凝聚和沉澱蛋白作用的高分子聚合物，先改變樣品 pH 值，使毒粒與樣品微粒分開，PEG 把病毒沉澱下來，達到濃縮的目的。目前對於固體樣品 PEG 沉澱法是最有效的濃縮方法。
膜過濾法是另一類有效濃縮病毒的方法，通過改變膜的pH值使之與帶有電荷的毒粒結合捕捉病毒，這種方法通常用在濃縮大體積的黏度小、內容顆粒小的液體食品或水中。檢測海水、生活污水中的NV曾用過這種方法，為瓶裝水和其他飲料濃縮NV提供了參考。
核酸提取
食品樣品成分復雜，所含有的脂肪、蛋白質、金屬離子等物質都是 RT-PCR 反應抑制因子。NV是單鏈RNA病毒，核酸提取方法的優劣取決於兩個方面：核酸的質量和去除抑制因子的能力。應用較成熟廣泛的是胍法 RNA 提取法，即（異）硫氰酸胍-苯酚-氯仿聯合裂解抽提法，該方法改進後製成市售的TRIzol、RNAzol、Ultraspec 等產品，與石英砂、磁珠等多孔顆粒相結合，已結合了poly(dT) 或特異探針的磁珠能較高程度的提純mRNA，去除反應抑制因子。石英砂或磁珠純化 RNA與傳統的有機試劑（異丙醇、乙醇）沉澱 RNA 相比起來，效果較好，只是成本偏高。

⑤ 諾如病毒是什麼病

諾如病毒 Hot廣東河源一小學23名學生感染「諾如病毒」2015-01-11 14:26 更多圖片(3張) 諾瓦克病毒（Norwalk Viruses，NV）是人類杯狀病毒科(Human Calicivirus，HuCV)中諾如病毒（Norovirus,NV）屬的原型代表株。NV是一組形態相似、抗原性略有不同的病毒顆粒。諾瓦克病毒最早是從1968年在美國諾瓦克市暴發的一次急性腹瀉的患者糞便中分離的病原。此後，世界各地陸續自胃腸炎患者糞便中分離出多種形態與之相似但抗原性略異的病毒樣顆粒，均以發現地點命名，如：Hawaii Virus（HV）、Snow Mountain Virus（SMV）、Mexico Virus（MxV）Southampton Virus（SOV）等，先是稱為小圓結構病毒（Small Round Structural Virus,SRSV），後稱為諾瓦克樣病毒（Norwalk-like virus,NLV）直至2002年8月第八屆國際病毒命名委員會批准名稱為諾如病毒（Norovirus,NV）。諾如病毒與在日本發現的札幌樣病毒（Sapporo-like Virus，SLV），正式名稱為札如病毒(Sapovirus,SV)，合稱為人類杯狀病毒。 諾如病毒感染性腹瀉在全世界范圍內均有流行，全年均可發生感染，感染對象主要是成人和學齡兒童，寒冷季節呈現高發。美國每年在所有的非細菌性腹瀉暴發中，60-90%是由諾如病毒引起。荷蘭、英國、日本、澳大利亞等發達國家也都有類似結果。在中國5歲以下腹瀉兒童中，諾如病毒檢出率為15%左右，血清抗體水平調查表明中國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。1995 年，中國報道了首例諾如病毒感染，之後山西、北京、安徽、福州、武漢、廣州 浙江嘉興 等地區先後發生多起諾如病毒感染性腹瀉暴發疫情。 中文名：諾如病毒 外文名：Norovirus 概述：一組杯狀病毒屬病毒 實驗診斷：標本採集 實驗室檢查 爆發案例：中國 德國 日本 病毒特點：諾如病毒屬的原型代表株 界：微生物界 門：病毒門 分享

⑥ 諾如病毒是什麼

什麼是諾如病毒 諾如病毒感染性腹瀉是由諾如病毒屬病毒引起的腹瀉，具有發病急、傳播速度快、涉及范圍廣等特點，是引起非細菌性腹瀉暴發的主要病因。諾如病毒感染性強，以腸道傳播為主，可通過污染的水源、食物、物品、空氣等傳播，常在社區、學校、餐館、醫院、托兒所、孤老院及軍隊等處引起集體暴發。 諾如病毒遺傳高度變異，在同一時期和同一社區內可能存在遺傳特性不同的毒株流行。諾如病毒抗體沒有顯著的保護作用，尤其是沒有長期免疫保護作用，極易造成反復感染。 諾如病毒感染性腹瀉在全世界范圍內均有流行，全年均可發生感染，感染對象主要是成人和學齡兒童，寒冷季節呈現高發。美國每年在所有的非細菌性腹瀉暴發中，60-90%是由諾如病毒引起。荷蘭、英國、日本、澳大利亞等發達國家也都有類似結果。在發展中國家，諾如病毒感染性腹瀉普遍存在，也常引起暴發流行。在我國5歲以下腹瀉兒童中，諾如病毒檢出率為15%左右，血清抗體水平調查表明我國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。1995年，我國報道了首例諾如病毒感染，之後山西、北京、安徽、福州、武漢、廣州等地區先後發生多起諾如病毒感染性腹瀉暴發疫情。 臨床表現 潛伏期多在24～48h，最短12h，最長72h。感染者發病突然，主要症狀為惡心、嘔吐、發熱、腹痛和腹瀉。兒童患者嘔吐普遍，成人患者腹瀉為多，24h內腹瀉4～8次，糞便為稀水便或水樣便，無粘液膿血。大便常規鏡檢WBC

⑦ 病毒鑒定常用方法有哪些

寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學交叉反應，目前主要採用病毒核酸檢測。
開展蚊媒寨卡病毒檢測時，對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時，應同時考慮登革病毒和基孔肯亞病毒感染可能。登革病毒和基孔肯亞病毒實驗室檢測應按照相應的技術指南開展。
（一）臨床標本檢測。
1．病原學檢測
病原學檢測主要適用於急性期血液標本，一般認為發病7天內檢測陽性率高。
（1）核酸檢測：採用熒光定量RT-PCR方法，是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。
（2）病毒分離：將標本接種於蚊源細胞（C6/36）或哺乳動物細胞（BHK21、Vero）進行分離培養，出現病變以後，用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內接種進行病毒分離。
2．血清學檢測
（1）血清特異性IgM抗體：發病3天後可檢出病毒特異性IgM抗體，但發病7天後檢出率高。可採用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應，易於產生假陽性。
（2）中和抗體：採用空斑減少中和試驗方法檢測。患者恢復期血清中和抗體陽轉或滴度較急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染，可以確診。
（二）媒介標本檢測。
1．標本處理
將分類後的伊蚊成蚊或幼蟲，按照採集地點，每10～20隻為一份進行研磨處理。
2．病毒核酸檢測
用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測
3．病毒分離
病毒核酸陽性的標本進行病毒分離。

⑧ 什麼是諾如病毒急性胃腸炎怎樣治療

諾如病毒（Norovirus）是一組杯狀病毒屬病毒，其原型株諾瓦克病毒（Norwalk-like viruses）於1968年在美國諾瓦克市被分離發現。由於該組病毒極易變異，此後在其他地區又相繼發現並命名了多種類似病毒，統稱為諾如病毒。諾如病毒主要存活於受污染的水源，容易造成人類感染性腹瀉。近期，諾如病毒在全球連續引起暴發流行，繼歐洲、澳大利亞及北美地區之後，日本最近也暴發了25年來最嚴重的由諾如病毒引發的感染性腹瀉疫情。據全國病毒性腹瀉監測網路對11個省份5歲以下腹瀉兒童的監測，我國諾如病毒陽性檢出率與往年監測結果基本相似，但專家預測，疫情傳入和擴散的風險較大.衛生部在1月19日發布了:關於加強諾如病毒感染性腹瀉防控工作的緊急通知 （一） 臨床表現 潛伏期多在24～48h，最短12h，最長72h。感染者發病突然，主要症狀為惡心、嘔吐、發熱、腹痛和腹瀉。兒童患者嘔吐普遍，成人患者腹瀉為多，24h內腹瀉4～8次，糞便為稀水便或水樣便，無粘液膿血。大便常規鏡檢WBC

⑨ 什麼是諾如病毒

據報道，近日諾如病毒致無錫一小學55名學生發病，學校為了安全起見，決定停課7天，學生多出現嘔吐腹瀉病例。

預防：

「諾如病毒」感染性腹瀉屬於自限性疾病，沒有疫苗和特效葯物，加強以預防腸道傳染病為重點的宣傳教育，提倡喝開水，不吃生的半生的食物，尤其是禁止生食貝類等水產品，生吃瓜果要洗凈，飯前便後要洗手、養成良好的衛生習慣。