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鑒別rna和dna的方法

發布時間:2022-09-28 13:36:53

『壹』 如何鑒定DNA和RNA(生物)具體做法

如何鑒定DNA和RNA(生物)具體做法
不知道是觀察區分細胞內的DNA和RNA,還是單獨進行鑒定.
如果是前者,可用
甲基綠
—吡咯紅染液染色,DNA被染成綠色,RNA被染成紅色.
如果是後者,可加
二苯胺
沸水浴加熱,冷卻後如為DNA會呈藍色.

『貳』 如何鑒定DNA和RNA(生物)具體做法

高中粗鑒定:用吡羅紅(DNA)和甲基綠(RNA)鑒定.
DNA的鑒定
(1)配製二苯胺試劑:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混勻.
(2)鑒定:取4 mL DNA提取液放入試管中,加入4 mL二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍).用沸水浴(100℃)加熱10 min.在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色).
附1:研磨液的配製方法
Tris:10.1 g(相對分子質量為121.4),先加50 mL蒸餾水溶解,用物質的量濃度為2 mol/L的鹽酸調至pH=8.0,再加下述葯品.
NaCl:8.76 g(相對分子質量58.44)
EDTA:37.2 g(相對分子質量372.24)
SDS:20 g(相對分子質量288.3)
待上述葯品全部溶解後,再用蒸餾水定溶至1000 mL.
若在室溫低於20℃時配製葯液,SDS呈沉澱析出,此時需要加溫,才能將SDS溶解.如果提前配製的研磨液出現了沉澱,則應加溫使沉澱溶解後再使用.
附2:研磨液中幾種葯品的作用
SDS(十二烷基磺酸鈉):可使蛋白質變性,與DNA分離.
EDTA(乙二胺四乙酸二鈉):為DNA酶的抑制劑,可以防止細胞破碎後DNA酶降解DNA.
物質的量濃度為0.15 mol/L的氯化鈉溶液:能很好地溶解DNA.
Tris/HCl:提供緩沖體系,DNA在這個緩沖體系中呈穩定狀態.(Tris為三羥甲基氨基甲烷)
RNA的鑒定
取RNA沉澱約O.2 g,加2 ml 10%H2SO4→沸水浴中加熱2 min→加1.5 ml地衣酚試劑→沸水浴中加熱→觀察顏色變化。

『叄』 檢測DNA和RNA檢測方法什麼區別

您好!檢測DNA的方法有:1.光密度測定。2.瓊脂糖電泳凝膠檢測法。3。二苯胺法。
檢測RNA的方法有:1.光密度測定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共軛雙鍵,使鹼基,核苷,核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段強烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性,在260nm,處是最大的紫外光吸收值,根據朗波-比爾光吸收定律來計算出核酸含量。

『肆』 如何設計實驗區別RNA和DNA

首先要清楚DNA和RNA的區別,然後依此來設計實驗
RNA與DNA最重要的區別一是RNA只有一條鏈,二是它的鹼基組成與DNA的不同,RNA沒有鹼基T(胸腺嘧啶),而有鹼基U(尿嘧啶).所以導致他們有以下性質上的不同.
1.兩性解離:DNA無,只有酸解離,鹼基被屏蔽(在分子內部形成了H鍵).RNA有,有PI.
2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子長度/直徑決定,DNA為線狀分子,RNA為線團.
3.鹼的作用:DNA耐鹼RNA易被鹼水解.
4.顯色反應:
鑒別DNA和RNA+濃HCl RNA ------→ 綠色化合物
DNA ------→ 藍紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心和電泳顯色可用它們.
DNA和RNA的鑒別染色
利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA.吖啶橙作為一種熒光染料已被用於染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記.觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體.雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果,但該方法已被許多實驗室廣泛採用.
5.溶解性:都溶於水而不溶於乙醇,因此,常用乙醇來沉澱溶液中的DNA和RNA.DNA溶於苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉澱RNA.
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,鹼基展開程度越大,紫外吸收就越厲害.當A=1時,DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml.用A260/A280還可來表示核酸的純度.
7.沉降速度:對於拓撲異構體(核苷酸數目相同的核酸),其沉降速度從達到小依次為:RNA ; 超螺旋DNA > 解鏈環狀DNA ; 鬆弛環狀DNA ; 線形DNA也就是在離心管中最上層是線形DNA,最下面是RNA.
8.電泳:核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法.
9.DNA分子量測定最直接的方法:用適當濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數,根據核苷酸的平均分子量就可計算出DNA的分子量.

『伍』 快速鑒定RNA和DNA的方法是什麼

DNA和RNA的鑒別,較常用的方法是利用兩類核酸中不同的戊糖各自具備的不同的顏色反應,而得以定性鑒別。其中鑒定DNA的方法稱為二苯胺法,鑒定RNA的方法稱為地衣酚(苔黑酚,3,5-二羥基甲苯)法。上述顏色反應不但可用於兩類核酸的定性鑒定,也是定糖法定量測定核酸的依據。

『陸』 分離DNA和RNA主要方法有哪些

鹽析法 DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 利用這一特點 選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解 而使雜質沉澱 或者相反 以達到分離目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大後減小 在DNA溶解度最低時 DNA從溶液中析出 而其他雜質還留在溶液中 達到粗提取的目的
酶水解法 採用RNase(可以買)水解雜質RNA如果混入DNase酶可以採用100度加熱15min使其失活 RNase不會失活 反之採用DNase可以提取RNA 混了RNase、時加入蛋白酶K或加碘乙酸鈉

『柒』 如何分離DNA和RNA

[思路分析]
:①取雞血細胞液(其紅細胞橢圓具核,除駱駝外,豬、羊、狗等哺乳動物紅細胞無核),或取新鮮豬肝、菜花、洋蔥等材料。雖然在細菌的轉化實驗中提取的是無核細胞中的DNA,但一般而言,均是從具核的生物材料中提取DNA。當然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞質DNA,即線粒體DNA和葉綠體DNA。值得推介的材料是洋蔥,取材容易,操作簡便,效果明顯。將家用加鹽洗潔精與洋蔥碎屑混合研磨並過濾後,再加酒精,微搖後即出現白色的毛絮狀DNA混合物。②使紅細胞溶血破膜以及化學葯劑十二烷基磺酸鈉 SDS(洗潔精的主要成分)或三氯乙酸溶膜。在低滲溶液中,如加蒸餾水使血細胞過度滲透吸水直至破裂,同時用玻棒加速血細胞及核破裂,經一級過濾後濾出液為DNA核蛋白和RNA核蛋白。對於菜花、洋蔥等植物材料,在研磨破壞其細胞壁的同時,可考慮適量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解。③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA。在濃氯化鈉溶液(2 mol/L)中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小。在稀氯化鈉溶液(0.14mol/L)中DNA的溶解度最低,蛋白質的溶解度很高而出現鹽溶現象,經二級過濾後濾出液主要為DNA粗製品。④DNA不溶於酒精,經三級過濾後,再利用乙醇沉澱法使其他物質溶於酒精而進一步純化DNA。⑤二苯胺或甲基綠鑒定法即DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成藍色,遇甲基綠被染成藍綠色,且顏色的深淺與DNA純化程度有關。在此過程中設計對照實驗,以增強實驗中二苯胺對DNA專一性顯色結果的可信度。

『捌』 怎樣區分DNA與RNA

LS講的DNA遇甲基綠變綠,只能確定存在DNA而無法辨別內部是否存在RNA.RNA遇吡羅紅變紅,所以直觀上可以用吡羅紅檢驗.缺點就是微量的RNA無法檢測出來.粗量估計的話用這個比較直觀也方便.
還有一種方法就是取樣做光譜分析,DNA與RNA的吸收光譜不同,因此能測出微量RNA的存在.

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