1. 內標法和外標法各自的優缺點是什麼
轉載：《分析測試網路網》
內標法：選擇適當的物質作為內標物質，定量加入被測樣品中，跟據被測組分和內標物質的峰面積之比，乘以校正因子，對映內標物質加入量所進行含量測定方法。
內標法的優點：色譜條件對結果影響不大，准確度、精度較高；缺點：選擇合適的內標物質比教困難。
外標法：又稱標准曲線法，依照測量標准品所繪制的曲線來計量被測樣品的含量的方法。
外標法的優點：簡單，適和大量樣品分析。缺點：每次色譜條件很難相同，容易出現誤差。
選用原則
我們一般作體外葯物分析時均採用外標法，體內葯物分析，因提取步驟煩瑣，都採用內標法進行校正，但如果儀器穩定、方法的重現性好，也可使用外標法，國外體內葯物分析用外標法的也有不少，但本人認為最好使用內標法。
實際樣品檢測用外標法的更多。原因：
1.內標物難獲得，特別是同位素標記的有相近行為的內標物；
2.操作步驟多、計算煩瑣
內標法:是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出於操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的准確度。
內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標准物質，它可被色譜拄所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值，即可求出待測組分在樣品中的百分含量。
外標法:
用待測組分的純品作對照物質，以對照物質和樣品中待測組分的響應信號相比較進行定量的方法稱為外標法。此法可分為工作曲線法及外標一點法等。工作曲線法是用對照物質配製一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距。在完全相同的條件下，准確進樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據待測組分的信號，從標准曲線上查出其濃度，或用回歸方程計算，工作曲線法也可以用外標二點法代替。通常截距應為零，若不等於零說明存在系統誤差。工作曲線的截距為零時，可用外標一點法(直接比較法)定量。
外標一點法是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中i組分的含量。將對照品溶液與樣品溶液在相同條件下多次進樣，測得峰面積的平均值，用下式計算樣品中i組分的量：
W＝A(W)／(A)
式中W與A分別代表在樣品溶液進樣體積中所含i組分的重量及相應的峰面積。(W)及(A)分別代表在對照品溶液進樣體積中含純品i組分的重量及相應峰面積。外標法方法簡便，不需用校正因子，不論樣品中其他組分是否出峰，均可對待測組分定量。但此法的准確性受進樣重復性和實驗條件穩定性的影響。此外，為了降低外標一點法的實驗誤差，應盡量使配製的對照品溶液的濃度與樣品中組分的濃度相近。
外標法 external standard method 色譜分析中的一種定量方法，它不是把標准物質加入到被測樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。外標物與被測組分同為一種物質但要求它有一定的純度，分析時外標物的濃度應與被測物濃度相接近，以利於定量分析的准確性。
簡單的說：內標法就是用在樣品中定量加入你要分析的物質，通過測得的實際樣品量和加入樣品量的比值來定量所要分析的樣品含量。內標法主要優點是簡單，快速。缺點是沒有標准曲線法定量精確。
影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。
由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現。
化學方面的因素包括：
1、內標物在樣品里混合不好；
2、內標物和樣品組分之間發生反應，
3、內標物純度可變等。
對於一個比較成熟的方法來說，色譜方面的問題發生的可能性更大一些，色譜上常見的一些問題(如滲漏)對絕對面積的影響比較大，對面積比的影響則要小一些，但如果絕對面積的變化已大到足以使面積比發生顯著變化的程度，那麼一定有某個重要的色譜問題存在，比如進樣量改變太大，樣品組分濃度和內標濃度之間有很大的差別，檢測器非線性等。進樣量應足夠小並保持不變，這樣才不致於造成檢測器和積分裝置飽和。如果認為方法比較可靠，而色譜固看來也是正常的話，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是：面積比可變，而峰高比保持相對恆定，
在製作內標標准曲線時應注意什麼?
在用內標法做色話定量分析時，先配製一定重量比的被測組分和內標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關系曲線，此曲線即為標准曲線。在實際樣品分析時所採用的色譜條件應盡可能與製作標准曲線時所用的條件一致，因此，在製作標准曲線時，不僅要註明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應註明進樣體積和內標物濃度。在製作內標標准曲線時，各點並不完全落在直線上，此時應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標准偏差，在使用過程中應定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小於2，曲線仍可使用，若大於2，則應重作曲線，如果曲線在鉸短時期內即產生變動，則不宜使用內標法定量。
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2. 峰面積歸一法、內標法、外標法區別
色譜定量分析方法可以分為外標法、內標法、歸一化法三大類。當能夠精確進樣量的時候，通常採用外標法進行定量。這種方法標准物質單獨進樣分析，從而確定待測組分的校正因子；實際樣品進樣分析後依據此校正因子對待測組分色譜峰進行計算得出含量。其特點是標准物質和未知樣品分開進樣，雖然看上去是二次進樣，但實際上未知樣品只需要一次進樣分析就能得到結果。外標法的優點是操作簡單，不需要前處理。缺點是要求精確進樣，進樣量的差異直接導致分析誤差的產生。外標法是最常用的定量方法，其計算過程如下：
1．絕對校正因子gi的計算
gi＝ms／Ai
式中ms是標准樣品中組分i的含量，Ai是標准樣品譜圖中組分i的峰面積。
2．外標法的計算公式
mi＝Ai*gi
這里mi是未知樣品中組分i的含量。
（相對校正因子是某組分的絕對校正因子與標准物質絕對校正因子的商。計算公式如下：
Gi＝gi／gs
式中gi是組分i的絕對校正因子，gs是標准物質的絕對校正因子。
對同一類型的不同檢測器來說，在組分i和s相同的情況下，相對校正因子是基本一致的。它只和檢測器的性能、待測組分的性質、標准物質的性質、載氣的性質相關，與操作條件無關。也就是說基本上可是認為相對校正因子Gi是一個常數。相對校正因子在好多相關文獻上可以查到，在無法找到所有組分標准樣品的時候，可以參考使用。但是由於不同檢測器的性能有一定的差異，因此相對校正因子最好在使用的色譜上單獨測定）
歸一化法有時候也被稱為百分法（percent），不需要標准物質幫助來進行定量。它直接通過峰面積或者峰高進行歸一化計算從而得到待測組分的含量。其特點是不需要標准物，只需要一次進樣即可完成分析。
歸一化法兼具內標和外標兩種方法的優點，不需要精確控制進樣量，也不需要樣品的前處理；缺點在於要求樣品中所有組分都出峰，並且在檢測器的響應程度相同，即各組分的絕對校正因子都相等。
選擇適宜的物質作為預測組分的參比物，定量加到樣品中去，依據欲測定組分和參比物在檢測器上的響應值（峰面積或峰高）之比和參比物加入量進行定量分析的方法叫內標法。特點是標准物質和未知樣品同時進樣，一次進樣。內標法的優點在於不需要精確控制進樣量，由進樣量不同造成的誤差不會帶到結果中。缺陷在於內標物很難尋找，而且分析操作前需要較多的處理過程，操作復雜，並可能帶來誤差。
一個合適的內標物應該滿足以下要求：能夠和待測樣品互溶；出峰位置不和樣品中的組分重疊；易於做到加入濃度與待測組分濃度接近；譜圖上內標物的峰和待測組分的峰接近。
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