細胞應激研究方法

A. 李朝軍的個人經歷

1984年進入南京大學生物系動物專業學習，1988年於南京大學生物系攻讀碩士學位，1991年南京大學生物系攻讀博士研究生，1994年畢業獲博士學位。1994年到2008年南京師范大學生命科學學院任特聘教授。2008年聘為南京大學醫學院教授，博士生導師。曾任南京師范大學江蘇省分子醫學生物技術重點實驗室主任，生命科學學院分子細胞生物學研究所所長。1996年到1998年於香港科技大學做博士後。1999年6月到2000年5月在美國耶魯大學醫學院做博士後。2001、2002及2004年到美國匹茲堡大學醫學院做短期訪問。
先後主持參加國家自然科學基金6項（目前主持國家自然科學基金1項），參加國家自然科學基金重點課題一項，主持科技部「十五」攻關重大項目開放課題一項，主持江蘇省自然科學基金2項，教育部青年基金一項。已在國內外發表論文100餘篇，34篇論文為SCI收錄。主要研究興趣如下：
1.細胞分裂調控研究：採用FRET方法研究蛋白質在活細胞內的空間和時間的相互作用，採用CALI方法在活細胞內實時淬滅蛋白質的活性研究其功能，使細胞成為一個「微試管」。目前研究細胞胞質分裂的啟動和完成的時空調控。
2. 細胞應激的信號傳遞研究：研究細胞在低氧、血清飢餓、高糖等應激狀態下MAPK-Egr-1-GGPPS信號通路的作用。我們發現，早期應激反應轉錄因子Egr-1可以通過激活GGPPS表達，影響Ras的異戊二烯化修飾，對胰島素抵抗的形成起調控作用。
3.HGF促進細胞離散的分子機制研究：我們發現肝細胞生長因子HGF可以通過激活經典的Wnt信號途徑，激活MMP7的表達，MMP7通過降解E-cadherin促進了細胞的離散。

B. chop-pcr是什麼意思

CHOP(C/EBP-homologous protein)是轉錄因子C/EBP(CCAAT enhancer binding
protein,CCAAT增強子結合蛋白)的同源蛋白，可以顯性負抑制(dominant negative)的方式抑制轉錄因子C/EBP
和LAP。一些細胞應激(cell stress)如飢餓，可以誘導CHOP表達，CHOP又可以抑制細胞周期從G1到S期的轉換。近期研究發現，內質網應激(ER

stress)時，CHOP的表達水平上調，並且CHOP可介導程序性的細胞死亡即細胞凋亡。CHOP可以介導內質網應激過程中的GADD34的激活和Ero1-Lα的表達。GADD34隨後可以使eIF2α的Ser51去磷酸化，並刺激蛋白合成。Ero1-Lα則可以促進內質網中的氧化應激。CHOP在凋亡中的作用和其促進蛋白合成和誘導內質網內的氧化應激，導致內質網應激密切相關。
CHOP- PCR可測定CHOP基因

C. 什麼是細胞的應激性

細胞的應激性是指對外界環境刺激所做出的反應。

D. 應激的細胞反應

1、熱休克蛋白(HSP)
是指細胞在應激原特別是環境高溫誘導下新合成或合成增加的一組蛋白。其基本功能為幫助新生蛋白質的正確折疊、移位、維持和受損蛋白質的修復、移除、降解，被稱為「分子伴娘」。
2、熱休克反應(HSR)
生物機體在熱應激（或其他應激）十所表現的以基因表達變化為特徵的防禦適應反應稱為熱休克反應

E. 新研究是怎樣揭示癌細胞產生抗葯性的機制的

澳大利亞團隊發表在新一期的美國《科學》雜志上的研究上說，在開展的新研究的時候發現，脫氧核糖核酸在復制過程中一旦暴露在靶向抗癌葯物前，癌細胞及其相關基因在復制過程中就會大大提高細胞變異的幾率，進而就會使癌細胞產生抗葯性。對於如何揭示新研究中癌細胞如何產生抗葯性的機制的，對此我的看法就是先提出設想，然後進行實驗，後來得出規律，並與其他的方法一起結合抑制癌細胞的抗葯機制。

三、根據應激誘導突變機制深入實驗

在得出這一機制之後，團隊進行進一步研究發現，在復制過程中的失誤率只是暫時的，癌細胞發展出抗葯性後就會回到正常的高質量的脫氧核糖核酸復制過程，以確保自身生存。也就是說雖然增加的基因突變率提高了癌細胞產生耐葯性的可能性，但也破壞了細胞其他部分並且對於癌細胞自身產生有害影響。根據這項研究，團隊提出聯合用葯，而實驗證明聯合用葯能大幅減少體內癌細胞生長。

F. 應激反應的常見類型

當個體經認知評價而察覺到應激原的威脅後，就會引起心理與生理的變化。具體的分類有以下兩種：

1、應激引起的心理反應

積極的心理反應是指適度的皮層喚醒水平和情緒喚起；注意力集中；積極的思維和動機的調整。這種反應有利於機體對傳入信息的正確認知評價、應對策略的抉擇和應對能力的發揮。

2、應激引起的生理反應

Cannon從動物在緊急事例面前表現出的「搏鬥或逃跑」（FightorFlight）反應中發現，這種機制涉及同化（副交感，膽鹼能）功能的抑制和異化（交感、腎上腺能）功能的激活。

應激反應的表現：

1、持久性應激反應這是由於應激源長期存在或長時間處於困難環境中而誘發的反應。

2、臨床主要表現為妄想，內容有被害妄想、被監視、牽連觀念，對人不信任等。妄想內容與精神創傷有密切關系，具有現實性和容易暴露的特點。

3、部分病人則以易傷感、沮喪、好哭泣等情感障礙為主。

以上內容參考：網路—應激反應

G. 應激的行為反應都有哪些

1、藍斑(LC)-去甲腎上原素能神經元/交感-腎上腺髓質系統

藍斑為中樞位點，上行主要與大腦邊緣系統有密切的往返聯系，中樞效應與應激時的興奮、警覺、緊張、焦慮的情緒反應有關；下行主要至脊髓側角，行使調節交感-腎上腺髓質系統，外周效應表現為血漿腎上腺素、去甲腎上腺素濃度的迅速升高。

2、下丘腦-垂體-腎上腺皮質激素系統(HPA)

室旁核為中樞位點，上行主要與杏仁復合體、海馬結構等有廣泛聯系，中樞效應與CRH(可能是應激最核心的神經內分泌效應)和ACTH密切相關；下行主要通過促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)和腎上腺皮質(通過ACTH)進行密切往返聯系。

3、應激可引起廣泛的神經內分泌變動

簡單的說，可以把應激理解為壓力或刺激。當人受到應激作用時，人就會產生一種相應的反應，並在新的情況下逐漸地適應。ADH增加、促性腺激素釋放激素(GnRH)↓、胰高血糖素升高、胰島素降低、T3降低、T4降低等。

(7)細胞應激研究方法擴展閱讀：

應激的細胞反應有：

1、熱休克蛋白(HSP)

是指細胞在應激原特別是環境高溫誘導下新合成或合成增加的一組蛋白。其基本功能為幫助新生蛋白質的正確折疊、移位、維持和受損蛋白質的修復、移除、降解，被稱為「分子伴娘」。

2、熱休克反應(HSR)

生物機體在熱應激（或其他應激）所表現的以基因表達變化為特徵的防禦適應反應稱為熱休克反應。熱應激可由環境溫度過高(如燒傷、燙傷)或體內的溫度增高(如發熱)所致,熱應激可以激活多條細胞內的信號轉導通路,促進應激基因的快速表達,以合成多種特異性和非特異性的對細胞具有保護作用的應激蛋白。

參考資料來源：網路—應激

H. 在細胞應激中，為什麼常用lps進行應激

這道題的答案肯定是漿細胞。因為漿細胞要合成大量抗體，因此蛋白質合成和加工過程最活躍，最容易產生內質網應激。 不過，我有些懷疑真實的生命活動中，是否真是如此。

I. 氧化應激指標的常用檢測方法

氧化應激的定量評價方法大致分做三類：

1）測定由活性氧修飾的化合物；

2）測定活性氧消除系統酶和抗氧化物質的量；

3）測定含有轉錄因子的氧化應激指示物。

進一步尚有：

1）生物體內氧化應激的程度足以產生應答；

2）活體內難以蓄積；

3）在活體內不是被代謝，而是穩定存在，等等。理解這些要點對於臨床普及推廣都很有用。

但在臨床上，氧化應激的定量仍舊存在問題。因氧化應激與各種各樣疾病均密切相關，故缺乏特異性，其量化指標難以用於特別指定的疾病。所以目前認為，當用於「全身評價」，或者在已經明確疾病原因為氧化應激後的「嚴重程度及予後」的評價。

(9)細胞應激研究方法擴展閱讀

抗氧化是預防衰老的重要步驟，因為自由基或氧化劑會將細胞和組織分解，影響代謝功能，並會引起不同的健康問題。如果能夠消除過多的氧化自由基，對於許多自由基引起的及老化相關疾病都能夠預防。例如常見的糖尿病、白內障、心血管病、老年痴獃等疾病都被認為與自由基相關。

抗氧化劑能在自然飲食中找到，是被稱為三大抗氧化物質的維生素E、維生素C、和β-胡蘿卜素。他們可以利用自身結構的特性來穩定自由基多餘的電子，防止對細胞造成老化。豆類富含大量的膳食纖維和抗氧化劑，其中紅豆和黑豆抗氧化劑最多。蘋果中含有多種基本維生素和強抗氧化劑。