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細菌接種劃線的方法有哪些

發布時間:2022-04-26 02:33:40

『壹』 連續劃線法操作步驟

連續劃線法步驟:從平板邊緣一點開始,連續作波浪式劃線直到平板的另一端為止,當中不需灼燒接種環上的菌。接種環於酒精燈外焰燒至紅透,接種棒也要充分灼燒,最後再集中燒接種環至紅。

1、輕輕搖勻待接種試管,左手手心托待接種試管底側部,右手執接種環,右手小指拔下試管塞,於酒精燈附近將接種環伸進試管,稍候,再插入待接接種液中,蘸一下,取滿一環,抽出、燒塞、蓋蓋、放回試管架。

或將接種環通過稍打開皿蓋的縫隙伸入平板,在平板邊緣空白處接觸一下使接種環冷卻,然後以無菌操作接種環直接取平板上待分離純化的菌落。

2、靠近酒精燈處打開平皿蓋約30°,右手將環伸進平皿,將菌種點種在平板邊緣一處,輕輕塗布於瓊脂培養基邊緣,抽出接種環,蓋上平皿蓋,然後將接種環上多餘的培養液在火焰中灼燒,打開平皿蓋約30°伸入接種環。

3、待接種環冷卻後,再與接種液處輕輕接觸,開始在平板表面輕巧滑動劃線,接種環不要嵌入培養基內劃破培養基,線條要平行密集,充分利用平板表面積,注意勿使前後兩條線重疊,劃線完畢,關上皿蓋。灼燒接種環,待冷卻後放置接種架上。

培養皿倒置於適溫的恆溫箱內培養(以免培養過程皿蓋冷凝水滴下,沖散已分離的菌落)。培養後在劃線平板上觀察沿劃線處長出的菌落形態,鏡檢後再接種斜面。

劃線分離主要有分區劃線法和連續劃線法兩種。

分區劃線法分離時平板分四個區,故又稱四分區劃線法。劃線時每次將平板轉動60~70°劃線,每換一次角度,應將接種環上的菌燒死後,再通過上次劃線處劃線。

其中第4區是單菌落的主要分布區,故其劃線面積應最大。為防止第4區內劃線與1、2、3區線條相接觸,應使4區線條與1區線條相平行,這樣區與區間線條夾角最好保持120°左右。

1、先將接種環沾取少量菌在平板1區劃3~5條平行線,取出接種環,左手關上皿蓋,將平板轉動60~70°,右手把接種環上多餘菌體燒死,將燒紅的接種環在平板邊緣冷卻,再按以上方法以1區劃線的菌體為菌源,由1區向2區作第2次平行劃線。

2、第2次劃線完畢,同時再把平皿轉動約60~70°,同樣依次在3、4區劃線。劃線完畢,灼燒接種環,關上皿蓋,同上法培養,在劃線區觀察單菌落。

『貳』 微生物學常用的接種技術有哪些各有何特點

細菌的接種方法有很多種,如劃線法、塗布法、傾注法、斜面接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等,其方法和應用各有不同。
一、劃線法:
此法主要用於菌種分純,獲得單菌落.

由接種環沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線,微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少,並逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養後,可在平板表面得到單菌落。

優點:可以觀察菌落特徵,對混合菌進行分離。

缺點:不能用於菌落計數。

二、塗布法:

此法主要用於菌落總數計數.

先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中,然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻,將塗抹好的平板平放於桌上20~30min,使菌液滲透入培養基內,然後將平板倒轉,保溫培養,至長出菌落後即可計數。

優點:可以計數,可以觀察菌落特徵。

缺點:接種前需梯度稀釋,吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。

三、傾倒法:

此法主要用於菌落總數的計數.

吸取1ml 菌液加入平板中,倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基,輕輕轉動平板,使菌液與培養基混合均勻,冷疑後倒置,適溫培養。至長出菌落後即可計數。
優點:可以計數,較方便。

缺點:接種前需梯度稀釋,不能觀察菌落特徵,不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。

四、斜面接種法:

此法主要用於保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力.

用接種環或接種針伸入菌種管內,挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養管內,先從斜面底部到頂端拖一條接種線,再自下而上蜿蜒劃線,或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之後,用火焰滅菌培養管口,並塞上棉塞,置於37℃培養。

五、液體培養基接種法:
此法主要用於菌液比濁實驗

用滅菌接種環挑取菌落或標本,在試管內壁與液面交界處輕輕研磨,使細菌均勻得散落在液體培養基中。

六、螺旋接種法:
此法主要用於菌落總數計數
可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種。對數減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉式培養基表面。培養基上每一點的容量可以被知曉和校準。菌液的濃度可以通過培養皿上一定區域的菌落數量除以同區域樣品分注量來計算。

優點:螺旋接種法菌液無需稀釋(其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數),自動化接種,效率高,可節省3/4 的耗材和時間。

缺點:產品成本高,適用於樣品量比較大的實驗。

『叄』 微生物接種環境有什麼要求常用的接種方法有哪些

微生物接種需要在無菌條件下完成。

常用的接種方法有以下幾種:
1)劃線接種 這是最常用的接種方法。即在固體培養基表面作來回直線形的移動,就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環,接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。
2)三點接種 在研究黴菌形態時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落後,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。
3)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常採用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針。用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養皿中,然後再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之後,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落。
5)塗布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然後再將菌液倒入平板上面,迅速用塗布棒在表面作來回左右的塗布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落。
6)液體接種 從固體培養基中將菌洗下,倒入液體培養基中,或者從液體培養物中,用移液管將菌液接至液體培養基中,或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中,都可稱為液體接種。
7)注射接種該法是用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動物中,常見的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來預防某些疾病。
8)活體接種 活體接種是專門用於培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種於活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。

『肆』 細菌的常用接種方法

細菌接種分為從固體接到液體,從液體接到液體,從液體接到固體。固體接到液體時用接種環在平板或斜面上挑取少許菌落,最好是單菌落,然後放到液體里晃動一下就好了。液體接液體就是按1%的比例吸取菌液,移到新鮮菌液就行了。液體劃線就不說了。

『伍』 接種細菌的三種方法各有什麼用途

接種細菌的方法各有什麼用途:

1、平面接種法:此方法主要用於鑒定或保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力。

2、菌落分純法:此方法主要用於分離瓊脂平板上的混合菌。

3、液體培養基接種法:此方法可用於比濁試驗中。

4、平板劃線接種法(又稱分離培養法):平板劃線接種法為最常用的分離培養細菌的方法,通過平板劃線後,可使細菌分散生長,形成單個菌落,有利於從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法比較多,其中以分區劃線發育曲線劃線法較為重用。其目的都要時細菌呈現單個菌落生長,便於同雜菌菌落鑒別。

5、純培養細菌接種法:用於培養保存菌種及其實驗用。

6、半固體培養基穿刺培養法:用於保存菌種及間接觀察細菌之動力(無動力之細菌僅沿穿刺線生長,清晰可見;有動力的細菌使培養基呈現渾濁樣,穿刺線甚至難以看出。)

接種注意事項:

1、在超凈工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等。

2、應在酒精燈火焰前操作。

3、取菌種前灼燒接種針或接種環(要燒紅)。

4、燒紅的接種針(環)少使冷卻在取菌種,以免燒死菌種。

5、接種後應盡快塞上面塞。

『陸』 為防止細菌污染,在細菌的接種過程中應注意哪些細節(按培養基不同分別

接種細菌時,應注意以下幾項:
1. 在超凈工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等。
2.應在酒精燈火焰前操作。
3.取菌種前灼燒接種針或接種環(要燒紅)。
4.燒紅的接種針(環)稍事冷卻再取菌種,以免燒死菌種 。
5.接種後應盡快塞上棉塞。

接種細菌的方法各有什麼用途:
1、平面接種法:此方法主要用於鑒定或保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力。
2、菌落分純法:此方法主要用於分離瓊脂平板上的混合菌。
3、液體培養基接種法:此方法可用於比濁試驗中。
4、平板劃線接種法(又稱分離培養法):平板劃線接種法為最常用的分離培養細菌的方法,通過平板劃線後,可使細菌分散生長,形成單個菌落,有利於從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法比較多,其中以分區劃線發育曲線劃線法較為重用。其目的都要時細菌呈現單個菌落生長,便於同雜菌菌落鑒別。
5、純培養細菌接種法:用於培養保存菌種及其實驗用。

『柒』 生物中接種方法→平板劃線法要注意什麼

(1)要注意全程無菌操作;

(2)滑動時用力要均勻,切勿將接種環嵌入培養基內;

(3)平板應較硬、較厚、表面乾燥;

(4)需要分區的時候,劃完一個區後必須燒去接種環上的殘菌,待冷卻後再劃另一個區;

(5)劃線的線條宜平行、密集、整齊。

接種是食用菌生產中的關鍵環節之一,如果接種技術不過關,即會造成雜菌污染,成活率低而前功盡棄。無論是菌種分離、傳代還是擴繁,都要在無菌條件下嚴格按照無菌操作規程進行。



(7)細菌接種劃線的方法有哪些擴展閱讀

常用的接種方法

1、三點接種

在研究黴菌形態時常用此法。此法是把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落後,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。

2、穿刺接種

在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常採用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針,用的培養基一般是半固體培養基。用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。

3、澆混接種

將待接的微生物和45℃左右的固體培養基進行混合,這樣菌液就達到稀釋的目的,待平板凝固之後,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落。

4、塗布接種

將菌液倒入凝固的平板上面,用塗布棒在表面作來回左右的塗布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落

5、注射接種

用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動物中,常見的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來預防某些疾病。

6、活體接種

活體接種是專門用於培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種於活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。

『捌』 微生物接種的方法很多最常用的是平板劃線法和什麼

菌種分離純化的方法有:稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。
其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設備,
分離純化效果好,

『玖』 細菌劃線分離法有哪幾種劃線方式,劃線時應注意什麼

用的是四區劃線法或五區劃線法
劃線的形式有多種,可將一個平板分成四個不同面積的小區進行劃線,第一區(A區)面積最小,作為待分離菌的菌源區,第二和第三區(B、C區)是逐級稀釋的過渡區,第四區(D區),則是關鍵區,使該區出現大量的單菌落以供挑選純種用.為了得到較多的典型單菌落,平板上四區面積的分配應是D>C>B>A.
順便說一下,劃線劃得好看不好看並不重要,只要分離效果好就行,每個人都可以有自己理想的劃線方法,但最關鍵的依然是效果.此外大致判斷接種環上的菌量也是日常積累的經驗之一,判斷得好就能將細菌分離得更好.

注意事項
1、平板不能倒得太薄,最好在使用前一天倒好。為防止平板表面產生冷凝水,倒平板前培養基溫度不能太高。
2、用於平板劃線的培養基,瓊脂含量宜高些(2%左右),否則會因平板太軟而被劃破。 3、用於劃線的接種環,環柄宜長些(約10cm),環口應十分圓滑,劃線時環口與平板間的夾角宜小些,動作要輕巧,以防劃破平板。
4、為了取得良好的劃線效果,可事先用圓紙墊在空培養皿內畫上4區,並用接種環練習劃線動作,待通過模擬試驗熟練操作和掌握劃線要領後,再正式進行平板劃線。

『拾』 高中微生物常用的接種方法有哪些

微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作,主要用於微生物的分離純化。具體來說,就是在無菌條件下,用接種環或接種針等專用工具,從一個培養皿(上面可能存在各種雜菌落)挑取所需的微生物,轉接到另一個培養基中進行培養,從而實現所需微生物的純化鑒定,獲得沒有雜菌污染的單純菌落等。
接種的方法有很多,按培養基種類可分為利用固體培養基和利用液體培養基,以及居中的半固體培養基。
固體培養分離,有塗布平板法,倒平板法,平板劃線法,稀釋搖管法等。大部分細菌和真菌用固體培養法即可以得到較滿意的分離結果了。
液體培養基常用稀釋法,比較繁瑣,一般需要重復進行幾次。

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