江蘇怎麼配製細胞凍存液使用方法

A. 細胞凍存液怎麼配

10%-15%（常見為10%）的DMSO或甘油，含10%-20%血清的凍存培養液。

一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞。

有人親測10%血清凍存細胞，結果證明是可以的，但高血清比例的凍存液更有助於提高細胞活力，此外嬌貴的細胞可以適當提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。

(1)江蘇怎麼配製細胞凍存液使用方法擴展閱讀

細胞凍存和復甦的原則：

慢凍速融，這樣更加有利於保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。

常用的凍存保護劑為二甲基亞碸（DMSO）和甘油，凍存細胞時加入保護劑，一方面可以提高細胞膜對水的通透性，另一方面使冰點降低，延緩凍結過程。

緩慢凍存細胞的過程中，加入保護劑可以使細胞內水分滲出到細胞外，一定程度上減少胞內冰晶的產生，而在快速復甦細胞的過程中，能使胞外冰晶迅速融化，防止水分滲入胞內再次形成冰晶而損傷細胞。