吡咯類葯物無菌檢測方法

❶ 細菌L型的檢測方法

細菌變為L型細菌後，其形態和培養特性均發生了改變。由於L型細菌細胞壁缺失，對外界抵抗力降低，普通培養基含瓊脂2%～3% ，氯化鈉(NaC1)0.5%， 相對於L型細菌柔軟的軀體難於附著生長。即使生長，由於低滲原因(相對於L型細菌)易造成L型細菌菌體腫脹，裂解致死，所以必須配製L型細菌的培養基。
⑴L型細菌培養基制備： 基礎培養物加高滲NaC1(3%～6%)、低瓊脂(0.8%～0.9% )、富含血清(20 %)、10 %～20%蔗糖或7%聚乙烯吡咯酮等穩定劑以提高滲透壓。如為乾粉培養基，可採用加NaCI(2%～5%)、血清20%，適當稀釋(使瓊脂含量約為0.8%～0.9%)亦可。同理也可制備L型液體培養基。
⑵2 L型細菌的培養:標本接種於L型培養基，於5%～10% 二氧化碳環境37℃培養，由於生長緩慢，故培養過程中應仔細、耐心，以防止污染，一般生長2～7 d後，形成中間較厚、四周較薄的荷包蛋樣細小菌落。L型細菌在液體培養基中生長後，呈疏鬆的絮狀顆粒，沉於管底，培養液則澄清。
⑶L型細菌的形態:L型細菌的形態因缺乏細胞壁呈高度多形性，有球狀、桿狀、絲狀。此外，L型細菌尚有顆粒型和絲狀型兩種類型。
⑷ L型細菌的葯敏試驗:挑取L型菌落於高滲肉湯，37℃培養6～8 h，以無菌棉簽蘸取，於L型平板密集劃線，貼葯敏紙片置37℃燭缸，24～48 h測抑菌環直徑。

❷ 茶葉農殘檢測項目有那些

茶葉農殘檢測項目:茶葉農殘超標的食品安全事件，在我國也是屢見不鮮。茶葉分散式種植模式也讓農葯殘留成為突出性問題。我國對茶葉農殘檢測的食品安全問題，也建立起系統的標准體系進行規定。像GB2763-2019、GB2763.1-2018、GB23200.26對應茶葉中各類農葯的限量、檢測方法都進行了明確的規定。

一、茶葉中有機雜環類農葯殘留檢測

茶葉中的有機雜環類農葯殘留檢測項目主要是莠去津、乙烯菌核利、腐霉利、氟菌唑、抑霉唑、噻嗪酮、丙環唑、氯苯嘧啶醇、噠蟎靈等農葯殘留的檢測。具體檢測方法就是想將茶葉磨碎進行試樣制備，然後通過使用丙酮一正己烷提取相關的農葯殘留，之後使用活性炭小柱依據中性氧化鋁小柱進行凈化，最終被測物會被丙酮一正己烷洗脫。

二、茶葉中有機氯類農葯殘留檢測

茶葉中有機氯類農葯殘留檢測種類主要有六六六及異構體、滴滴涕及異構體及弄型物、七氯、環氧七氯、艾氏劑、異狄氏劑、六氯苯等。檢測方法也是先制備試樣，然後用丙酮一正己烷進行提取，不同凈化處理使用的是弗羅里硅土-活性炭，然後使用配有電子俘獲檢測器的氣相色譜儀進行測定，定量方法使用內標法。

三、茶葉中二硫代氨基甲酸酯類農葯殘留檢測

茶葉中二硫代氨基甲酸酯類農葯殘留檢測種類主要如下

1、乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽：代森鋅、代森錳、代森鋅錳、代森鈉、代森聯；

2、甲基乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽：甲基代森鋅；

3、二甲基二硫代氨基甲酸酯（鹽）類：福美雙、福美鋅、福美鐵

茶葉中乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽類和甲基乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽類農葯殘留檢測方法：主要將試樣在鹼性乙二胺四乙酸二鈉溶液中轉化為水溶性鈉鹽，加入離子對試劑後，用碘化甲烷進行甲酯化反應，固相萃取柱凈化，甲醇洗脫，洗脫液濃縮至干後，乙腈-0.1%甲酸溶液溶解殘渣，液相色譜-質譜/質譜測定，外標法定量。

茶葉樣品中殘留的二甲基二硫代氨基甲酸酯（鹽）類農葯殘留檢測方法：將試驗用乙腈提取，加入碘化甲烷甲酯化試劑生成甲酯化衍生物，採用無水硫酸鎂和石墨化碳極性填料分散固相萃取凈化，樣液濃縮至干後，乙腈-0.1%甲酸溶液溶，液相色譜-質譜/質譜測定，外標法定量。

四、茶葉中有機磷類農葯殘留檢測

茶葉中有機磷類農葯殘留檢測種類主要有敵敵畏、甲胺磷、乙醯甲胺磷、樂果、敵百蟲、氧化樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、殺螟硫磷、喹硫磷、殺撲磷、乙硫磷、三唑磷等茶葉中有機磷類農葯殘留檢測方法：先制備試樣，然後將試樣放入水中浸泡，然後使用乙酸乙酯和乙酸乙酯＋正己烷溶液進行提取，通過活性炭進行凈化，之後用配備火焰光度檢測器的氣息色譜儀進行測定，定量方法使用外標法。

五、茶葉中吡唑、吡咯類農葯殘留檢測

茶葉中吡唑、吡咯類農葯殘留檢測種類主要有唑蟎酯、硫化氟蟲腈、氟蟲腈、氟蟲腈碸、溴蟲腈、氟硅唑、野燕枯、吡草醚、吡蟎胺、唑蟲醯胺等。檢測方法主要將制備後的試樣放在 劑萃取儀（ASE)中用乙酸乙酯-正己烷混合溶劑提取，然後使用ENVI-Carb/PSA復合固相萃取小柱凈化，之後用氣相色譜串聯四極桿質譜儀測定，定量方法使用外標法。