單核細胞檢驗科檢測方法

❶ 檢驗科標本採集原則

檢驗科標本採集原則

檢驗結果是臨床醫師在診療過程中所需要的重要信息，臨床醫師可以根據這些檢驗結果及病人的臨床情況來區分疾病的不同階段，觀察疾病的變化，判斷預後或觀察療效。所以分析前階段樣本的質量保證是直接關繫到檢驗結果能否真實客觀地反應患者當前病情的一個重要環節。下面是我為大家帶來的檢驗科標本採集原則，歡迎閱讀。

一、病人准備

1.病人狀態

一般需在安靜狀態下採集標本，如患者處於高度緊張的狀態時，可使血紅蛋白、白細胞增高。由於勞累或受冷等刺激、也可見白細胞的增高。運動能影響許多項目的測定結果。活動的影響可分暫時和持續性兩類。暫時性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續性影響，如激烈運動後使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高，有些恢復較慢，如ALT在停止運動1h後測定，其值仍可偏高30%～50%。

2.飲食

多數試驗要求在采血前禁食12h，因為飲食中的不同成分可直接影響實驗結果。

(1) 餐後血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高，進食高蛋白或高核酸食物，可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。進食高脂肪食物後採集的血液樣本，其血清會出現渾濁，可影響許多檢驗測定的正確性。甚至喝含咖啡的飲料，可引起澱粉酶(AMS)、AST谷丙轉氨酶(ALT)、鹼性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹時間過長，會使GLU，蛋白質降低，而膽紅素升高。

(2) 高脂餐後2～4h采血，多數人ALP含量增高，主要來自腸源性同工酶，且與血型有密切關系，O型或B型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。

(3) 高蛋白質飲食可使血漿尿素、血氨增加，但不影響肌酐含量。

(4) 高比例不飽脂肪酸食物，可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數倍。

(5) 含咖啡因飲料，可使血漿游離脂肪酸增加，並使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。食物如含有動物血液，可引起糞隱血假陽性。

(7) 飲酒後使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加，長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細胞體積增加、谷氨醯轉肽酶亦較不飲酒的病人為高，甚至可以將這三項作為嗜酒者的篩選檢查。

吸煙：癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達8%，而不吸煙者含量在1%以下。此外，兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高，血液學方面亦有變化，白細胞數增加、嗜酸粒細胞減少、中性粒細胞及單核細胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高於非吸煙組。

3.葯物

葯物對檢驗的影響非常復雜，在采樣檢查之前，以暫停各種葯物為宜，如某種葯物不可停用，則應了解可能對檢驗結果產生的影響。慶大黴素、氨芐青黴素可使谷丙轉氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加、維生素C可使血糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸嚴重降低。

4.體位

體位影響血液循環，由於血液和組織間液因體位不同而平衡改變，則細胞成分和大分子物質的改變較為明顯，例如由卧位改為站位，血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由於體位的`因素，在確立參考值時，應考慮門診和住院病人可能存在的結果差異，故採集標本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。

5.時間

病人准備還應考慮病人的生物鍾規律，特別是激素水平分析，如女性生殖激素與月經周期密切相關;膽固醇則在經前期最高，排卵時最低;纖維蛋白原在經前期最高，血漿蛋白則在排卵時減少。生長激素於入睡後會出現短時高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現最低值。故采血時間應在相同時間進行。

二、標本採集

標本採集是直接關系檢驗結果的基本要素，如果標本採集不當，即使最好的儀器設備也難以彌補在採集標本時引入的誤差和錯誤。

現將各種標本的採集要點分述如下：

(一) 血液標本

1.標本採集注意事項：

(1) 采靜脈血時止血帶結扎過久，可引起誤差。如以結扎1min的樣品結果為基數，則結扎3min，可使血漿總蛋白增加5%，膽固醇增加5%，鐵增加6%，膽紅素增加8%，乳酸則不能使用止血帶。

(2) 血清標本應避免溶血。許多物質紅細胞內和血清中(血漿)的含量是不一樣的。如ALT紅細胞內比血清高出數倍。血鉀、AST高出幾十倍，而HDH則高出百倍以上，一旦溶血，特別是嚴重溶血，造成血清(漿)中這些物質的測定值增高，干擾測定結果。

(3) 要特別注意采血不能在輸液的同側進行，更應杜絕在輸液管內采血，因輸液成分會影響檢測結果(使相應的結果偏高，如輸K+、Glu時，可使所測K+、Glu明顯增高)，或使血液稀釋結果偏低。

細胞培養的樣品要採用無菌技術，防止污染。

(4) 標本採集後，必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應有床號、姓名，且應當場核對無誤。

(5) 采血順序 摘自北京協和醫院檢驗科《檢驗樣本留取及採集指南》

推薦採用直針采血方式，順序如下：

①血培養管，②凝血項目管(藍帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(紅帽或黃帽)，⑤肝素血漿管(綠帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

註：採用注射器採集血培養時，厭氧瓶優先。

特殊情況採用蝶翼方式采血，且無血培養管時，順序如下：

①白帽管(棄置管，也可送檢生化免疫項目)，②凝血項目管(藍帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(紅帽或黃毛)，⑤肝素血漿管(綠帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

註：採用蝶翼方式採集血培養時，需氧瓶優先。

在實際工作中，如患者靜脈條件較差，有可能采血不足，血培養優先考慮需氧管，其它管應首先考慮凝血(藍帽)和血沉(黑帽)檢測管，因為這兩種標本對血量要求最嚴格，且二者抗凝劑均為枸櫞酸鈉。

(二) 尿液標本

根據採集時間可分為清晨空腹尿、隨機尿、計時尿(2h、3h、12h、24h等)、午後尿、餐後尿、症狀典型時尿等。

(1) 晨尿為住院病人留尿的主要方法，早晨起床後收集第一次尿，可用尿常規檢驗。

(2) 隨機尿多為門診就診病人的留尿檢驗方法。

(3) 餐後尿為收集進餐後2h尿，主要用於了解葡萄糖代謝情況，用以篩查隱性糖尿病或輕症糖尿病。

(4) 計時尿應於計時開始時排空尿液，然後於規定時間內至截止時間留尿，計時尿多用於腎功能和有形成分排出率的評估，亦用於計算澱粉酶或肌酐的排出率。

(三) 糞便標本

採集後及時送檢，如作原蟲阿米巴檢查應保持一定的溫度，且立即送檢，立即檢查，如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣，而應於晨起時排便前用棉拭擦肛門周圍，可得蟲卵。糞便標本應不污染容器外表，一般以無濾漏容器留取5～10g即可。

(四) 腦脊液、漿膜腔液、關節液

均由臨床醫師穿刺采樣，檢驗科應提供專用的各種試管或容器，及時送送檢。

(五) 痰液標本

採集晨間第一口痰，多用於細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口，經深呼吸數次後用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培養取樣應在抗生素等葯物治療開始之前，如已使用用抗菌葯物，則應選血液葯物濃度最低水平時采樣。

(六) 陰道分泌物

由婦產科醫師采樣後即時送檢，否則影響滴蟲動力，易於漏檢。

(七) 其他標本

根據具體檢驗項目而定，臨床醫師在開申請單前，應同檢驗科相關部門聯系並詢問詳細後，註明檢查要求，再采樣並及時送檢。

總之，各種檢驗標本的採集合適與否，直接關系檢驗質量，應予以重視。

三、標本保存和運送

標本保存和運送是檢驗質量保證的重要環節之一。由於採集的標本受各種因素的影響，可能使檢驗結果受或大或小的誤差，因此必須正確掌握標本保存和運送。標本採集後盡量立即送檢，如在室溫放置時間過長會造成血液成分的變化(如血糖及酶活性降低)，也可造成溶血現象。

(1) 采樣後須立即送檢的常規項目：血氨、血沉、血氣分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細菌培養，特別是厭氧菌培養。

(2) 采樣後0.5h內送檢的常規項目：血糖、電解質、血液細胞學、凝血試驗、體液細胞學、塗片找細菌、黴菌等。

(3) 采樣後1～2 h內送檢的常規項目：各種蛋白質類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。

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❷ 請教：小鼠單個核細胞分離及Ficoll

單核細胞（monocytes）是體積最大的白細胞.其細胞核常偏位,呈多形性,如卵圓形、腎形、馬蹄形、不規則形等,常有折疊感；染色質呈疏鬆網狀,著色較淺.胞質較多,嗜鹼性,但因含大量細小的嗜天青顆粒而染成灰藍色,顆粒含過氧化物酶.血塗片,Giemsa染色 .
單個核細胞是指只有一個細胞核的細胞.一般醫學檢驗書上說的是「外周血中單個核的白細胞」包括「淋巴細胞和單核細胞」.外周血單個核細胞（Peripheral blood mononuclear
cell,PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞.體外檢測淋巴細胞首先要分離外周血單個核細胞,目前主要的分離方法是
Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離.紅細胞和
粒細胞密度大於分層液,同時因紅細胞遇到Ficoll而凝集成串錢狀而沉積於管底.血小板則因密度小而懸浮於血漿中,唯有與分層液密度相當的單個核細胞密
集在血漿層和分層液的界面中,呈白膜狀,吸取該層細胞遞經洗滌高心重懸.本法分離單個核細胞純度可達95%,淋巴細胞約佔90%～95%,細胞獲得率可達
80%以上,其高低與室溫有關,超過25℃時會影響細胞獲得率.

❸ 單核細胞是否單個核細胞如果不是，二者有何聯系

單核細胞（monocytes）體積白細胞.其細胞核偏位,呈形性,卵圓形、腎形、馬蹄形、規則形等,折疊；染色質呈疏鬆網狀,著色較淺.胞質較,嗜鹼性,含量細嗜青顆粒染灰藍色,顆粒含氧化物酶.血塗片,Giemsa染色 .
單核細胞指細胞核細胞.般醫檢驗書說外周血單核白細胞包括淋巴細胞單核細胞.外周血單核細胞（Peripheral blood mononuclear
cell,PBMC)即外周血具單核細胞,包括淋巴細胞單核細胞.體外檢測淋巴細胞首先要離外周血單核細胞,目前主要離
Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度離,血液各形比重存差異,離.紅細胞
粒細胞密度於層液,同紅細胞遇Ficoll凝集串錢狀沉積於管底.血板則密度懸浮於血漿,唯與層液密度相單核細胞密
集血漿層層液界面,呈白膜狀,吸取該層細胞遞經洗滌高重懸.本離單核細胞純度達95%,淋巴細胞約佔90%～95%,細胞獲率達
80%,其高低與室溫關,超25℃影響細胞獲率.

❹ 人血單核細胞的提取方法

DNA和RNA的提取，您可採用現有的試劑盒方便快捷，對於血樣DNA的提取步驟如下，可參考：
(1) 冷凍血樣(主要為血細胞)室溫解凍，個轉移500 μL至1.5 mL Eppendorf管，加入等體積PBS液，充分混勻，12 000 r/m離心10 min (4℃)，棄去上清液，重復上述步驟至上清夜透明、沉澱呈淡黃色。
(2) 在離心管中加入DNA抽提緩沖液500 μL，搖動，使血細胞沉澱脫離離心管管壁，37℃水浴1 h。
(3) 加蛋白酶K 5 μL (20 mg/mL)並混勻，55℃過夜至澄清，尚未澄清者，可補加5 μL蛋白酶K混勻繼續消化直至澄清。
(4) 將反應液冷卻至室溫，加Tris-飽和酚500 μL，溫和搖動離心管20 min，使其充分混勻；4℃，12000 r/m離心10 min，將上清液轉入另一1.5 mL離心管中，重復一次。
(5) 加氯仿500 μL，充分混勻20 min，4℃，12000 r/m離心10 min，將上清液轉入另一1.5 mL離心管中。
(6) 加氯仿和異戊醇混合液(24:1) 500 μL，充分混勻20 min，4℃，12000 r/m離心10 min，將上清液轉入另一1.5 mL離心管中。
(7) 加0.1倍體積的NaAc緩沖液及2倍體積的冰冷的無水乙醇，混合轉動離心管直至白色的絮狀沉澱析出，-20℃保存30 min～60 min。
(8) 4℃，12000 r/m離心10 min，棄上清液，用體積分數70%的冷乙醇漂洗DNA沉澱2次。
(9) 4℃，12000 r/m離心10 min，棄上清液，室溫下使乙醇揮發干凈，約3～4 h。
(10)乾燥後的DNA溶於80～100 μL的TE液，4℃保存直至DNA完全溶解。
(11) 8 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測其質量，待分光光度計測定濃度後，-80℃保存不知道對你有沒有幫助

❺ 五分類血細胞分析指的是什麼

將血液中的白細胞分成五個類別：中性桿狀核粒細胞、中性分葉核粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜鹼性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞，通過一些儀器的檢測對紅細胞、白細胞等進行分析的技術。

而其發展離不開庫爾特兄弟的庫爾特原理，因此大量血細胞分析儀在各國的實驗室里發揮著作用。常用的設備為半自動或全自動生化檢測儀。

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檢測方法

1、阻抗、激光散射和熒光染色技術檢測法

直流電阻抗法（DC）用於測量細胞體積大小。這種技術主要應用在Sysmex研製和開發的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析儀中，中儀康輝（北京）國際貿易有限公司為該系列產品國內部分區域分銷商。

2、電阻抗和射頻電導聯合檢測法

這種方法是分別採用四個檢測系統來檢測不同類型的細胞：淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統、嗜酸性細胞和嗜鹼性細胞兩種檢測系統、幼稚細胞檢測系統。

3、多角度激光偏振光散射檢測法

採用這種技術的儀器使用鞘流液將標本血稀釋，稀釋後白細胞的內部結構近似於自然狀態，只有嗜鹼性細胞由於其吸濕的特性而使細胞結構有輕微改變。

4、採用圖像分析的單純細胞檢測法

該技術採用圖像分析法，將血片染色，用含有掃描鏡頭的顯微鏡掃描每個視野，將獲取的細胞圖像與儀器內存儲的標准圖像進行對照分析，判斷該細胞的類型。

❻ 血常規檢查方法包括哪些項目

血常規檢查即傳統的血常規檢查，現在統稱為血液分析，血液分析有兩種方法，即手工法和儀器分析法。手工法為傳統方法，用顯微鏡檢測，包括血紅蛋白、紅細胞計數、白細胞計數和白細胞分類等四項。儀器分析法則除上述四項外，根據儀器的性能不同，並因白細胞分類不同而分為二分類機、三分類機和五分類機，通常以三分類為多。三分類機檢查的各項參數見例表。 血液分析參考值(包括儀器分析法和手工法) 檢查項目 英文縮寫 正常參考值 血紅蛋白 HGB或Hb 男(120-160)g/L 女(110-150)g/L 紅細胞計數 RBC 男(4.0-5.5)×1012/L 女(3.5-5.0)×1012/L 紅細胞壓積 HCT 男(0.40-0.54)L/L 女(0.37-0.48)L/L 平均紅細胞體積 MCV (80-92)fk 平均紅細胞血紅蛋白含量 MCH (27-31)pg 平均紅細胞血紅蛋白濃度 MCHC (320-360)g/L 紅細胞分布寬度 RDW 11.6-14.8% 血小板計數 PLT或BPC (100-300)×109/L 血小板壓積 PCT 男0.108%-0.272% 女0.114%-0.282% 平均血小板體積 MPV (6.8-13.5)fk 血小板分布寬度 PDW 15.5%-18.1% 白細胞計數 WBC 成人(4-10)×109/L 兒童(5-12)×109/L 新生兒(15-20)×109/L 分類 DC ＾ 嗜中性粒細胞百分數 N或GRAN 50%-70% 嗜中性粒細胞絕對值 N或GRAN (2-7)×109/L 嗜酸性粒細胞百分比 E或EOS 0.5%-5.0% 嗜酸性粒細胞絕對值 E或EOS (0.02-0.5)×109/L 嗜鹼性粒細胞百分比 B或BASO 0-1% 嗜鹼性粒細胞絕對值 B或BASO (0-0.1)×109/L 單核細胞百分比 M或MONO 3-8% 單核細胞絕對值 M或MONO (0.12-0.8)×109/L 淋巴細胞百分數 L或LYM 20%-40% 淋巴細胞絕對值 L或LYM (0.8-4.0)×109/L 中間值細胞百分數 MID 3-10% 中間值細胞絕對值 MID (0.3-1.0)×109/L (文章出處：家庭醫生報 2001年第28期)

❼ 傳染性單核細胞增多症的檢查

血白細胞總數正常、升高或減少，可先正常或減少，1周末升高，淋巴細胞增多，血塗片中異型淋巴細胞比例≥10%。血清EB病毒抗體測定，早期抗原（EA）-IgG效價≥1：20，病毒衣殼抗原（VCA）-IgM陽性或效價≥1：10，VCA-IgG效價≥1：160，或VCA-IgG在恢復期比急性期升高4倍以上，EB核抗原在病程3～4周陽性。分子生物學方法檢測血液、唾液、口腔上皮細胞、尿液中的EB病毒DNA陽性。骨髓檢查基本正常。
此外還可行肝脾B超檢查。出現並發症時，可進行相應的檢查如X線胸片、心電圖等。

❽ 單核細胞是什麼

單核細胞是血液中最大的血細胞，也是體積最大的白細胞，是機體防禦系統的一個重要組成部分。單核細胞來源於骨髓中的造血幹細胞，並在骨髓中發育，當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。

目前認為它是巨噬細胞和樹突狀細胞的前身，具有明顯的變形運動，能吞噬、清除受傷、衰老的細胞及其碎片。單核細胞還參與免疫反應，在吞噬抗原後將所攜帶的抗原決定簇轉交給淋巴細胞，誘導淋巴細胞的特異性免疫性反應。

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與其他血細胞比較，單核細胞內含有更多的非特異性脂酶，並且具有更強的吞噬作用。當機體發生炎症或其他疾病都可引起單核細胞總數百分比發生變化，因此檢查單核細胞計數成為輔助診斷的一種重要方法。

單核細胞也是對付細胞內致病細菌和寄生蟲的主要細胞防衛系統，還具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力。

正常值參考范圍

1.單核細胞百分比（MONO%）：0.03～0.08（3%～8%）

2.單核細胞絕對值（MONO#）：(0.12～0.8)×10^9/L