設計簿層色譜法鑒別洋金花方法

Ⅰ 薄層色譜法的原理

薄層色譜法的原理：薄層色譜法利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層色譜法（TLC）系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開後，根據比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對比，用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。

Ⅱ 薄層色譜法用於雜質檢查常用的方法有哪些

雜質對照法,供試品對照法,對照葯物法,顯色劑.
薄層色譜法(TLC)，系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開後，根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比，用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。

Ⅲ 下面是我在一個葯材網上看到的資料，大惑不解。洋金花與曼陀羅花不是同一種植物

【拉丁名】 Flos Daturae

【英文名】Upright Datura Flower

【別名】曼陀羅、羊驚花、山茄花、風茄花、楓茄花、醉仙桃、大麻子花、廣東鬧羊花、大喇叭花、金盤托荔枝、假荔枝

【來源】本品為茄科植物白花曼陀羅 Datura metel L.的乾燥花。4～11 月花初開時採收，曬干或低溫乾燥。

亦可用同屬其它植物的花，如曼陀羅、毛曼陀羅等。

【產地】栽培或逸為野生。主產江蘇，廣東、浙江、安徽亦產。

【植物形態】一年生草本，高30～200cm，近無毛。葉互生，莖上部近對生，卵形或寬卵形，長30～200cm，近無毛。葉互生，莖上部近對生，卵形或寬卵形，長5～19cm，寬4～12cm，先端尖，基部不對稱，全緣、微波狀或每邊具3～4短齒；葉柄長2～7cm。花單生，花冠漏斗狀、白色，檐部5裂，栽培品常有重瓣；雄蕊5～15。蒴果扁球形，直徑約3cm，表面疏生短硬刺，成熟後不規則開裂。花果期4～11月。

【性狀】本品多皺縮成條狀，完整者長9～15cm 。花萼呈筒狀，長為花冠的2/5,灰綠色或灰黃色，先端5 裂，基部具縱脈紋5 條，表面微有茸毛；花冠呈喇叭狀，淡黃色或黃棕色，先端5 淺裂，裂片有短尖，短尖下有明顯的縱脈紋3 條，兩裂片之間微凹；雄蕊5,花絲貼生於花冠筒內，長為花冠的3/4 ；雌蕊1 ，柱頭棒狀。烘乾品質柔韌，氣特異；曬干品質脆，氣微，味微苦。

【鑒別】

（1） 本品粉末淡黃色。花粉粒類球形或長圓形，直徑42～65μm,表面有條紋狀雕紋。花萼非腺毛1～3細胞，壁具疣狀突起，腺毛頭部1～5細胞，柄1～5細胞。花冠裂片邊緣非腺毛1～10 細胞，壁微具疣狀突起。花絲基部非腺毛粗大，1～5細胞，基部直徑約至128μm，頂端鈍圓。花萼、花冠薄壁細胞中有草酸鈣砂晶、方晶及簇晶。

（2） 取本品粉末1g，加濃氨試液1ml ，混勻，再加氯仿25ml，搖勻，放置過夜，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml 使溶解，作為供試品溶液。另取硫酸阿托品與氫溴酸東莨菪鹼對照品，加甲醇製成每1ml 各含4mg 的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述兩種溶液各10μl ，分別點於同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯－甲醇－濃氨試液（17:2:1）為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

【化學成分】含多種莨菪烷類生物鹼，以東莨菪鹼（scopolamine）含量較高，莨菪鹼（hyoscyamine）少量。

【含量測定】

取本品細粉約10g ，於60℃乾燥4 小時，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醇－濃氨試液－乙醚（5:4:10）的混合液使濕潤，放置 12 小時，加乙醚70ml，加熱迴流約 3小時，至生物鹼提盡，提取液置水浴上蒸去大部分乙醚，加入0.25mol/L硫酸溶液25ml 混合，繼續蒸發除盡乙醚，放置至溶液微溫時，用脫脂棉濾過，濾液置分液漏斗中，濾渣先用0.25mol/L硫酸溶液5ml 洗滌，再用水10ml分2次洗滌，洗液與酸液合並，用氯仿分次振搖提取（10ml、5ml、5ml），至氯仿層無色，合並氯仿液，用0.05mol/L硫酸溶液10ml 振搖提取，棄去氯仿液，合並前後得到的兩次酸液，用濃氨試液中和後，再多加2ml，迅速用氯仿分次振搖提取（20ml、15ml、15ml、10ml、5ml） ，至生物鹼提盡，每次氯仿提取液均通過同一放有無水硫酸鈉的濾器濾過，濾器用氯仿4ml 洗滌2次，合並氯仿液，在水浴上蒸去氯仿，殘渣中加中性乙醇3ml,蒸干，再繼續加熱15分鍾。殘渣加氯仿2ml ，微熱使溶解，精密加入硫酸滴定液（0.01mol/L）20ml,置水浴上加熱，除去氯仿，放冷，加甲基紅指示液2～3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L） 滴定至黃色。每1ml 硫酸滴定液（0.01mol/L） 相當於 6.068mg的東莨菪鹼（C17H21NO4）。

本品於60℃乾燥4 小時，含生物鹼以東莨菪鹼（C17H21NO4） 計，不得少於0.30％。

【性味歸經】味辛，性溫；有毒。歸心、肺、肝經。

【功能主治】平喘止咳，鎮痛，解痙。用於哮喘咳嗽，脘腹冷痛，風濕痹痛，小兒慢驚；外科麻醉。

【用法用量】 0.3～0.6g ，宜入丸散，亦可作卷煙分次燃吸（一日量不超過1.5g）。外用適量。

【注意】外感及痰熱咳喘、青光眼、高血壓及心動過速患者禁用。

【貯藏】置乾燥處，防霉，防蛀。

【備注】（1）中毒可出現口乾，皮膚乾燥，瞳孔散大，脈快，顏面潮紅，甚則使血壓下降而致死。解救可服吐劑，洗胃並服鞣酸制劑，後給以鹽類瀉劑，強心劑，鎮靜劑。亦有用綠豆皮4兩，金銀花2兩，連翹1兩，甘草5錢。水1000毫升，煎至200毫升，1次服，每2小時服1次。

【摘錄】《中國葯典》

Ⅳ 薄層色譜法的操作步驟及注意事項

薄層色譜法的操作步驟及注意事項如下：
1、薄層板點樣後，應待溶劑揮發完，再放人展開室中展開。
2、展開應密閉，展距一般為8~15cm。薄層板放入展開室時，展開劑不能沒過樣點。一般情況下，展開劑浸入薄層下端的高度不宜超過0.5cm。
3、展開劑每次展開後，都需要換，不能重復使用。
4、展開後的薄層板用適當的方法，使溶劑揮發完全，然後進行檢視。
5、Rf值一般控制在0.3~0.8，當Rf值很大或很小時，應適當改變流動相的比例。
注意事項：鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀：過稠，板容易出現拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發後，板表面較粗糙勻漿配比般是硅膠G：水=1：2～3，硅膠G：羧甲基纖維素鈉水溶液=1：2。研磨勻漿的時間，根據經驗來定，與空氣濕度有關，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板塗層的厚度，進一步影響上樣量。塗層薄，點樣易過載；塗層厚，顯色不那麼明顯。通常，板的質量對薄層鑒別的影響不是很，影響最大的是展開劑的配製和展開系統的飽和。

Ⅳ 什麼叫薄層色譜法原理是什麼！！急！！

一、薄層色譜法

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。

二、薄層色譜法的基本原理

例如用硅膠和氧化鋁作支持劑，其主要原理是吸附力與分配系數的不同，使混合物得以分離。當溶劑沿著吸附劑移動時，帶著樣品中的各組分一起移動，同時發生連續吸附與解吸作用以及反復分配作用。

由於各組分在溶劑中的溶解度不同，以及吸附劑對它們的吸附能力的差異，最終將混合物分離成一系列斑點。如作為標準的化合物在層析薄板上一起展開，則可以根據這些已知化合物的Rf值（後面介紹Rf值）對各斑點的組分進行鑒定，同時也可以進一步採用某些方法加以定量。

(5)設計簿層色譜法鑒別洋金花方法擴展閱讀：

薄層色譜法（TLC）薄層色譜具有選用范圍廣，重現性好等優點，常用於中葯各種成分的鑒別。

用固定波長對薄層展開的各斑點作薄層掃描圖譜比目測的層析圖譜更為客觀准確，因而具有更好的指紋鑒別意義。但由於受薄層板的質量和開放式層析系統等外界因素的影響，易引起一定的實驗誤差。

薄層色譜法與紙層析和紙層析比較TLC快速、分離效率高、靈敏度高、顯色方法多樣、圖像易保存。

Ⅵ 如何保證所建立的薄層色譜鑒別方法的專屬性

如何建立薄層色譜法測定有關物質的方法
有關物質是研究葯品中除主成分以外的雜質，它可能是原料葯合成過程中帶入的原料、中間體、試劑、降解物、副產物、聚合體、異構體以及不同晶型、旋光異構的物質，也可能是制劑過程中產生的降解物，或是在貯藏、運輸、使用過程中產生的降解物等。這些雜質的存在直接反映葯品的有效性和安全性，故要對其進行研究，特別是在葯品申報的質量研究資料中需建立其檢測方法，並根據生產、穩定性考核等實際情況考慮是否在質量標准中制訂該檢查項，規定其限度。目前，有關物質的常用測定方法有高效液相色譜法(HPLC法)和薄層色譜法(TLC法)。
1．測定方法類型
常用的方法有雜質對照品法（適用於已知雜質）和自身（稀釋）對照法（適用於一般雜質檢查，雜質成分少且尚不能取得雜質對照品）。目前國內由於難以獲得雜質對照品、故一般均採用自身對照法。
2．展開劑的確定（即專屬性試驗）
專屬性的研究是提供被分析物在雜質和輔料存在時能被區分的證明，該點是色譜條件建立的關鍵。通常採用在被分析物的對照品或精製品中加入一定量的雜質或輔料，證明色譜條件可將各雜質與被分析物分離[1]。這里的關鍵是：將多少量的雜質加入到多少量的主成分中。正確的作法是將1%(w/w)濃度量的各雜質加入到100%濃度的主成分中，配製這樣的溶液來
驗證系統適用性。之所以如此配製，目的是模仿樣品中有可能存在的狀態，即有少量（1%左右）雜質存在時是否能與主成分達到完全分離，只有這樣才能比較客觀、科學地反映樣品中實際存在情況的（見圖1）；而不應把該溶液配製成：主成分與中間體相同濃度的。因為一者實際檢測時樣品中不可能存在此種情況；二者該濃度不易確定，目前國內申報資料中一般的作法均是配製成較低的一致濃度，這樣各斑點當然易於完全分離了，但在實際測定時，由於主斑點急劇增大，很易將相鄰雜質包含於主成分斑點中。同樣，質量標准中的系統適用性試驗用溶液的配製方法亦如此。
3．檢出條件的確定

其基本出發點是：主成分與相關雜質均應在該條件下顯色，且在相同濃度下，斑點大小應基本一致。薄層板的類型根據被測物質的性質來選用，測定有紫外吸收的物質通常選用GF254或GF365板；測定無紫外吸收、需噴顯色劑的，常選用硅膠G板或H板，選用該類薄層板時，顯色方法根據被測物質的結構式選取，但當有多個顯色方法時，應分別進行試驗，選取靈敏度最高的顯色方法。如醋酸氫化可的松有關物質的測定，中國葯典2000年版採用鹼性四氮唑藍試液顯色，美國葯典26版採用硫酸-乙醇(10:90)溶液顯色，兩者均為激素類葯物的顯色方法。醋酸氫化可的松屬於激素類中的腎上腺皮質激素，四氮唑法是腎上腺皮質激素的重要顯色方法；而硫酸-乙醇顯色法則主要是針對激素類中的雌激素的顯色反應，對於屬於腎上腺皮質激素類的醋酸氫化可的松則反應活性不強，結果兩法的靈敏度相差10倍以上。因此，檢出條件的確定，一定要在查閱文獻的基礎上，並根據試驗結果進行綜合考慮。
4．供試品溶液濃度的確定（靈敏度試驗——最低檢出限的測定）
供試品溶液濃度的設定在有關物質檢測中是至關重要的，濃度越高、越能反映樣品中雜質存在的情況，但若設定得過高，則會產生主斑點嚴重拖尾、「斷腰」等超載現象的發生，產生錯誤結論；若設定太低，又將達不到檢測雜質的目的，觀測不到雜質量的變化。其設定是根據最低點樣量和最大點樣量來綜合考慮的。

最低檢出限雖然是個絕對值，但真正的意義卻是其相對值，即相對於供試品溶液的濃度多少而言，所以測定結果不僅要羅列出其絕對值又應列出其相對值，這樣最低檢出限才有意義！最大點樣量則是通過不斷加大供試品溶液濃度，直至主斑點嚴重拖尾、「斷腰」等情況出現時來得到的。然後根據最低檢出限，採用「上推法」來確定：如一般設定雜質斑點小於1.0%對照斑點，對照溶液的濃度至少應為最低檢出濃度（即最低檢出限）的20~50倍，則供試品溶液濃度是最低檢出濃度的2000~5000倍；反過來，最低檢出濃度應至少達到供試品溶液濃度的0.02%~0.05%。應注意的是：由於最低檢出量和最大點樣量因試驗環境、薄層板質量以及即時試驗時其他各因素的不同而改變（即耐受性因數），故供試品溶液的濃度在保證小於最大進樣量的情況下，可在此基礎上設定得再高一些，以保證該濃度可適用於各種條件下。。

Ⅶ 薄層色譜法的操作

除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡後，倒入塗布器中，在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.2～0.3mm），取下塗好薄層的玻板，置水平台上於室溫下晾乾，後在110℃烘30分鍾，即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。
常用吸附劑的基本情況：顆粒的大小，太大洗脫劑流速快分離效果不好，太細溶液流速太慢。一般說來吸附性強的顆粒稍大，吸附性弱的顆粒稍小。氧化鋁一般在100-150目。氧化鋁分為鹼性氧化鋁，適用於碳氫化合物、生物鹼及鹼性化合物的分離，一般適用於PH為9-10的環境。中性氧化鋁適用於醛、酮、醌、酯等PH約為7.5的中性物質的分離。酸性氧化鋁適用於PH4~4.5的酸性有機酸類的分離。氧化鋁、硅膠根據活性分為五個級，一級活性最高，五級最低。
黏合劑及添加劑：為了使固定相（吸附劑）牢固地附著在載板上以增加薄層的機械強度，有利於操作，需要時在吸附劑中加入合適的黏合劑：有時為了特殊的分離或檢出需要，要在固定相中加入某些添加劑。
薄層板的活化：硅膠板於105-110℃烘30分鍾，氧化鋁板於150-160℃烘4小時，可得活性的薄層板。 除另有規定外，用點樣器點樣於薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，樣點直徑及點間距離同紙色譜法，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
點樣直徑不超過5mm，點樣距離一般為1~1.5cm即可。
樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將呈空心環——環形色譜效應。因此配製樣品溶液時應選擇對組分溶解度相對較小的溶劑。
點樣方式有點狀點樣和帶狀點樣。
展開劑也稱溶劑系統，流動性或洗脫劑，是在平面色譜中用作流動相的液體。展開劑的主要任務是溶解被分離的物質，在吸附劑薄層上轉移被分離物質，使各組分的Rf值在0.2~0.8之間並對被分離物質要有適當的選擇性。作為展開劑的溶劑應滿足以下要求：適當的純度、適當的穩定性、低黏度 、線性分配等溫線、很低或很高的蒸氣壓以及盡可能低的毒性。
展開方式總的來講平面色譜的展開有線性、環形及向心3種幾何形式。
A 單次展開 用同一種展開劑一個方向展開一次，這種方式在平面色譜中應用最為廣泛。（垂直上行展開，垂直下行展開，一向水平展開，對向水平展開）
B 多次展開 單向對此展開，用相同的展開劑沿同一方向進行相同距離的重復展開，直至分離滿意，廣泛應用於薄層色譜法
C 雙向展開 用於成分較多、性質比較接近的難分離組分的分離。
薄層展開室需預先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，並在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂的蓋，使系統平衡或按正文規定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm（切勿將樣點浸入展開劑中），密封室蓋，待展開至規定距離（一般為10～15cm），取出薄層板，晾乾，按各品種項下的規定檢測。
影響展開的因素
A 相對濕度的影響
B溶劑蒸汽的影響（a 展開室的飽和b預吸附）
C 溫度的影響
D 展距的影響與分離度僅正比與展距的平方根。 A 光學檢出法
a自然光（400~800nm）
b紫外光（254nm或365nm）
c熒光一些化合物吸收了較短波長的光，在瞬間發射出比照射光波長更長的光，而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點（靈敏度高、專屬性高）
B 蒸汽顯色法
多數有機化合物吸附碘蒸氣後顯示不同程度的黃褐色斑點，這種反應有可逆及不可逆兩種情況，前者在離開碘蒸氣後，黃褐色斑點逐漸消退，並且不會改變化合物的性質，且靈敏度也很高，故是定位時常用的方法；後者是由於化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強了共軛體系，因此在紫外光下可以發出強烈而穩定的熒光，對定性及定量都非常有利，但是制備薄層時要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質。
C 物理顯色法
用紫外照射分離後的紙或薄層後，使化合物產生光加成，光分解、光氧化還原及光異構等光化學反應，導致物質結構發生某些變化，如形成熒光發射功能團。發生熒光增強或淬滅及熒光物質的激發或發射波長發生移動等現象，從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
D 試劑顯色法
廣泛應用的定位方法。用於紙色譜的顯色劑一般都適用於薄層色譜，還有防腐劑的顯色劑不適合用於紙色譜及含有有機黏合劑薄層的顯色，又時噴顯色劑後續加熱，這也不是用於紙色譜。
顯色方法a噴霧顯色：顯色劑溶液以氣溶膠的形式均勻的噴灑在紙和薄層。b 浸漬顯色：揮去展開劑的薄層板，垂直的插入盛有展開劑的浸漬槽中，設定浸板及抽出速度和規定在顯色劑中浸漬的時間。
顯色試劑
a 通用顯色劑硫酸溶液（硫酸：水 1：1，硫酸：乙醇1：1）、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高錳酸鉀溶液、鹼性高錳酸鉀溶液（還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色斑點）
b 專屬顯色劑
⑸測定比移值
在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個常數，因此有可能根據化合物的Rf值鑒定化合物。
⑹ 薄層掃描
薄層掃描法指用一定波長的光照射在經薄層層析後的層析板上，對具有吸收或能產生熒光的層析斑點進行掃描，用反射法或透射法測定吸收的強度，以檢測層析譜。對於中成葯復方制劑，亦可用相應的原葯材按需要組合作陰、陽對照，然後比較其薄層掃描圖譜加以鑒別。使用儀器為薄層掃描儀。
如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規定外，可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明，結合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由於影響薄層掃描結果的因素很多，故應在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開後掃描，進行比較並計算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結果。

Ⅷ 薄層色譜法及高效液相色譜法鑒別葯物的依據分別是什麼

and with it I leave my curse. My curse on St. Gildas, on Marie Trevec, and on her descendants. I will come back to St. Gildas when my remains are disturbed. Woe to that Englishman whom my branded skull shall touch!』」

Ⅸ 從洋金花提取東莨菪鹼方法

洋金花為茄科植物毛花蔓陀羅(Datum innoxia Miller)的花，主要含生物鹼，為中麻葯方劑中的主葯，臨床上治療氣管炎有效。
一、實驗目的
l、通過本實驗掌握生物鹼的一般提取分離方法。
2、掌握氧化鋁柱色譜分離莨菪鹼和東莨菪鹼的實驗方法，從而了解柱色譜的一般實驗操作技術。
3、了解東莨菪鹼和莨菪鹼的檢識方法。
二、實驗原理
洋金花中的主要化學成份
l、東食著鹼(Scopolamine)又名：莨菪胺、天仙子鹼mp59℃(一水合物)。
2、莨菪鹼（Hyoscyamine）又名：天仙子胺mp108.5℃
3、莨菪酸（Tropic acid） mp118℃
4、去甲莨菪鹼（Norhyoscyamine） mp142℃
5、曼陀羅鹼（Meteloidine） mp141℃

本實驗是利用游離生物鹼及其鹽均能溶於乙醇的性質，用乙醇迴流提取總生物鹼，再利用東莨菪鹼和莨菪鹼鹼性強弱不同，與鹼性氧化鋁吸附力強弱不同，用氧化鋁柱色譜進行分離。
三、實驗內容
(一)提取總鹼：取洋金花粗粉50克，置1000毫升園底燒瓶中加95％乙醇300毫升，置水浴上迴流提取1小時，傾出提取液，葯渣再用95％乙醇200毫升不浴迴流提取30分鍾，傾出提取液，葯渣再用95％乙醇200毫升迴流提取30分鍾，傾出提取液，三次提取液合並，用玻璃漏斗過濾，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮液加1％鹽酸l00毫升使溶解，抽濾，濾液用氯仿(40，20，20毫升)萃取脂溶性雜質，酸水液用10％NaOH調至pH9一l0用氯仿萃取(60，50，30，20毫升)四次，氯仿液用無水硫酸鈉脫水乾燥，回收氯仿得總鹼。
(二)莨菪鹼與東莨菪鹼的分離
這兩種生物鹼我們用鹼性氧化鋁干柱色譜進行分離，其操作步驟如下：
1、裝柱：將色譜柱垂直固定在鐵支架上，柱底填一塊棉花，打開活塞，稱取100—120目鹼性氧化鋁40克，經漏斗慢慢裝入柱中，一邊裝填，一邊用橡皮塞輕輕敲擊色譜柱，使其裝填均勻緊密，最後使吸附劑表面形成一水平面。
2、上樣：將上述所得總生物鹼用少量氯仿溶解，用吸管小心將氯仿溶液加在吸附劑表面上，切勿破壞吸附劑平面，為了防止平面被損壞，可剪一直徑同色譜柱內徑大小一樣的濾紙，小心放在吸附劑平面上，或在其上面加1—2厘米厚的石英砂，把氯仿溶液加到濾紙片上或石英砂上。
3、展開(洗脫)：加樣完畢，立即小心加入氯仿(也應注意防止破壞吸附劑平面)，展開洗脫，當溶劑前沿到達柱底部時，用50毫升錐形瓶收集洗脫液，並控制流速，使每分鍾流出液為60一80滴，每瓶收集50毫升，更換錐形瓶，編上序號，並在柱上經常添加氯仿，使溶劑面始終高於吸附劑表面，東莨菪鹼先洗脫下來，莨菪鹼後洗脫下來。
4、溶劑回收，按序號分別回收溶劑後，再氧化鋁薄層檢查，以氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)展開，改良碘化鉍鉀試劑顯色。相同部分合並。
(三)檢識反應及薄層檢查
1、生物鹼沉澱反應
分別取東莨菪鹼，莨菪鹼少量，置白瓷板中蒸發到干，加2滴稀HCl溶解，
分別加以下生物鹼沉澱試劑：
(1)碘—碘化鉀試液
(2)改良碘化鉍鉀試液
(3)苦味酸試液
觀察結果：
2、Vitali反應：分別取東莨菪鹼和莨菪鹼少量，置於白瓷板中，加發煙硝酸5滴，於水浴上蒸干，放冷後，加10％KOH乙醇溶液2—3滴，觀察顏色變化，並加以解釋。
3、薄層色譜
吸附劑：鹼性氧化鋁150一180目，干法鋪板。
展開劑：氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)
樣品：東莨菪鹼氯仿溶液
莨菪鹼氯仿溶液
東莨菪鹼標准品
莨菪鹼標准品
顯色劑：改良碘化鉍鉀，噴灑
四、實驗說明及注意事項
l、裝柱還可採用濕法：將洗脫劑加到吸附劑中，攪拌成稀糊狀，加到層析柱中，使吸附劑依重力自然下沉到柱底部，打開活塞使洗脫劑流出，但要保證溶劑表面始終高於吸附劑表面。干法裝柱操作簡便、迅速、不受洗脫劑的限制，但柱效不高。
2、柱色譜和薄層色譜用的氧化鋁要注意活度，一般Ⅱ—Ⅲ級即可，活度不夠就不能將樣品中成分分開。