水中亞硝酸鹽檢測方法

1. 用國家標准來測定水樣中食品中亞硝酸鹽測定方法

附：
亞硝酸鹽快速檢測管 使用說明：
方法原理：按照國標GB/T 5009.33做成的速測管，與標准色卡比較定量。
操作方法：
1. 食鹽中亞硝酸鹽的快速檢測及食鹽與亞硝酸鹽的快速鑒別：用袋內附帶小勺取食鹽1平勺，加入到檢測管中，加入蒸餾水或純凈水至1ml刻度處，蓋上蓋，將固體部分搖溶，10分鍾後與標准色板對比，該色板上的數值乘上10即為食鹽中亞硝酸鹽的含量mg/ kg，（國標規定食鹽（精鹽）中亞硝酸鹽的限量衛生標准應≤2 mg/kg）。當樣品出現血紅色且有沉澱產生或很快退色變成黃色時，可判定亞硝酸鹽含量相當高，或樣品本身就是亞硝酸鹽。
2. 液體樣品檢測：直接取澄清液體樣品1ml加入到檢測管中，蓋上蓋，將試劑搖溶，10分鍾後與標准色板對比，找出與檢測管中溶液顏色相同的色階，該色階上的數值即為樣品中亞硝酸鹽的含量mg/L（以NaNO2計）。（牛乳及豆漿也可直接檢測，結果不得超過0.25mg/L ，有顏色的液體樣品可加入一些活性炭脫色過濾後測定）。
3. 固體或半固體樣品檢測：取粉碎均勻的樣品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸餾水或去離子水（純凈水）至刻度，充分震搖後放置，取上清液（或過濾或離心得到的上清液）1.0ml加入到檢測管中，蓋上蓋，將試劑搖溶，10分鍾後與標准色板對比，該色板上的數值乘上10即為樣品中亞硝酸鹽的含量mg/ kg，L（以NaNO2計）。如果測試結果超出色板上的最高值，可定量稀釋後測定，並在計算結果時乘上稀釋倍數（如從10ml比色管中取出1.0mL轉入另一支10ml比色管中，加水至刻度，從中取1.0mL加入到檢測管中測定，測試結果乘上100（倍稀釋）即為樣品中亞硝酸鹽的含量。

2. 測亞硝酸鹽含量操作

GB5009.33—2010 分光光度法

1、原理

亞硝酸鹽採用鹽酸萘乙二胺法測定測定。

試樣經沉澱蛋白質、除去脂肪後，在弱酸條件下亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化後，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料，外標法測得亞硝酸鹽含量。

2、試劑和材料

除非另有規定，本方法所用試劑均為分析純。水為GB/T 6682 規定的二級水或去離子水。

2.1 亞鐵氰化鉀（K4Fe(CN)6·3H2O）

2.2 乙酸鋅（Zn(CH3COO)2·2H2O）

2.3 冰醋酸（CH3COOH）

2.4 硼酸鈉（Na2B4O7·10H2O）

2.5 對氨基苯磺酸(C6H7NO3S）

2.6鹽酸萘乙二胺(C12H14N2·2HCl）

2.7亞硝酸鈉（NaNO2）

2.8硝酸鈉（NaNO3）

2.9鋅皮或鋅棒。

2.10硫酸鎘。

2.11亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)：

稱取106.0g 亞鐵氰化鉀（2.1），用水溶解，並稀釋至1000mL。

2.12乙酸鋅溶液(220g/L)：稱取220.0g乙酸鋅（2.2），先加30 mL 冰醋酸（2.3）溶解，用水稀釋至1000mL。

2.13飽和硼砂溶液(50g/L)：稱取5.0g硼酸鈉（2.4），溶於100 mL 熱水中，冷卻後備用。

2.14對氨基苯磺酸溶液（4 g/L） ：稱取 0.4g對氨基苯磺酸（2.5），溶於100mL20%

（V/V）鹽酸中，置棕色瓶中混勻，避光保存。

2.15鹽酸萘乙二胺溶液（2 g/L）：稱取0.2 g 鹽酸萘乙二胺（2.6），溶於100mL 水中,

混勻後，置棕色瓶中，避光保存。

2.16亞硝酸鈉標准溶液（200 μg/mL）：准確稱取0.1000g於110℃～120℃乾燥恆重的亞硝酸鈉，加水溶解移入500 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。

2.17亞硝酸鈉標准使用液（5.0 μg/mL）：臨用前，吸取亞硝酸鈉標准溶液5.00mL，置於 200mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度。

2.17硝酸鈉標准溶液（200 μg/mL，以亞硝酸鈉計）：准確稱取0.1232g 於110 ℃～120

℃乾燥恆重的硝酸鈉，加水溶解，移於入500mL 容量瓶中，並稀釋至刻度。

2.18硝酸鈉標准使用液（5 μg/mL）：臨用時吸取硝酸鈉標准溶液2.50mL，置於100mL

容量瓶中，加水稀釋至刻度。

3、儀器和設備

3.1 天平：感量為0.1mg 和1mg。

3.2組織搗碎機。

3.3超聲波清洗器。

3.4恆溫乾燥箱。

3.5分光光度計。

4、測定

4.1試樣的預處理

新鮮蔬菜、水果：將試樣用去離子水洗凈，晾乾後，取可食部切碎混勻。將切碎的樣品用四分法取適量，用食物粉碎機製成勻漿備用。如需加水應記錄加水量。

4.2提取

稱取5g（精確至0.01g）製成勻漿的試樣（如制備過程中加水，應按加水量折算），置於

50 mL燒杯中，加12.5 mL 飽和硼砂溶液，攪拌均勻，以 70 ℃左右的水約300mL 將試樣洗入500 mL容量瓶中，於沸水浴中加熱15min，取出置冷水浴中冷卻，並放置至室溫。

4.3提取液凈化

在振盪上述提取液時加入5mL 亞鐵氰化鉀溶液, 搖勻, 再加入5 mL 乙酸鋅溶液，以沉澱蛋白質。加水至刻度, 搖勻, 放置30 min, 除去上層脂肪, 上清液用濾紙過濾, 棄去初濾液30mL, 濾液備用。

4.4亞硝酸鹽的測定

吸取40.0mL 上述濾液於50mL帶塞比色管中，另吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL 亞硝酸鈉標准使用液（相當於0.0 μg、1.0 μg、2.0 μg、3.0 μg、4.0 μg、5.0 μg、7.5 μg、10.0μg、12.5 μg亞硝酸鈉），分別置於50mL 帶塞比色管中。於標准管與試樣管中分別加入2mL 對氨基苯磺酸溶液，混勻，靜置3min～5min 後各加入1mL鹽酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混勻，靜置15min，用2cm 比色杯，以零管調節零點，於波長538nm處測吸光度，繪制標准曲線比較。同時做試劑空白。

5、分析結果的表述

5.1亞硝酸鹽含量計算

亞硝酸鹽（以亞硝酸鈉計）的含量按式（3）進行計算

式中：

X1——試樣中亞硝酸鈉的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；

A1——測定用樣液中亞硝酸鈉的質量，單位為微克（μg）；

m——試樣質量，單位為克（g）；

V1——測定用樣液體積，單位為毫升（mL）；

V0 ——試樣處理液總體積，單位為毫升（mL）。

以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留兩位有效數字。

6、精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%

3. 亞硝酸鹽的檢測是什麼

在檢測水中亞硝酸鹽時通常採用重氮-偶聯反應，使被檢測樣品生成紫紅色染料，然後使用分光光度法進行檢測，這種方法靈敏而且選擇性強。

這種重氮和偶聯的試劑，一般用的都是對氨基苯磺醯胺和a-萘酚，在酸性條件下亞硝酸鹽氮與氨基苯磺醯胺反應，生成重氮鹽，再與a萘酚偶聯生成紫紅色樣品，然後用540m波長進行檢測。

注意事項

由於生活飲用水中常存在亞硝酸鹽，所以不能作為測定用稀釋液。若顯色後顏色很深且有沉澱產生或很快褪變成淺黃色，說明樣品中亞硝酸鹽含量很髙，須加大稀釋倍數重新檢測，否則會得出錯誤結論。陽性樣品需重復檢測一次，仍為陽性應送實驗室復檢。

在做標准曲線的時候可以自行配製，也可以買現成的標准溶液，在移取的時候，可以用移液管或者是移液槍，但是要經過檢驗合格。

以上內容參考網路-亞硝酸鹽

4. 如何化學實驗儀器檢測水中亞硝酸鹽是否存在

用棕色環反應，[Fe+ (NO)+]SO4 硫酸亞硝醯鐵(I) 棕色，可溶性的配合物，利用硫酸亞硝醯鐵(I) 棕色的生成，可用於鑒定NO3- 和NO2-（棕色環反應）。 NO3-的鑒定 3 Fe2+ + NO3- + 4H+ = 3 Fe3+ + NO + H2O FeSO4 + NO ＝ [Fe+ (NO)+]SO4 生成棕色的硫酸亞硝醯鐵(I) NO2-的鑒定 酸性條件下分解 2H+ + 2NO2- = H2O + NO + NO2 3Fe2+ + NO + 2 SO42- = [Fe (NO)]SO4 生成棕色的硫酸亞硝醯鐵(I) 鑒定NO3-，NO2-會有干擾的作用，所以要事先消除 NO2- 的干擾，消除NO2- 干擾的方法是先用I-除去： 2 NO2- + 2 I- + 4 H+ ＝ 2 NO↑ + I2 + 2 H2O NO3- 在稀酸介質中不能氧化I-。參考資料：無機化學網路教程: http://ce.sysu.e.cn/Echemi/inocbx/content/12_4.html

5. 檢驗亞硝酸鈉的方法

先檢亞硝酸鹽，取樣品溶液十毫升，加對氨基苯磺醯胺稀鹽酸溶液1毫升，再加鹽酸萘乙二胺溶液1毫升，應顯粉紅色，鈉的檢驗用焰色法，顯鮮黃色。

6. 亞硝酸鹽的測定原理與有關方程式

主要有碘量法、分光光度法等方法，
碘量法：
在酸性溶液中，碘酸鉀和碘化鉀作用後析出的游離碘，
將水中的亞硫酸鹽氧化成硫酸鹽，過量的碘與澱粉作用呈現藍色即為終點。其反應為：
KIO3＋5KI＋6HCl→3I2＋3H2O＋6KCl
SO32－＋I2＋H2O→SO42－＋2HI
本法適於測定亞硫酸鹽含量大於2mg/L的水樣。
比色法：
亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸作用，生成不穩定的化合物，隨即與α—萘胺作用，生成紅色偶氮化合物。
此偶氮化合物的最大吸收波長為524nm。本方法的測定范圍為0~0.5mg/L。
水樣中亞硝酸鹽的測定就是根據上述反應原理，通過分光光度計比色獲取水樣中亞硝酸鹽的含量。

7. 亞硝酸鈉的檢驗方法

一、 測定方法
重氮化偶合分光光度法二、 方法依據
《生活飲用水衛生規范》（2001）
三、 測定范圍
1. 本法用重氮化偶合分光光度法測定生活飲用水及其水源水中的亞硝酸鹽氮。
2. 本法適用於測定生活飲用水及其水源水中亞硝酸鹽氮的含量。
3. 水中三氯胺產生紅色干擾。鐵，鉛等離子可能產生沉澱，引起干擾。銅離子起催化作用，可分解重氮鹽使結果偏低，有色離子干擾，也不應存在。
4. 本法最低檢測質量為0.05µg亞硝酸鹽氮，若取50mL水樣，最低檢測質量濃度為0.001mg/L。
四、測定原理
在pH1.7以下，水中亞硝酸鹽與氮基苯磺醯胺重氮化，再與鹽酸N-(1萘)-乙二胺產生偶合反應。生成紫紅色的偶氮染料。比色定量。
五、試劑
1.氫氧化鋁懸濁液
稱取125g硫酸鋁鉀[KAl(SO4)2.12H2O]或硫酸鋁銨[NH4Al(SO4)2.12H2O]溶於1000mL純水中。加熱至60oc，緩緩加入55mL氨水(ρ20=0.88g/mL)。使氫氧化鋁沉澱完全。充分攪拌後靜置，棄取上清液。用純水反復洗滌沉澱，至傾出上清液中不含氯離子（用硝酸銀溶液試驗）。然後加入300mL純水成懸濁液，適應前振搖均勻。
2.對氨基苯磺醯胺溶液：（10g/L）
3.鹽酸N-(1萘)-乙二胺溶液（1.09g/L）
4.亞硝酸鹽氮標准儲備液[ρ(NO2-_N)=50µg/mL]：
稱取0.2463g在玻璃乾燥器內放置24h的亞硝酸鈉（NaNO2），溶於純水中，並定容至1000mL。每升加2mL氯仿保存。
5.亞硝酸鹽氮標准使用液[ρ(NO2-_N)=0.1µg/mL]：
取10.00mL標准儲備液於容量瓶中，用純水定容至500mL。再從中吸取10mL，用純水於容量瓶中定容至100mL。
六．儀器
具塞比色管50mL
分光光度計
七．分析步驟
1.若水樣中渾濁度或色度過大，可先取100mL，加入2mL氫氧化鋁懸浮液，攪拌後靜置數分鍾，過濾。
2.先將水樣或處理後的水樣用酸或鹼調進中性，取50mL置於比色管中。
3.另取50mL比色管配製標准濃度系列。其中空白與最低檢測限必須配製。其他系列視檢測的具體情況而定。
4.向水樣及標准系列中分別加入1mL對氨基苯磺醯胺溶液。搖勻後放置2-8min，加入1.0mL鹽酸N-(1萘)-乙二胺溶液。立即混勻。
5.於540nm波長下，用1 cm比色皿，以純水作參比，在10min-2hr內測定吸光度。如含量低於4mg/L，改用3cm比色皿。
6.繪制標准曲線。從標准曲線上查得水樣中亞硝酸鹽氮的含量。
八、計算
ρ（NO2-N）=m/V
式中：ρ（NO2-N）----水樣中亞硝酸鹽氫的質量濃度，㎎/L
m----從標准曲線上查得樣品中亞硝酸鹽氫的質量，㎎
v----水樣體積，mL

8. 如何檢測魚缸水裡的氨和硝亞酸鹽的含量

直接取澄清液體樣品1ml加入到檢測管中，蓋上蓋，將試劑搖溶，10分鍾後與標准色板對比，找出與檢測管中溶液顏色相同的色階，該色階上的數值即為樣品中亞硝酸鹽的含量mg/L。
實驗原理：
在PH 1.7以下，水中亞硝酸鹽與對氨基苯磺醯胺重氮化，再與鹽酸N-（1-萘）-乙二胺產生偶合反應，生成紫紅色的偶氮染料，比色定量。 試劑：
1、 對氨基苯磺醯胺溶液（10g/L）:稱取5g對氨基苯磺醯胺
（H2NC6H4SO3NH2）,溶於350 mL鹽酸溶液（1+6）中。用純水稀釋至500 mL。
2、 鹽酸N-（1-萘）-乙二胺溶液（1.0g/L）：又名NEDD溶液，稱
取0.2g鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺（C10H7NH2CHCH2·NH2·2HCl），溶於200 mL純水中。儲存於冰箱中。可穩定數周，如試劑顏色變深，應棄去重配。
3、 亞硝酸鹽氮標准使用溶液【ρ（NO2-N）=0.10µg/mL】 儀器吸管：（1）、分光光度計
（2）、50 mL具塞比色管： 30支
（3）、5 mL刻度吸管：10支
4、1mL比色皿：1個
分析步驟：
1、 取50mL水樣置於比色管中。
2、 取50mL比色管7支，分別加入亞硝酸鹽氮標准液0mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、7.50mL、10.00mL，用純水稀釋至50mL。
3、 向水樣及標准色列管中分別加入1 mL對氨基苯磺醯胺溶液，搖勻後放置2min~8min。加入1.0 mL鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液，立即混勻。
4、 於540nm波長，用1cm比色皿，以純水作參比，在10min至2h內，測定吸光度。
5、 繪制標准曲線，從曲線上查出水樣中亞硝酸鹽氮的含量。
計算：
ρ（NO2-N）=m/V
註：ρ（NO2-N）——水樣中亞硝酸鹽氮的質量濃度，單位為mg/L
m——從標准曲線上查得樣品管中亞硝酸鹽氮的質量，單位為微克（µg）
V——水樣體積，單位為毫升（mL）

9. 實驗室中亞硝酸鹽應怎樣鑒定

亞硝酸鹽具有強還原性，所以重氮化是其特徵反應之一

一、 測定方法 重氮化偶合分光光度法 質量標准
二、 方法依據 《生活飲用水衛生規范》（2001）
三、 測定范圍 1. 本法用重氮化偶合分光光度法測定生活飲用水及其水源水中的亞硝酸鹽氮。 2. 本法適用於測定生活飲用水及其水源水中亞硝酸鹽氮的含量。 3. 水中三氯胺產生紅色干擾。鐵，鉛等離子可能產生沉澱，引起干擾。銅離子起催化作用，可分解重氮鹽使結果偏低，有色離子干擾，也不應存在。 4. 本法最低檢測質量為0.05µg亞硝酸鹽氮，若取50mL水樣，最低檢測質量濃度為0.001mg/L。
四、測定原理 在pH1.7以下，水中亞硝酸鹽與氮基苯磺醯胺重氮化，再與鹽酸N-(1萘)-乙二胺產生偶合反應。生成紫紅色的偶氮染料。比色定量。
五、試劑 1.氫氧化鋁懸濁液 稱取125g硫酸鋁鉀[KAl(SO4)2.12H2O]或硫酸鋁銨[NH4Al(SO4)2.12H2O]溶於1000mL純水中。加熱至60oc，緩緩加入55mL氨水(ρ20=0.88g/mL)。使氫氧化鋁沉澱完全。充分攪拌後靜置，棄取上清液。用純水反復洗滌沉澱，至傾出上清液中不含氯離子（用硝酸銀溶液試驗）。然後加入300mL純水成懸濁液，適應前振搖均勻。 2.對氨基苯磺醯胺溶液：（10g/L） 3.鹽酸N-(1萘)-乙二胺溶液（1.09g/L） 4.亞硝酸鹽氮標准儲備液[ρ(NO2-_N)=50µg/mL]： 稱取0.2463g在玻璃乾燥器內放置24h的亞硝酸鈉（NaNO2），溶於純水中，並定容至1000mL。每升加2mL氯仿保存。 5.亞硝酸鹽氮標准使用液[ρ(NO2-_N)=0.1µg/mL]： 取10.00mL標准儲備液於容量瓶中，用純水定容至500mL。再從中吸取10mL，用純水於容量瓶中定容至100mL。
六．儀器 具塞比色管50mL 分光光度計
七．分析步驟 1.若水樣中渾濁度或色度過大，可先取100mL，加入2mL氫氧化鋁懸浮液，攪拌後靜置數分鍾，過濾。 2.先將水樣或處理後的水樣用酸或鹼調進中性，取50mL置於比色管中。 3.另取50mL比色管配製標准濃度系列。其中空白與最低檢測限必須配製。其他系列視檢測的具體情況而定。 4.向水樣及標准系列中分別加入1mL對氨基苯磺醯胺溶液。搖勻後放置2-8min，加入1.0mL鹽酸N-(1萘)-乙二胺溶液。立即混勻。 5.於540nm波長下，用1 cm比色皿，以純水作參比，在10min-2hr內測定吸光度。如含量低於4mg/L，改用3cm比色皿。 6.繪制標准曲線。從標准曲線上查得水樣中亞硝酸鹽氮的含量。
八、計算 ρ（NO2——N）=m/V 式中：ρ（NO2——N）----水樣中亞硝酸鹽氫的質量濃度，㎎/L m----從標准曲線上查得樣品中亞硝酸鹽氫的質量，㎎ v----水樣體積，mL