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hiv檢驗方法應用研究

發布時間:2024-04-27 08:53:02

『壹』 血站是用什麼方法檢測HIV抗體的

HIV-抗體檢測方法
常見檢測方法
目前作為診斷手段使用的檢測主要包括抗HIV病毒抗體檢測、病毒培養、核酸檢測和抗原檢測。其中對病毒抗體的檢測是最常規使用的方法,這不但是由於這類檢測特異性、敏感性較高,方法相對簡便、成熟,更重要的原因是HIV抗體在病毒感染後除早期短暫的」窗口期」外的整個生命期間長期穩定地存在並可被檢測到。在一些特殊情況下,當抗體檢測無法滿足HIV感染診斷的需要時,病毒分離及測定、核酸檢測、抗原檢測可作為輔助手段使用,這包括對非典型血清學反應樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對特殊樣品的診斷。 一、 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
目前應用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過99%。
二、 顆粒凝集法(PA)
PA為快速、簡便的一種篩選方法。如屬陽性,應經WB證實。PA不需任何特殊儀器,其結果用肉眼可判別。全過程僅需5分鍾。缺點有假陽性,且價格昂貴。
三、快速試劑
(一)人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法)
雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)是用於體外,肉眼觀察,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,用於幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本品僅用於無償獻血員現場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,需進行進一步篩查確認。
(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑
InstantCHEKTM-HIV1+2是一種快速、簡單、靈敏的檢驗方法, 用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。
四、HIV-抗體確認實驗
免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉澱試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。國內常用的確認試驗方法是WB。
(一_免疫印跡實驗(westernblot,WB)是廣泛用於許多傳染病診斷的實驗方法,就HIV的病原學診斷而言,它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法,WB的檢測結果常常被作為鑒別其他檢驗方法優劣的「金標准」。
確認試驗流程:
有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測,如果呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性;如果呈陽性反應,則報告HIV-1抗體陽性;如果不滿足陽性標准,則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗,呈陰性反應,報告HIV-2抗體陰性;呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,並將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析,
WB的敏感性一般不低於初篩實驗,但它的特異性很高,這主要是基於HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化,能夠檢測針對不同抗原成分的抗體,因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的准確性。從WB確認試驗結果看出,初篩試驗盡管選擇質量較好的試劑,如第三代ELISA,仍會有假陽性出現,必須通過確認試驗才能得出准確結果。
(二)免疫熒光實驗(IFA)
IFA法經濟、簡便、快速,曾被FDA推薦用於WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡,需要受過良好訓練的技術人員、觀察和解釋結果易受主觀因素的影響,結果不宜長期保存,IFA不宜在一般的實驗室開展和應用。

『貳』 如何確診HIV感染者試述各種可用的方法,哪些方法臨床最常應用

臨床最常用的確診方法是先行ELISA法檢測HIV抗體,若連續2次陽性,再作免疫印跡法(WB)或固相放射免疫沉澱試驗等以助確診。我國還需經各省的艾滋病確認實驗室復查陽性才最後確診。其他的檢測方法有ELISA法檢測p24抗原。RT-PCR法檢測HIVRNA或PCR法檢測HIV的前病毒DNA等。目前,應用定量PCR法對HIV定量以供抗病毒治療的考核和預後估計。

『叄』 艾滋病檢測方法有哪些

1、抗體檢測

主要有酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光試驗(IFA)。ELISA用去污劑裂解HⅣ或感染細胞液提取物作抗原,IFA用感染細胞塗片作抗原進行抗體檢測,如果發現陽性標本應重復一次。為防止假陽性,可做Westernblot(WB,蛋白印跡法)進一步確證。

WB法是用聚丙烯醯胺凝膠電泳將HⅣ蛋白進行分離,再經傳移電泳將不同蛋白條

艾滋病檢測帶轉移於硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育後,用抗人球蛋白酶標抗體染色,就能測出針對不同結構蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。

快速檢測法,也稱為金標法,也是抗體檢測的一種方法,根據免疫層析法的原理,用於HⅣ抗體檢測的定性檢測。

2、抗原檢測

用ELISA檢測P24抗原,在HⅣ感染早期尚未出現抗體時,血中就有該抗原存在.由於P24量太少,陽性率通常較低。現有用解離免疫復合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。

3、核酸檢測

用PCR法檢測HⅣ基因,具有快速、高效、敏感和特異等優點,目前該法已被應用於HⅣ感染早期診斷及艾滋病的研究中。

4、病毒分離

常用方法為共培養法,即用正常人外周血液分離單個核細胞,加PHA刺激並培養後,加入病人單個核細胞診斷及艾滋病的研究中。

5、檢測試紙檢測

艾滋病檢測試紙條是使用膠體金免疫層析科技研發的新一代檢測試劑。它可檢測血清或血漿標本中的HⅣ-1/2特有性抗體。所有操作時間若是15分鍾,動作簡便、迅速、准確、自帶質

艾滋病檢測控對照、無需所有附加葯劑。適合個人檢測,也適合各大醫院,疾控中心檢測。

『肆』 簡述hiv的微生物學檢測方法有哪些

主要有酶聯免疫吸附試驗(ELlSA)和免疫熒光試驗(lFA)ELISA用去污劑裂解HIV或感染細胞液提取物作抗原IFA用感染細胞塗片作抗原進行抗體檢測 如果發現陽性標本應重復一次 為防止假陽性 可做Western blot(WB 蛋白印跡法)進一步確證
WB法是用聚丙烯醯胺凝膠電泳將HIV蛋白進行分離 再經傳移電泳將不同蛋白條帶轉移於硝酸纖維膜上 加入病人血清孵育後 用抗人球蛋白酶標抗體染色 就能測出針對不同結構蛋白抗體 如抗gp120、gp41、p24抗體 特異性較高
用ELISA檢測p24抗原 在HIV感染早期尚未出現抗體時 血中就有該抗原存在 由於p24量太少 陽性率通常較低 現有用解離免疫復合物法或濃縮p24抗原 來提高敏感性
用PCR法檢測HIV基因 具有快速 高效 敏感和特異等優點醫學教育網搜集l整理 目前該法已被應用於HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中
常用方法為共培養法 即用正常人外周血液分離單個核細胞 加PHA刺激並培養後 加人單個核細胞診斷及艾滋病的研究中

『伍』 HIV的檢測步驟有哪些

艾滋病檢測種類:血液試紙和唾液試紙兩大類。
目前市場上的艾滋病試紙種類主要分為兩大類,其中血液試紙主要包括雅培hiv試紙、愛康hiv試紙等。而唾液艾滋病試紙的種類就顯得比較單調,其中使用最廣泛的就是美國艾衛艾滋病檢測試紙,深受很多的高危人群及恐艾症患者的青睞。

專家指出,自從第一例艾滋病毒被確診以後,全球對於艾滋病毒的研究已經有30多年的歷史,而在這些年中也確實取得了十分重大的突破,其中艾滋病試紙研發問世,其所提倡的艾滋病自測就為艾滋病毒的預防奠定了嶄新的里程碑。據本站筆者了解得知,艾滋病試紙是一種使用膠體金免疫層析科技研發的新一代檢測試劑,可檢測血清或血漿標本中的HIV-1/2特有性抗體,從而准確的判斷出患者體內是否含有艾滋病毒,進而了解該患者是否是艾滋病毒感染者。
艾滋病檢測試紙優勢多,不同艾滋病試紙准確率達99.99%
不同的艾滋病試紙在不同的情況下使用起來具有更高的准確性和方便性。但是這幾種常見的HIV檢測試紙使用起來主要有以下幾個方面的優勢:所有操作時間15分鍾,所有的檢測操作過程簡便、出檢測結果十分迅速又准確、而且全部都是自帶質控對照,檢測過程中還不需要使用附加葯劑。值得一提的是,自己在家就能夠獨立完成所有的檢測過程,並不再像過去那樣一定要到專業的疾控中心檢測,這樣不但減輕了疑似感染者的心理折磨,而且還出檢測結果快速高效,為感染者及時治療爭取了更多有利的時間。
據悉,要想准確知道檢測結果,還需要注意的一個問題就是艾滋病檢測的最佳時間,而國際上規定以高危發生的日期開始計算,2周後即可檢測艾滋病病毒,以6周以後為准。而且如果在檢測過程中要想更加准確了解結果,最好是一次性使用多種不同品牌的艾滋病試紙,注意准確率更高,幾乎是100%。

『陸』 HIV鎰熸煋鐨勮瘖鏂鍜岀棶鎯呯洃嫻嬪彲鐢ㄥ摢浜涙柟娉

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『柒』 艾滋病怎麼檢測

艾滋病是一種嚴重的性病,一個朋友當中懷孕自己得了這種疾病,到醫院進行過檢測,那麼,艾滋病怎麼檢測?下面和大家介紹一下。
1. 檢測方法一、抗體檢測。主要有酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光試驗(IFA)。快速檢測法,也稱為金標法,也是抗體檢測的一種方法,根據免疫層析法的原理,用於HIV抗體檢測的定性檢測,這也是一種最常用的方法,同時檢測的准確率高達90%。


2. 檢測方法二、抗原檢測。用ELISA檢測P24抗原,在HIV感染早期尚未出現抗體時,血中就有該抗原存在.由於P24量太少,陽性率通常較低。現有用解離免疫復合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。


3. 檢測方法三、核酸檢測。用PCR法檢測HIV基因,具有快速、高效、敏感和特異等優點,目前該法已被應用於HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。


注意事項
艾滋病是一種嚴重的疾病,特別是也會有潛伏期,在平時的時候要重視對這種疾病的預防,主要是在進行性生活的時候要做好防護的措施,而且也要注意輸血等情況的保護方法。

『捌』 常用的艾滋病檢測方法有哪些

常用的艾滋病檢測有:

  1. 抗體檢測:HIV-1/HIV-2抗體檢測是HIV 檢測的金標准。經篩查試驗(初篩和復檢)確證試驗兩步。初篩實驗室主要是採用酶聯免疫試驗、化學發光法或免疫熒光法試驗。確認實驗室進行復檢主要是檢測血清gp24及gp120抗體,靈敏度達99%,抗體初篩檢測結果還要用免疫蛋白印跡法檢測確認即確認試驗。

  2. 抗原檢測:抗HIVp24抗原單克隆抗體制備試劑,用酶聯免疫法測血清HIVp24抗原。有助於抗體產生窗口期和新生兒早期感染的診斷。

  3. 病毒載量測定:病毒載量的測定可了解疾病進展,提供病毒治療依據、評估治療效果、指導治療方案調整以及為早期診斷提供參考。可用熒光定量PCR擴增技術。

『玖』 誰知道廣州市番禺石基人民醫院是用什麼方法檢測hiv

檢測方法編輯
檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法,操作方便,易於普及應用,其中抗體檢測尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測定,在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。

抗體檢測
抗體檢測
血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍,可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
確證試劑
篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot(WB),由於該法相對窗口期較長,靈敏度稍差,而且成本高昂,因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高,WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。
FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相對簡單,整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果,而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准,但不作為血液合格的標准。
篩檢試驗
篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查,因此要求操作簡便,成本低廉,而且靈敏、特異。2012年,世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA,還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性,操作簡單,僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用,特別適合於試驗室大規模篩檢使用。
顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便,成本低廉的檢測方法,該方法結果可通過肉眼判定,靈敏度很高,特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用,缺點是必須使用新鮮樣品,特異性較差。
80年代後期發展起來的斑點印跡檢測(Dot-blot assay)是一種快速ELISA(Rapid ELISA)方法,這種方法操作極為簡便,過程短暫,整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束,但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。
人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液檢測試劑盒(膠體金法)就屬於側向免疫層析法(金免疫)類別,基於免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20分鍾即可定性得出檢測結果的快速診斷試劑,用於檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。可用於自願咨詢檢測、不願采血、暈針患者的初篩。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需進行進一步篩查確認。[3]
【HIV陰性】說明從人體內檢測不到HIV抗體,陰性符號以(-)表示。不能說沒有感染HIV, 要看是什麼時候檢測的,在窗口期內,感染者的體內還沒有產生HIV抗體,或還沒有產生足量的HIV抗體,這時HIV檢測是陰性結果,如果在窗口期之後檢測的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV陽性】說明從人體內檢測到了HIV抗體,陽性符號以(+)表示。
【檢測結果不定因素】
感染還處於窗口期:從HIV進入體內到檢測這段時間還不夠長,因此血清還沒有形成典型的抗體反應
艾滋病進展到終末期,抗體水平下降
其他非病毒蛋白抗體的交叉反應:自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下,身體可以產生一些抗體,其反應與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應很相似

抗原檢測
病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大,且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄-PCR)可用於臨床診斷。HIV-1P24抗原檢測可用於HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷;HIV-1抗體陽性母親所生嬰兒早期的輔助鑒別診斷;第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性,但HIV-1抗體確認陰性者的輔助診斷。P24抗原檢測一般用ELISA雙抗體夾心法試劑,試劑必須經過SDA批准注冊、在有效期內,其陽性結果必須依據試劑說明書經中和試驗確認。HIV-1P24抗原檢測的敏感性為30-90%,該結果僅作為HIV感染的輔助診斷依據,不能據此確診;HIV-1 P24抗原檢測陰性只表示在本試驗中無反應,不能排除HIV感染,臨床中一般不作為常規診斷項目。

核酸檢測
HIV核酸檢測可用於HIV感染的輔助診斷、病程監控、指導治療方案及療效判定、預測疾病進展等。常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉錄PCR實驗(RT-PCR)、核酸序列擴增實驗(NASBA)、分支DNA雜交實驗(bDNA)以及實時熒光定量PCR技術。值得注意的是,每一種HIVRNA定量系統都有其最低檢測限,即可以測出的最低拷貝數或國際單位,RNA定量檢測時未測出不等於樣品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性檢測陰性,只可報告本次實驗結果陰性,但不能排除HIV感染;HIV核酸檢測陽性,可作為診斷HIV感染的輔助指標,不能單獨用於HIV感染的診斷。報告HIV核酸定量檢測結果時應按照儀器讀數報告結果,註明使用的實驗方法、樣品種類和樣品量,當測定結果小於最低檢測限時,應註明最低檢測限水平。
HIV核酸定性檢測也可用於HIV感染的輔助診斷,在分析HIV基因亞型和變異等基礎研究中應用。通常使用PCR或RT-PCR技術,使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑,引物可來自文獻或自行設計,應盡量覆蓋所有或常見的毒株,也可使用復合引物。報告定性檢測結果時應註明反應條件和所使用的引物序列。此外,利用核酸檢測方法的高度敏感性,使用集合核酸擴增檢測技術和方法,對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進行集合核酸檢測,可及時發現窗口期感染者。該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。

試紙上有兩條線。上面為質控線也叫對照線,下面的叫檢測線。

檢測時如果只顯示上面一條結果為陰性,如果顯示兩條判讀為陽性,
如果只有下面一條或者一條也沒有為無效結果,建議復測。aware天貓

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