❶ bca法測蛋白濃度為什麼稀釋蛋白質濃度
BCA法測定蛋白質濃度原理：
BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠，即 BCA 工作試劑。在鹼性條件下，BCA 與蛋白質結合時，蛋白質將 Cu2+ 還原為 Cu+，工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。
BCA 蛋白濃度測定試劑盒，Abbkine的蛋白質定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單，快捷，兼容去污劑的方法，准確定量總蛋白。
成分：
試劑 A，100 mL
試劑 B，2 mL
標准蛋白(BSA)1 mL×2，1 mg/mL
保存條件運輸溫度:室溫(標准蛋白 4~8 ℃ 運輸)
保存溫度:室溫(標准蛋白 -20 ℃ 保存)
有效日期:12 個月
使用方法：
方法一:96 孔板
1.配製 BCA 工作液:根據標准品和樣品數量，按 50 體積試劑 A，1 體積試劑 B 配製適量 BCA 工作液。充分混勻。
2.將蛋白標准品按 0 μL，1 μL，2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10 μL 加入 96 孔板的蛋白標准品孔中。加滅菌雙蒸水補足到 10 μL。取 10 μL 待測樣品加入 96 孔板的待測樣品孔中。每個測定要做 2~3 個平行。
3.向待測樣品孔和蛋白標准品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即樣品與工作液的體積比為 1:20)，混勻。
4.37 ℃ 溫浴 30 min。冷卻至室溫。
5.酶標儀 562 nm 波長下測定吸光度。
6.製作標准曲線。從標准曲線中求出樣品濃度。
❷ BCA protein assay試劑盒是檢測蛋白濃度的原理是什麼
這個原理也是引用別人的。http://..com/question/4033944.html。
BCA實際盒我用過，確實比考馬斯亮藍試劑要靈敏多了。操作也很簡便
原理簡介
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法基礎上改進而成。眾所周知，二價銅離子在鹼性的條件下，可以被蛋白質還原成一價銅離子（biuret reaction），一價銅離子和獨特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子，形成紫色的反應復合物。該水溶性的復合物在562nm處顯示強烈的吸光性，吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內有良好的線性關系，因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。
產品特點
1．步驟簡單，45分鍾內完成測定，比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2．靈敏度高，檢測濃度下限達到25μg/ml，最小檢測蛋白量達到0.5μg，待測樣品體積為1-20μl 。
3．BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質的影響，可以兼容樣品中高達5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
4．在20-2000μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。
5. 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小於考馬斯亮藍法蛋白定量。