酶提取常用的方法

A. 常用酶的提取方法有哪些並解釋提取機理

血中DNA的提取血液中DNA提取的原理：如果以外周血為DNA提取材料,在外周血中提取DNA就是從有核的白細胞中提取DNA.因此,從外周血中提取DNA包括以下幾個關鍵步驟：第一,破壞紅細胞,通常利用紅細胞與白細胞膜結構的差異,先使紅細胞裂解,經離心後收集白細胞；第二,白細胞裂使膜蛋白和核蛋白變性,游離DNA,通常是採用離子型表面活性劑使蛋白質變性；第三,除去變性蛋白質：通常採用蛋白沉澱劑沉澱變性蛋白質,使DNA留在上清液中；第四,在高鹽環境下使DNA從有機溶劑如無水乙醇中析出. 取材 取外周血5ml,EDTA抗凝 1.新鮮抗凝血,離心棄去上清液； 2.取出4℃冰箱預冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向細胞沉澱中加入ELS裂解液（1ml細胞壓積加入6-10ml裂解液）,輕輕吹打混勻；紅細胞裂解液ELS配方： NH4Cl:4.15克加雙蒸水500ml,取450ml; Tris:1.0297克加雙蒸水50ml,再加上上面的450ml,共計500ml,高壓滅菌, 用時加10-20ml 3.800-1000rpm離心5-8分鍾,離心棄去上層紅色清液； 4.收集沉澱部分,加入Hank』s液或無血清培養液離心洗2-3次； 5.如裂解不完全可重復步驟2和3； 6.重懸細胞,用於後續實驗；提取DNA,最好是於步驟4開始使用DEPC水配製的溶液進行. 酚氯仿方法提取DNA 在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素,以保證DNA的完整性,為後續的實驗打下基礎.是採用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞,隨後用酚抽提而實現的.這一方法獲得的DNA不僅經酶切後可用於Southern分析,還可用於PCR的模板、文庫構建等實驗. 原則：（1）防止和抑制DNase對DNA的降解；（2）盡量減少對溶液中DNA的機械剪切破壞. 一、試劑准備 1．TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0). 2．TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl. 3．裂解緩沖液：250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml. 4．20% SDS 5．2mg/ml蛋白酶K 6．Tris飽和酚（pH 8.0）、酚/氯仿（酚∶氯仿=1∶1）、氯仿 7．無水乙醇、75%乙醇二、操作步驟（一）材料處理 1．白細胞處理 ⑴ 取紅細胞裂解完全後收集的沉澱,加入0.5ml TE ⑵ 將勻漿液轉移到1.5ml離心管中. ⑶ 加20% SDS 25 μl,蛋白酶K (2mg/ml) 25 μl,混勻. ⑷ 60°C水浴1-3hr. 2．培養細胞處理： ⑴ 將培養細胞懸浮後,用TBS洗滌一次. ⑵ 離心4000g×5min,去除上清液. ⑶ 加10倍體積的裂解緩沖液. ⑷ 50-55°C水浴1-2hr. （二）DNA提取 1. 加等體積飽和酚至上述樣品處理液中,溫和、充分混勻3min. 2. 離心5000g×10min,取上層水相到另一1.5ml離心管中. 3. 加等體積飽和酚,混勻,離心5000g×10min,取上層水相到另一管中. 4. 加等體積酚/氯仿,輕輕混勻,離心5000g×10min,取上層水相到另一管中.如水相仍不澄清,可重復此步驟數次. 5. 加等體積氯仿,輕輕混勻,離心5000g×10min,取上層水相到另一管中. 6. 加1/10體積的3M醋酸鈉（pH 5.2）和2.5倍體積的無水乙醇,輕輕倒置混勻. 7. 待絮狀物出現後,離心5000g×5min,棄上清液. 8. 沉澱用75%乙醇洗滌,離心5000g×3min ,棄上清液. 9. 室溫下揮發乙醇,待沉澱將近透明後加50-100ml TE溶解過夜. (三）DNA定量和電泳檢測 1.DNA定量： DNA在260nm處有最大的吸收峰,蛋白質在280nm處有最大的吸收峰,鹽和小分子則集中在230nm處.因此,可以用260nm波長進行分光測定DNA濃度,OD值為1相當於大約50μg/ml雙鏈DNA.如用1cm光徑,用 H2O稀釋DNA樣品n倍並以H2O為空白對照,根據此時讀出的OD260值即可計算出樣品稀釋前的濃度：DNA（mg/ml）=50×OD260讀數×稀釋倍數/1000. DNA純品的OD260/OD280為1.8,故根據OD260/OD280的值可以估計DNA的純度.若比值較高說明含有RNA,比值較低說明有殘余蛋白質存在.OD230/OD260的比值應在0.4-0.5之間,若比值較高說明有殘余的鹽存在. 2.電泳檢測：取1μg基因組DNA用行0.8%瓊脂糖凝膠上電泳,檢測DNA的完整性,或多個樣品的濃度是否相同.電泳結束後在點樣孔附近應有單一的高分子量條帶. 三、注意事項 1. 所有用品均需要高溫高壓,以滅活殘余的DNA酶. 2. 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配製. 3. 用大口滴管或吸頭操作,以盡量減少打斷DNA的可能性. 4. 用上述方法提取的DNA純度可以滿足一般實驗（如Southern 雜交、PCR等）目的.如要求更高,可參考有關資料進行DNA純化.

B. 從組織細胞中獲得酶的粗提取樣品常有哪些方法

從動物胰臟中提取胰蛋白酶,一般是用稀酸將胰腺細胞中含有的胰蛋白酶原提取出來,然後根據等電點沉澱的原理將提取液的pH值調至酸性（pH3.0左右）,使大量的酸性蛋白沉澱出來.經硫酸銨分級鹽析將胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原和彈性蛋白酶原沉澱.沉澱物經水溶解並調至pH8.0,用極少量的胰蛋白酶將胰蛋白酶原激活,同時溶液中的胰凝乳蛋白酶原和彈性蛋白酶原也被激活,三種酶原相互作用過程如下：
也可採用從胰臟中提取出胰蛋白酶原,利用合適的提取溶液的pH值促使胰蛋白酶原部分自溶,並通過溶液中Ca2+的環境,使胰蛋白酶原被開始自溶的少量具有活性的胰蛋白酶所激活,轉變為具有活性的胰蛋白酶（胰凝乳蛋白酶原及彈性蛋白酶原亦同時被胰蛋白酶激活成有活性的酶）.
激活後的酶溶液再進一步分離純化.
〔試劑和器材〕
1、試劑
（1）pH2.3.0乙酸化的水溶液
（2）10%（體積分數）乙酸
（3）2mol/L硫酸
（4）固體硫酸銨
（5）無水CaCl2
（6）結晶胰蛋白酶
（7）25%乙醇溶液(含0.015mol/LHCl 、0.05mol/LCaCl2)
（8）95%（體積分數）乙醇
（9）5mol/L NaOH
（10）丙酮
2、器材
（1）胰臟
（2）組織搗碎機
（3）離心機
（4）磁力攪拌器
（5）透析袋、20目篩網、紗布、水浴鍋
（6）燒杯、量筒、刻度吸管、試管、玻璃漏斗
（7）布氏漏斗、抽濾瓶、溫度計、滴管、玻璃攪棒、紗布、pH試紙等
〔方法和步驟〕
方法一
1、 胰蛋白酶原的提取
取新鮮胰臟約150g,剝去結締組織和脂肪,取凈重100g,切成碎塊,在組織搗碎機中搗碎,並加入2倍體積預冷的pH2.3.0乙酸化水溶液,製成勻漿.漿液倒入500mL燒杯中,用10%（體積分數）乙酸調節pH在2.3.0之間,在5～10℃下提取6h以上,並間隙輕輕攪拌.用4層紗布過濾,盡量擠出濾液.組織殘渣中再加入0.5倍體積（約50mL左右）預冷的pH2.3.0乙酸化水溶液再提取一次（放置1～2h）,再用4層紗布過濾.合並兩次濾液,用2.5mol/L硫酸調節濾液pH在2.3.0之間,4℃放置4h（pH始終保持在2.3.0）,使提取液中酸性蛋白沉澱析出.提取液用折疊濾紙於玻璃漏斗中自然過濾,收集濾液,量取體積（約200mL左右）.
濾液中加入粉末狀固體硫酸銨,使溶液達0.75飽和度（每升濾液加492g,5℃）.放置過夜,使胰蛋白酶原完全析出.次日抽濾,棄濾液,壓緊並收集濾餅,即胰蛋白酶原粗品.
2、 胰蛋白酶原的激活
將胰蛋白酶原粗品稱重（濕重）,分次加入10倍體積預冷的蒸餾水（按濾餅重量計算）,使濾餅完全溶解（一般情況濾餅中硫酸銨含量約占餅重1/4）.用5mol/L NaOH將溶液調至pH8.0,慢慢地攪拌下加入固體無水CaCl2使溶液的Ca2+終濃度達到0.1mol/L（要減去一部分氯化鈣與硫酸銨結合生成硫酸鈣的鈣離子）.取出2mL溶液用於測定激活前的蛋白含量及酶活性.原溶液中加入5mg結晶胰蛋白酶,輕輕攪拌均勻,25℃放置2～4h,或4℃放置12～16h,使胰蛋白酶原活化.每隔1h取樣測定胰蛋白酶活性增長情況,直至酶激活速度變慢或停止增長.一般比活可達到3 500～4 000 BAEE單位/mg.留取2mL溶液用於測定激活後的蛋白質含量和酶活性.激活酶溶液用2mol/L硫酸調pH至2.3.0,濾紙過濾,濾去硫酸鈣沉澱,收集濾液,4℃保存備用.
方法二
稱取冷凍豬胰臟100g,在2～5℃下解凍,切成小塊,用組織搗碎機中絞碎成胰漿,在5～10℃存放24h以上,使胰酶自身活化.胰漿中加入25%（質量分數）乙醇溶液250mL（25%乙醇溶液中加0.015mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl2）,搗碎機中搗碎1min.胰漿倒入500mL燒杯中,間隙攪拌,溫度20℃左右,活化5～6h.每隔1.5h,吸取2mL活化液用於測定激活後的蛋白質含量和酶活性.
活化反應結束後,胰漿3 500 r/min離心20min,將離心後上清液用二層紗布過濾.濾液置250mL燒杯中,以過濾清液的體積為准,加入粉末狀硫酸銨,攪拌溶解,使溶液硫酸銨飽和度為20%.放置 6h後,3 500 r/min離心20min,保存上清液待用,取沉澱.沉澱分別用適量95%乙醇洗滌過濾,再用丙酮洗滌,過濾.最後將沉澱置於表面皿上自然乾燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅰ.
在上述離心上清液中,加入粉末狀硫酸銨,攪拌溶解,使上清液溶液達到55%硫酸銨飽和度,放置 6h後,3 500 r/min離心30min,取離心沉澱,分別用適量95%乙醇、丙酮洗滌,過濾後將沉澱置於表面皿上自然乾燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅱ.

C. 如何從含酶的生物中提取酶，急需具體方法

這個說法太籠統了。如果這個酶有特定的吸附物，那可以用過柱的辦法。如果只是要它的活性，那也可以不必提純，直接把組織勻漿就去實驗就行了。但有個前提條件，就是要先清楚這個酶的活性在提取過程中是否會變化。比如有些酶，你把生物組織提取出來一見空氣酶的活性就沒了。

D. 如何提取植物葉片細胞液裡面的酶

數:251
酶提取法
天然植物的細胞壁由纖維素構成，其中植物的有效成分往往被包裹在細胞壁內。酶提取法就是利用纖維素酶果膠酶蛋白酶等（主要是纖維素酶），破壞植物的細胞壁，以促使植物有效成分最大限度溶解分離出的一種方法。在酶提取法的提取工藝中，酶的選擇、酶濃度、pH值、酶解溫度、酶解時間都會影響植物提取物的提取率。
E. BARZANA等人採用酶提取法從萬壽菊提取類胡蘿卜素，主要研究了料液比、酶濃度、酶解時間和溫度等對提取率的影響，研究結果表明最佳提取工藝為：料液比1∶4、酶濃度0.3%、提取時間為1.5h、溫度為25℃。張小清等人採用酶提取法提取銀杏中的活性成分—黃酮，並通過正交實驗找出酶濃度、pH值、酶解溫度和時間等影響提取率的最佳工藝條件。（一）水溶液提取法（二）有機溶劑提取法

E. 鹽溶液提取酶的方法

1．鹽析法
2．有機溶劑沉澱法
乙醇、丙酮等能與水互溶的有機溶劑，在不同的濃度下能沉澱不同的蛋白質，因此能用來純化酶。此法分辨能力高，提純效果好。但高濃度的有機溶劑常常引起酶活力的喪失，同時整個操作過程都應該嚴格控制在低溫進行。
3．吸附法
有些吸附劑如澱粉、氧化鋁、硅藻土、磷酸鈣以及近年來使用的羥基磷灰石可以選擇性地吸附酶，故可以用於酶的純化。一般在弱酸性或中性環境中，在酶液中加入吸附劑，經攪拌，酶即被吸附在吸附劑的表面上。過濾分離後，再用較高pH的高濃度鹽溶液把酶從吸附劑上洗脫下來，即可達到純化酶的目的。
除了以上3種酶的純化方法以外，還有利用分子大小不同以純化酶的凝膠過濾法和超離心法、利用不同蛋白質分子在某一pH環境中荷電性質不同而建立的離子交換法、以及利用酶具有和底物或競爭性抑制劑結合的功能而建立的親和層析法等。以上這些方法在酶的分離純化上已逐漸得到廣泛的應用。
制備好的較純的酶，一般都不太穩定。特別是在溶液中，酶更容易喪失活力。通常應在冰箱中保存。此外也可以酶溶液中加入一些保護劑，如巰基酶可加入還原劑保存。
最好的辦法還是把酶製成乾粉，可以延長保存時間。但酶在乾燥器中的乾燥過程中，有時部分變性，這時可採用冷凍乾燥法。使酶溶液在冷凍狀態下迅速升華失去水分，可以避免酶力的損失，得到便於保存的乾粉。

F. 從各種組織細胞中獲取酶的方法

從動物胰臟中提取胰蛋白酶,一般是用稀酸將胰腺細胞中含有的胰蛋白酶原提取出來,然後根據等電點沉澱的原理將提取液的pH值調至酸性（pH三.0左右）,使大量的酸性蛋白沉澱出來.經硫酸銨分級鹽析將胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原和彈性蛋白酶原沉澱.沉澱物經水溶解並調至pH吧.0,用極少量的胰蛋白酶將胰蛋白酶原激活,同時溶液中的胰凝乳蛋白酶原和彈性蛋白酶原也被激活,三種酶原相互作用過程如下： 也可採用從胰臟中提取出胰蛋白酶原,利用合適的提取溶液的pH值促使胰蛋白酶原部分自溶,並通過溶液中Ca二+的環境,使胰蛋白酶原被開始自溶的少量具有活性的胰蛋白酶所激活,轉變為具有活性的胰蛋白酶（胰凝乳蛋白酶原及彈性蛋白酶原亦同時被胰蛋白酶激活成有活性的酶）. 激活後的酶溶液再進一步分離純化. 〔試劑和器材〕 一、試劑 （一）pH二.三.0乙酸化的水溶液 （二）一0%（體積分數）乙酸 （三）二mol/L硫酸 （四）固體硫酸銨 （5）無水CaCl二 （陸）結晶胰蛋白酶 （漆）二5%乙醇溶液(含0.0一5mol/LHCl 、0.05mol/LCaCl二) （吧）95%（體積分數）乙醇 （9）5mol/L NaOH （一0）丙酮 二、器材 （一）胰臟 （二）組織搗碎機 （三）離心機 （四）磁力攪拌器 （5）透析袋、二0目篩中國、紗布、水浴鍋 （陸）燒杯、量筒、刻度吸管、試管、玻璃漏斗 （漆）布氏漏斗、抽濾瓶、溫度計、滴管、玻璃攪棒、紗布、pH試紙等 〔方法和步驟〕 方法一 一、 胰蛋白酶原的提取 取新鮮胰臟約一50g,剝去結締組織和脂肪,取凈重一00g,切成碎塊,在組織搗碎機中搗碎,並加入二倍體積預冷的pH二.三.0乙酸化水溶液,製成勻漿.漿液倒入500mL燒杯中,用一0%（體積分數）乙酸調節pH在二.三.0之間,在5～一0℃下提取陸h以上,並間隙輕輕攪拌.用四層紗布過濾,盡量擠出濾液.組織殘渣中再加入0.5倍體積（約50mL左右）預冷的pH二.三.0乙酸化水溶液再提取一次（放置一～二h）,再用四層紗布過濾.合並兩次濾液,用二.5mol/L硫酸調節濾液pH在二.三.0之間,四℃放置四h（pH始終保持在二.三.0）,使提取液中酸性蛋白沉澱析出.提取液用折疊濾紙於玻璃漏斗中自然過濾,收集濾液,量取體積（約二00mL左右）. 濾液中加入粉末狀固體硫酸銨,使溶液達0.漆5飽和度（每升濾液加四9二g,5℃）.放置過夜,使胰蛋白酶原完全析出.次日抽濾,棄濾液,壓緊並收集濾餅,即胰蛋白酶原粗品. 二、 胰蛋白酶原的激活 將胰蛋白酶原粗品稱重（濕重）,分次加入一0倍體積預冷的蒸餾水（按濾餅重量計算）,使濾餅完全溶解（一般情況濾餅中硫酸銨含量約占餅重一/四）.用5mol/L NaOH將溶液調至pH吧.0,慢慢地攪拌下加入固體無水CaCl二使溶液的Ca二+終濃度達到0.一mol/L（要減去一部分氯化鈣與硫酸銨結合生成硫酸鈣的鈣離子）.取出二mL溶液用於測定激活前的蛋白含量及酶活性.原溶液中加入5mg結晶胰蛋白酶,輕輕攪拌均勻,二5℃放置二～四h,或四℃放置一二～一陸h,使胰蛋白酶原活化.每隔一h取樣測定胰蛋白酶活性增長情況,直至酶激活速度變慢或停止增長.一般比活可達到三 500～四 000 BAEE單位/mg.留取二mL溶液用於測定激活後的蛋白質含量和酶活性.激活酶溶液用二mol/L硫酸調pH至二.三.0,濾紙過濾,濾去硫酸鈣沉澱,收集濾液,四℃保存備用. 方法二 稱取冷凍豬胰臟一00g,在二～5℃下解凍,切成小塊,用組織搗碎機中絞碎成胰漿,在5～一0℃存放二四h以上,使胰酶自身活化.胰漿中加入二5%（質量分數）乙醇溶液二50mL（二5%乙醇溶液中加0.0一5mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl二）,搗碎機中搗碎一min.胰漿倒入500mL燒杯中,間隙攪拌,溫度二0℃左右,活化5～陸h.每隔一.5h,吸取二mL活化液用於測定激活後的蛋白質含量和酶活性. 活化反應結束後,胰漿三 500 r/min離心二0min,將離心後上清液用二層紗布過濾.濾液置二50mL燒杯中,以過濾清液的體積為准,加入粉末狀硫酸銨,攪拌溶解,使溶液硫酸銨飽和度為二0%.放置 陸h後,三 500 r/min離心二0min,保存上清液待用,取沉澱.沉澱分別用適量95%乙醇洗滌過濾,再用丙酮洗滌,過濾.最後將沉澱置於表面皿上自然乾燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅰ. 在上述離心上清液中,加入粉末狀硫酸銨,攪拌溶解,使上清液溶液達到55%硫酸銨飽和度,放置 陸h後,三 500 r/min離心三0min,取離心沉澱,分別用適量95%乙醇、丙酮洗滌,過濾後將沉澱置於表面皿上自然乾燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅱ

G. 纖維素酶的提取方法

用產酶菌
酶的提取主要有幾個方法：鹽析、凝膠住分離、膜分離、透析。。。
對於纖維素的分離查了篇文獻，粗粉採用的是鹽析，細分用的凝膠柱分離，過程如下：
提取：
1.用硫酸錢沉澱法獲粗酶制劑，溶在適量蒸餾水中.
2.經過透析脫鹽，Ba2+檢測脫鹽程度，以不形成白色渾濁為限.
3.停止透析，濃縮
分離：
4.上樣，過Sephadex 凝膠柱柱，sephadex型號的選擇可以通過ladder估計分子量後選擇
5.通過活性實驗對凝膠柱分離的每一組分做活性實驗，確定活性組分，然後對活性組分進一步細分或者直接得到酶。
6.再細分的話，可以選擇更合適的葡聚糖凝膠或者用電泳分離。

H. 酶進行提純的方法是什麼

酶，從動植物細胞和微生物中提取之後，往往不能直接應用，這是因為生物在合成酶的同時也合成其他大分子物質。而這些大分子物質會嚴重干擾酶的作用，因此必須把酶從中分離出來。如果酶不純，那麼極有可能在應用中形成幾個生化反應同時進行，結果得到的產物也就不是單一的。當然，酶並不是越純越好。不同的生物化學反應，對酶的純度要求也不一樣。因此，要把酶製成不同的酶制劑，以便適應各種需求。

要對酶進行分離和提純，有多種方法。當酶從生物細胞以及微生物中產生之後，可能留在細胞內，也可能分泌到細胞外面。如果是胞外酶，這就方便多了，只要收集微生物和細胞的培養液進行分離和提純就可以了。如果酶在細胞內(稱胞內酶)，則必須研碎細胞，才能把酶提取出來。不論是胞外酶還是胞內酶，都可能會含有一些其他大分子物質，如核酸、蛋白質和澱粉之類的東西。

對付核酸，只要在酶溶液中加入核酸酶，就可以去掉核酸。對於澱粉也比較好辦。最難對付的是蛋白質，因為酶也是蛋白質，能破壞蛋白質的方法也可以破壞酶，所以提純是件比較困難的事。但隨著現代科學技術的不斷進步，經過研究，已找到沉澱法、分子過濾法等。採用以上提純方法，就可以得到不同純度的酶，這為酶的廣泛應用打開了方便之門。

I. 酶分離提純的方法有哪些

酶是蛋白質，因此一般蛋白質的分離原則都應該遵行。但酶作為特殊的蛋白質，最重要的原則是一定在純化過程中保持酶的活性，所以純化過程中一般要注意保持低溫、緩沖液配方避免酶的抑制。每個步驟都要檢測酶活性，一方面直觀了解純化的回收率，另一方面可以計算酶的純度。
酶的分離純化方法一般根據酶的分子量、等電點、疏水性等生化性質，選擇相應的沉澱、鹽析、層析方法，其中親和層析可以應用可逆性底物作為配基或特異性抗體，制備親和層析膠。

J. 酶的分離和純化方法是什麼

酶的分離純化一般包括三個基本步驟：即抽提、純化、結晶或制劑。

首先將所需的酶從原料中引入溶液，此時不可避免地夾帶著一些雜質，然後再將此酶從溶液中選擇性地分離出來，或者從此溶液中選擇性地除去雜質，然後製成純化的酶制劑。

酶分離純化的最終目的是獲得單一純凈的酶，因此，容許在不破壞「目的酶」的限度內，使用各種手段;酶與底物和抑制劑的結合常使其理化性質和穩定性發生改變，這種特性已被用於酶的分離純化。

由於酶及其來源的多樣性及與之共存的高分子物質的復雜性，目前還很難找到一種通用的方法以適用於一切酶的純化。為了使一種酶達到高度純化，往往需要多種方法協同作用，通過酶活性的跟蹤檢測確定最佳流程。

(10)酶提取常用的方法擴展閱讀：

酶的本性是蛋白質，凡可用於蛋白質分離純化的方法都同樣適用於酶，但酶易失活，故分離純化需在低溫(4℃)、溫和pH(4<pH>10)等條件下進行。

與蛋白質類似，酶易在溶液表面或界面處形成薄膜而變性，因此操作中應盡量減少泡沫形成，此外重金屬易使酶失效，有機溶劑能使酶變性，微生物污染以及蛋白水解酶的存在能使酶分解破壞。

在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱是分離純化。