常用的dna直接轉化方法有

㈠ 除了熱激轉化法還有什麼轉化方法

通過轉化將載體DNA導入受體菌繼而得到含有目的DNA插入的轉化菌株是構建DNA文庫最為關鍵的一步.
化學法(化學葯物如氯化鈣等)轉化
氯化鈣法轉化細胞 細菌處於0℃及CaCl2低滲溶液中時,菌細胞膨脹成球形.轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附於細胞表面,經42℃短時間熱擊處理促進細胞吸收DNA復合物.

直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」.具體做法：用限制酶將供體細胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過
運載體分別載人不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫擴增）,從中找出含有目的
基因的細胞,再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來.但這種方法工作量大,具有一定的盲目性.20世紀80年代以後,隨著DNA核苷酸序列分
析技術的發展,人們已經可以通過DNA序列自動測序儀對提取出的基因進行核苷酸序列分析,並且通過一種擴增DNA的新技術（也叫PCR技術）,使目的基因
片段在短時間內成百萬倍地擴增.上述新技術的出現大大簡化了基因工程的操作技術.

㈡ 基因工程中轉化的方法有哪些

轉化（transformation）是某一基因型的細胞從周圍介質中吸收來自另一基因型的細胞的DNA而使它的基因型和表現型發生相應變化的現象。該現象首先發現於細菌。

化學法(化學葯物如氯化鈣等)轉化
氯化鈣法轉化細胞 細菌處於0℃及CaCl2低滲溶液中時,菌細胞膨脹成球形.轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附於細胞表面,經42℃短時間熱擊處理促進細胞吸收DNA復合物。

直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」

具體做法：用限制酶將供體細胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過運載體分別載人不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫擴增）,從中找出含有目的基因的細胞,再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來。但這種方法工作量大,具有一定的盲目性。20世紀80年代以後,隨著DNA核苷酸序列分析技術的發展,人們已經可以通過DNA序列自動測序儀對提取出的基因進行核苷酸序列分析,並且通過一種擴增DNA的新技術（也叫PCR技術）,使目的基因片段在短時間內成百萬倍地擴增。上述新技術的出現大大簡化了基因工程的操作技術。

㈢ DNA是如何轉化的

不知道你問的是細胞的復制 還是基因工程中的DNA轉化呢
在基因工程中，DNA是通過運載體就如受體細胞的，再在受體細胞中復制的

㈣ 什麼是DNA直接轉化系統

DNA直接轉化系統不依賴致瘤土壤桿菌載體或其他生物載體，將經處理的DNA通過物理的和化學的方法導入植物細胞，而實現遺傳轉化。

1.化學法

化學誘導DNA直接轉化是以植物原生質體為受體，藉助於特定的化學物質誘導DNA直接進入植物細胞，主要有下述兩種方法。

（1）PEG介導法：PEG（polyethyleneglycol）即聚乙二醇，可在細胞膜之間或在DNA與膜之間形成分子橋，致使相互接觸和粘連，誘導原生質體的內吞作用，攝取外源基因DNA。PEG法由Davey等（1980）建立，該法不一定需要克隆的基因和特定的載體，能實現控制數量性狀的基因和在缺乏受體篩選標記條件下的遺傳轉化，但必須以裸露的原生質體為受體，某些植物建立原生質體再生系統較為困難，使PEG法的應用受到限制。

（2）脂質體法：脂質體（liposome）是由人工構建的磷脂雙分子層組成的膜狀結構。用脂質體包裹DNA成球狀，通過原生質體的吞噬或融合作用而將它轉運到原生質體內部。包裹在脂質體內的DNA可免受DNA酶的降解。脂質體法可直接轉化外源DNA和RNA，亦可用於基因的瞬時表達檢測。2.物理法

物理法以植物原生質體、細胞、組織或器官為受體，以一些物理因素作用於細胞膜而直接導入外源目的基因DNA。

（1）基因槍法：又稱微彈轟擊法（particlebombardment），已有廣泛應用。將外源DNA包裹在微小的金粒或鎢粒表面，用基因槍（genegun）高速射入受體細胞或植物組織，微粒上的DNA進入細胞後，整合到染色體上得到表達，轉化的受體幾乎包括了所有具潛在分生能力的細胞與組織。基因槍法的轉化率一般為10-3～10-2。該法可將外源基因導入植物細胞的細胞器，並可得到穩定表達。利用基因槍法能否成功，關鍵在於能否從轉化細胞再生出可育的植株。基因槍還特別適於細胞器（葉綠體、線粒體）的基因轉化，以及用於研究組織特異性啟動子。基因槍法成本較高，操作比較復雜，難以插入外源DNA大片段，且整合的外源基因通常是多拷貝的，這可能導致植物自身某些基因的非正常表達，還容易發生基因沉默現象。

（2）電激法：利用高壓電脈沖作用在原生質體上「電激穿孔」，形成可逆的瞬間通道，攝入外源目的基因。這一方法已成功地應用於多種單子葉植物和雙子葉植物。

（3）激光微束法：將激光引入光學顯微鏡聚焦成微米級的微束照射細胞後，利用其熱損傷效應，在細胞壁上產生可恢復的小孔，直徑只有0.5～0.7μm，使加入到細胞培養基里的外源基因得以進入植物細胞。該法操作簡便、受體類型廣、無作物限制，但轉化率低，一般僅為10-4～10-3。

（4）超聲波法：利用低聲強脈沖超聲波的生物學效應，擊穿細胞膜造成通道，使外源DNA進入細胞。該法有操作簡便、設備便宜、不受作物種類的限制等優點，但尚需進一步完善。

（5）顯微注射法：利用顯微注射儀將外源基因直接注入到已固定的植物細胞核或細胞質中，實現基因轉移。受體最初僅用原生質體，現可用於帶壁的懸浮細胞、花粉粒、卵細胞、子房等。

㈤ 基因工程中轉化的方法有哪些什麼是載體轉化法

通過轉化將載體DNA導入受體菌繼而得到含有目的DNA插入的轉化菌株是構建DNA文庫最為關鍵的一步。
化學法(化學葯物如氯化鈣等)轉化
氯化鈣法轉化細胞 細菌處於0℃及CaCl2低滲溶液中時，菌細胞膨脹成球形。轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附於細胞表面，經42℃短時間熱擊處理促進細胞吸收DNA復合物。

直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。具體做法：用限制酶將供體細胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運載體，然後通過運載體分別載人不同的受體細胞，讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫擴增），從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來。但這種方法工作量大，具有一定的盲目性。20世紀80年代以後，隨著DNA核苷酸序列分析技術的發展，人們已經可以通過DNA序列自動測序儀對提取出的基因進行核苷酸序列分析，並且通過一種擴增DNA的新技術（也叫PCR技術），使目的基因片段在短時間內成百萬倍地擴增。上述新技術的出現大大簡化了基因工程的操作技術。

㈥ （轉基因）基因傳遞的方法有幾種

幾種常用的植物轉基因方法

遺傳轉化的方法按其是否需要通過組織培養、再生植株可分成兩大類，第一類需要通過組織培養再生植株，常用的方法有農桿菌介導轉化法、基因槍法；另一類方法不需要通過組織培養，目前比較成熟的主要有花粉管通道法。

1．農桿菌介導轉化法

農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位，並誘導產生冠癭瘤或發狀根。根癌農桿菌和發根農桿菌中細胞中分別含有Ti質粒和Ri質粒，其上有一段T-DNA，農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後，可將T-DNA插入到植物基因組中。因此，農桿菌是一種天然的植物遺傳轉化體系。人們將目的基因插入到經過改造的T-DNA區，藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移與整合，然後通過細胞和組織培養技術，再生出轉基因植株。

農桿菌介導法起初只被用於雙子葉植物中，近年來，農桿菌介導轉化在一些單子葉植物（尤其是水稻）中也得到了廣泛應用。

2．基因槍介導轉化法

利用火葯爆炸或高壓氣體加速（這一加速設備被稱為基因槍），將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中，然後通過細胞和組織培養技術，再生出植株，選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。與農桿菌轉化相比，基因槍法轉化的一個主要優點是不受受體植物范圍的限制。而且其載體質粒的構建也相對簡單，因此也是目前轉基因研究中應用較為廣泛的一種方法。

3．花粉管通道法

在授粉後向子房注射合目的基因的DNA溶液，利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道，將外源DNA導入受精卵細胞，並進一步地被整合到受體細胞的基因組中，隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。該方法於80年代初期由我國學者周光宇提出，我國目前推廣面積最大的轉基因抗蟲棉就是用花粉管通道法培育出來的。該法的最大優點是不依賴組織培養人工再生植株，技術簡單，不需要裝備精良的實驗室，常規育種工作者易於掌握。

常用的動物轉基因技術

1．顯微注射法

在顯微鏡下，用一根極細的玻璃針（直徑1-2微米）直接將DNA注射到胚胎的細胞核內，再把注射過DNA的胚胎移植到動物體內，使之發育成正常的幼仔。用這種方法生產的動物約有十分之一是整合外源基因的轉基因動物。

2．體細胞核移植方法

先在體外培養的體細胞中進行基因導入，篩選獲得帶轉基因的細胞。然後，將帶轉基因體細胞移植到去掉細胞核的卵細胞中，生產重構胚胎。重構胚胎經移植到母體中，產生的仔畜百分之百是轉基因動物。

希望我的回答幫得到您，來自網路知道團隊【周小周】，滿意的話煩請採納~O(∩_∩)O~

㈦ 轉基因技術的例子

提起轉基因技術，人們最先想到的往往是通過轉基因育種技術得到的各種轉基因食品。其實日常生活中胰島素、乙肝疫苗、洗衣粉中的蛋白酶等，都是轉基因技術的產物。

轉基因技術應用到如今，雖然只有短短幾十年，但已經廣泛應用於醫葯、工業、農業、環保、能源等各個領域。

參考來源：轉基因技術就在我們身邊

㈧ dna轉化有哪些方式合有何優點

DNA轉化的范圍較廣，但以植物細胞中的轉化為主，現將其方式及優點闡述如下：

1、農桿菌介導基因轉化：

• 轉化原理:農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位，並誘導產生冠癭瘤或發狀根。根癌農桿菌和發根農桿菌中細胞中分別含有Ti質粒和Ri質粒，其上有一段T-DNA，農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後，可將T-DNA插入到植物基因組中,並且可以通過減速分裂穩定的遺傳給後代，這一特性成為農桿菌介導法植物轉基因的理論基礎。人們將目的基因插入到經過改造的T-DNA區，藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移與整合，然後通過細胞和組織培養技術，再生出轉基因植株。

• 特點：操作簡便、成本低、轉化率高，廣泛應用於雙子葉植物的遺傳轉化。

2、基因槍轉化：

• 轉化原理：利用火葯爆炸或高壓氣體加速，將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中，然後通過細胞和組織培養技術，再生出植株，選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。

• 特點：基因槍轉化率差異很大，相對於農桿菌介導的轉化率要低得多，而且基因槍轉化成本高，嵌合體比率大，遺傳穩定性差。它的一個主要優點是不受受體植物范圍的限制，而且其載體質粒的構建也相對簡單。

3、花粉管通道法：

• 轉化原理：在授粉後向子房注射合目的基因的DNA溶液，利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道，將外源DNA導入受精卵細胞，並進一步地被整合到受體細胞的基因組中，隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。

• 特點：不依賴組織培養人工再生植株，技術簡單，不需要裝備精良的實驗室，常規育種工作者易於掌握。