快速培養厭氧細菌的方法有哪些

⑴ 請教如何快速培養細菌和黴菌

一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌要培養1個月之久。
望採納~

⑵ 試述厭氧微生物的培養方法有哪些

主要有兩大類。一類是隔絕氧氣的方法。比如液體培養時在液面滴加礦物油或者石蠟油達到液封的作用。在瓊脂中穿刺培養，也可以隔離空氣。還有厭氧培養箱，可以直接在其中培養厭氧菌。
另一類是加入還原劑的方法，中和分子氧。比如用庖丁肉培養基直接培養厭氧菌。

⑶ 如何培養厭氧菌

有幾種密封方法：
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌，必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑，或用物理、化學方法去除環境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基，牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多，可根據實際情況選用。
1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而將厭氧菌培養出來。
2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發生管（有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後，盡量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態，可以孵育。
3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門，內門通箱內先關著。欲放物入箱，先打開外門，放入交換室，關上外門進行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達到厭氧狀態，然後手伸入手套把交換室內門打開，將物品移入箱內，關上內門。箱內保持厭氧狀態，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。
5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物（多是植物），消耗氧氣，同時產生二氧化碳，供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基：本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無氧環境。
至於厭氧培養基怎麼配我就不太清楚了，不過就是按一般要的各種營養，滅菌即可，個人看法

⑷ 怎麼做細菌培養

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法,二氧化碳培養法和厭氧培養法三種.
1. 一般培養法 將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長.少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長.為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水.培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基乾裂.
2. 二氧化碳培養法 某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格.將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,常用方法有以下幾種:
（1） 二氧化碳培養箱 可將已接種的培養基直接放入箱內孵育,即可獲得二氧化碳環境.
（2） 燭缸法 將已接種的培養基,置於容量為2 000ml的磨口標本缸或乾燥器內.缸蓋或缸口處均需塗以凡士林,然後點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內約含5-10%的CO2 容器置37℃培養.
（3） 重碳酸鈉-鹽酸法 每升容積的容器內,重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種葯各置一器皿內（如平皿內）,連同器皿置於標本缸或乾燥器內,蓋嚴後使容器傾斜,兩種葯品接觸後即可產生二氧化碳.
3. 厭氧培養法 目前常用的厭氧培養方法有厭氧罐法,氣袋法及厭氧箱三種.
（1） 厭氧罐法 是目前應用較廣泛的一種方法,共分為以下幾種.
抽氣換氣法:該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟並可迅速建立厭氧環境.標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0位,連續反復3次,最後在罐內-79.98KPa的情況下,充入70%的N2 ,20%H2 ,10%CO2 （有人改用20%CO2 及80%H2 ,亦可獲得好結果）.罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘余的O2 和H2 化合成水.同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色.臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色.
氣體發生袋法:氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種葯片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的葯片,另一種是含有硼氫化鈉的葯片.前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫.使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml蒸餾水,立即放入含有鈀粒,指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子經2-3分鍾後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現.密封後1小時左右罐中的O2 的含量可低於<1%.
（2） 氣袋法 此種方法不需要特殊設備,操作簡單,使用方便,不但實驗室中可用,而且外出采樣,現場接種也可用.原理與氣體發生袋完全相同,只是採用塑料袋代替了厭氧罐,氣袋為一透明而密閉的塑料袋,內裝有氣體發生安瓿,指示劑安瓿,含有催化劑的帶孔塑料管各一支.其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中,用彈簧夾夾緊袋口,然後用手指壓碎氣體安瓿,20分鍾後再壓碎指示劑安瓿,如果指示劑不變藍色,說明袋內達到厭氧狀態,即可放入37℃進行培養.
（3） 厭氧培養箱 使用之前須仔細檢查厭氧裝備有無漏氣等問題,以及催化劑,指示劑質量等.使用時嚴格遵守操作規程,保證箱內氣體比例合理.

⑸ 厭氧微生物的培養方法有哪些

用液體培養基培養的話,避免震盪培養基,引起空氣的流動；用固體培養基的話,先把菌液倒到培養皿中,在倒培養基,凝固後,倒置培養.

⑹ 細菌培養的方法有哪些

根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法三種。

1、一般培養法：將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18－24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長。少數生長緩慢的細菌，需培養3－7天直至一個月才能生長。

為使培養箱內保持一定濕度，可在其內放置一杯水。培養時間較長的培養基，接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固，以防培養基乾裂。

2、二氧化碳培養法：某些細菌，如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10％二氧化碳的空氣中才能生長，尤其是初代分離培養要求更為嚴格。將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法，

3、厭氧培養法：常用的厭氧培養方法有厭氧罐法、氣袋法及厭氧箱三種。

(6)快速培養厭氧細菌的方法有哪些擴展閱讀：

培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基，制定培養條件（溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等）。

一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。

一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

通過日常管理、檢測、檢查，了解光合細菌的生長情況，就可以結合當時環境條件的變化進行分析，找出影響光合細菌生長繁殖的原因，採取相應的措施。影響光合細菌生長的原因很多，內因是菌種是否優良，外因是光照、溫度、營養、敵害和厭氣程度等。

溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長，而且溫度、光照和pH值之間是互相制約的，溫度與光照的強弱是對立統一的，所以光合細菌生長的最適條件應是互應的，即溫度高，光照應弱；溫度低，光照應強。

如果是溫度高，光照強，pH值就會迅速升高，培養基產生沉澱，抑制光台細菌的生長；如果溫度低，光照弱，光合細菌得不到最佳能源，生長速度也慢。經試驗得出光合細菌生長的最適條件是：

①溫度15～20℃時，光照30000～50000lx，培養基pH值為7.0；

②溫度25～30℃時，光照為3000～5000lx，培養基的pH值為7.0。

⑺ 細菌培養，要怎樣才培得出來

以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒， 培養基的制備，接種和培養管理四個步驟。
（一）容器、工具的消毒參考、此處從略。
（二）培養基的制備
1．培養用水
如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配製。如果培養的光合細菌是海水種，則用天然海水配製培養基，注意在海水中加入磷元素時，不能用 磷酸氫二鉀，應用 磷酸二氫鉀，不然會產生大量沉澱。
2．滅菌和消毒菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產性培養則把經沉澱砂濾後的水用漂白粉（或漂白液）消毒後使用。
3． 培養基配製根據所培養種類的營養需要選擇合適的培養基配方。按培養基配方把所需物質稱量，逐一溶解，混合，配成培養基。也可先配成母液，使用時按比例加入一定的量即可。
（三）接種培養基配好後，應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高，一般為20%～50%，即菌種 母液量和新配 培養液雖之比為1∶4～1∶1，不應低於20%，尤其是微氣培養，接種量更應高些，否則光合細菌在培養液中很難占絕對優勢，影響培養的最終產量和質量。
（四）培養管理光合細菌的培養過程中，管理工作包括日常管理操作和測試，生長情況的觀察、檢查以及出現問題的分析處理等三個方面。
根據臨床初步診斷及待檢細菌的種類，可選用不同環境條件進行培養。常用的有需氧培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法。為了提高檢驗的正確率，同一標本常同時採用兩種或三種不同的培養法。
（一）需氧培養法
本法是臨床細菌室最常用的培養方法，適於一般需氧和兼性厭氧菌的培養。將已接種好的平板、斜面和液體培養基等，置於35℃溫箱中孵育18～24h，一般細菌可於培養基上生長，但有些難以生長的細菌需培養更長的時間才能生長。另外，有的細菌最適生長溫度是28℃～30℃，如鼠疫耶爾森菌，甚至在4℃也能生長，如李斯特菌。
（二）二氧化碳培養法
有些細菌初次分離培養時須置5％～l0％C02環境才能生長良好，如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，牛布魯菌等。常以下列方法供給C02。
1.二氧化碳培養箱：是一台特製的培養箱，既能調節C02的含量，又能調節所需的溫度。C02從鋼瓶通過培養箱的C02，運送管進入培養箱內，調節好所需C02，濃度自動控制器後，將接種好的培養基直接放入培養箱中培養即可。此法適於大型實驗室應用。
2.燭缸法：將已接種好的培養基置乾燥器內，並放入點燃的蠟燭。乾燥器蓋的邊緣塗上凡士林，蓋上蓋子，燭光經幾分鍾後自行熄滅，此時乾燥器內C02含量約佔5％～l0％，然後將乾燥器放入35℃溫箱內培養。培養時間一般為18～24h，少數菌種需培養3～7天或更長。
3.化學法：按每升容積加入碳酸氫鈉0.49和濃鹽酸0.35ml的比例，分別置於容器內。將容器連同接種好的培養基都放人乾燥器內，蓋緊乾燥器的蓋子，傾斜容器使濃鹽酸與碳酸氫鈉接觸生成C02。
（三）厭氧培養法
適用於專性厭氧菌和兼性厭氧菌的培養。常用的厭氧培養法有：①皰肉培養基法；②焦性沒食子酸法；③厭氧罐法；④氣袋法；⑤厭氧手套箱法。

⑻ 求助：厭氧菌的培養方法及常用培養基配方

厭氧菌的培養方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌，必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑，或用物理、化學方法去除環境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基，牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多，可根據實際情況選用。
1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而將厭氧菌培養出來。
2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發生管（有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後，盡量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態，可以孵育。
3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門，內門通箱內先關著。欲放物入箱，先打開外門，放入交換室，關上外門進行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達到厭氧狀態，然後手伸入手套把交換室內門打開，將物品移入箱內，關上內門。箱內保持厭氧狀態，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。
5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物（多是植物），消耗氧氣，同時產生二氧化碳，供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基：本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無氧環境。

⑼ 厭氧菌用什麼方法培養

很多種阿，皰肉培養法、焦性沒食子酸法、厭氧罐法、厭氧箱法、厭氧培養袋法…具體的過程網路一下就有了。

⑽ 厭氧微生物的培養方法有哪些

厭氧微生物有哪些培養方法
根據培養時是否需要氧氣,可分為好氧培養和厭氧培養兩大類.
好氧培養：也稱「好氣培養」.就是說這種微生物在培養時,需要有氧氣加入,否則就不能生長良好.在實驗室中,斜面培養是通過棉花塞從外界獲得無菌的空氣.三角燒瓶液體培養多數是通過搖床振盪,使外界的空氣源源不斷地進入瓶中.
厭氧培養：也稱「厭氣培養」.這類微生物在培養時,不需要氧氣參加.在厭氧微生物的培養過程中,最重要的一點就是要除去培養基中的氧氣.