⑴ 尿素的化學鑒定方法
尿素的測定方法可分為兩大類：一類直接法，尿素直接和某試劑作用，測定其產物，最常見的為二乙醯一肟法；另一類是尿素酶法，用尿 素酶將尿素變成氨，然後用不同的方法測定氨。
1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽可用納氏試劑直接顯色、酚-次氯酸鹽顯色或酶偶聯反 應顯色。
尿素測定目前多採用尿素酶偶聯法：用尿素酶分解尿素產生氨，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下使NADH氧化為NAD+時，通過34 0nm吸光度的降低值可計算出尿素含量。
此反應是目前自動生化分析儀上常用的測定原理。此外，尿素酶水解尿素產生氨的速率，也可用電導的方法進行測定，其電導的增加 與氨離子濃度有關，反應只需要很短的時間，適用於自動分析儀。
2）酚-次氯酸鹽顯色法：尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸鹽，在鹼性環境中作用形成對-醌氯亞胺，亞硝基鐵氰化鈉催化此反 應：
對-醌氯亞胺同另一分子的酚作用，形成吲哚酚，它在鹼性溶液中產生藍色的解離型吲哚酚：
此反應敏感，血清用量少（10μl），無需蛋白沉澱，一般用於手工操作測定中。
3)納氏試劑顯色法：尿素經尿素酶作用後生成氨 ，氨可與納氏試劑（HgI2.2KI的強鹼溶液）作用，生成棕黃色的碘化雙汞銨。
尿素酶法的優點是反應專一，特異性強，不受尿素類似物的影響，缺點是操作費時，且受體液中氨的影響。
⑵二乙醯一肟法（直接法）：尿素可與二乙醯作用，在強酸加熱的條件下，生成粉紅色的二嗪化合物（Fearom反應），在54 0nm比色，其顏色強度與尿素含量成正比。二乙醯不穩定，用二乙醯一肟代替，後者遇酸水解成二乙醯。
試劑中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲，可提高靈敏度，增加顯色穩定性，其中Fe3+和Cd2+有氧化作用，還能消除羥胺的 干擾作用。提高酸的濃度可增加靈敏度。二乙醯一肟與尿素的反應不是專一的，與瓜氨酸也有顯色。本法靈敏、簡單，產生的顏色穩定， 缺點是加熱時有異味釋放，一般臨床已很少使用此方法。
尿素測定用血清或血漿，體液中尿素的濃度常用尿素中含有的氮來表示，稱為尿素氮。如欲換算成尿素，可根據60g 尿素含有28g氮計算，即1g尿素相當於0.467g尿素氮，或是1g尿素氮相當於2.14g尿素。
正常參考值：血清尿素氮為2.8-7.1mmol/L，相當於尿素1.8-6.8mmol/L。