❶ 定量檢測單個細胞中某種蛋白質的表達量可以有哪些方法
在生物學研究領域，定量檢測單個細胞中某種蛋白質的表達量是一個關鍵問題。CITE-seq（Cellular Identity Tagging by Sequencing）技術為解決這一問題提供了一種有效途徑，結合了scRNA-seq（單細胞轉錄組測序）和ADT（antibody-derived tags，抗體衍生標記）技術，實現了單個細胞中mRNA和蛋白質表達量的同時檢測。這一技術的理論基礎是，蛋白質作為生物體功能的執行者，其表達量直接影響著細胞的功能和活性。CITE-seq技術通過檢測蛋白質標記（ADT），可以更准確地對細胞進行分類，彌補了單純基於mRNA表達量分析的局限性。
CITE-seq技術的優勢在於，它能夠一次性獲得單個細胞的mRNA和蛋白質表達量信息，這對於理解細胞功能和細胞間的相互作用至關重要。通過對比CITE-seq與僅基於scRNA-seq的數據集，可以發現它們在細胞亞群分類上的精度相當。這意味著，通過整合蛋白質表達信息，CITE-seq技術能夠提高細胞分類的准確性，尤其對於罕見細胞亞群的識別。
在實際應用中，CITE-seq技術可以應用於各種研究領域，如神經科學、免疫學、腫瘤學等。例如，在癲癇疾病的研究中，CITE-seq技術揭示了癲癇的免疫特徵，表明神經炎症和促炎微環境在疾病發展中扮演了重要角色。通過CITE-seq技術，研究人員能夠獲得單細胞的mRNA和蛋白質表達數據，從而更准確地分析和理解細胞功能。
為了深入了解CITE-seq技術，可以從理論基礎、數據來源、數據讀取、scRNA-seq數據處理、ADT數據處理、數據整合等幾個方面進行學習。這一技術不僅在理論層面提供了細胞功能分析的新工具，而且在實際應用中展現出顯著優勢。學習CITE-seq技術，能夠幫助研究者在單細胞水平上深入探究生物學問題，推動科學研究的進展。
❷ 蛋白表達原理和檢測方法「官方揭秘」
蛋白表達，一種分子生物學技術，通過原核或真核表達系統實現外源基因蛋白在模式生物（如細菌、酵母、動物或植物細胞）中的合成。其核心原理涉及基因轉錄和翻譯，生成並存於細胞內的蛋白質。為了驗證這一過程，我們有多種檢測手段：
首先，免疫印跡法憑借其高靈敏度和特異性，是常用的檢測方法。它通過電泳或蛋白質間的相互作用，將目標蛋白分離到凝膠上，利用抗體標記並檢測，適用於臨床檢測。
其次，蛋白質晶元技術作為高通量技術，能夠同時測定大量蛋白表達水平。原理是將目標蛋白吸附在晶元上，通過不同抗體檢測，提供高效、准確和可重復的結果。
最後，質譜分析則通過測定蛋白質的質量、序列等信息，細致地揭示其分子特性。通過加速並分析蛋白質分子，獲取質譜圖譜，從而確定其分子量和功能特性。
以上是蛋白表達原理和檢測方法的簡要介紹，強耀生物專注於多肽合成、蛋白表達和抗體制備等領域，以高品質服務行業多年，期待您的咨詢和合作。