真菌檢測皮屑收集方法

Ⅰ 如何確定是癬

首先，我們要了解癬病有哪些特點。癬病是由真菌引起的，故其發生與真菌的生活習性密切相關。真菌喜歡溫暖潮濕的環境，所以人體的手掌、腳底、指(趾)縫、大腿內側、腋下、乳房下等處是癬病好發的部位。夏天氣候炎熱潮濕則癬病明顯加重，冬天天氣寒冷乾燥則皮損減輕或消失。
盡管如此，仍有一些病史較長、病損不典型的患者很難確診。在皮損中找到真菌則是診斷癬病最有力的依據。真菌檢查主要有兩種方法：一是直接鏡檢，在病損的邊緣取一些皮屑或有病的毛發或指甲的碎屑，放在載玻片上，滴上一滴10%氫氧化鉀溶液，再把玻片放在酒精燈上烘熱片刻，但不要煮沸，以防燒干，然後蓋上蓋玻片並置於顯微鏡下尋找真菌。如果在顯微鏡下找到真菌的菌絲或孢子，就可以確診癬病了。若一次找不到，可以再找一次。但應注意排除外用葯的干擾，特別是抗真菌葯物，所以最好停止擦葯一周後再檢查。二是培養檢查，有時真菌數量很少，直接檢查找不到，可以取少量皮屑或病發，經75%酒精消毒後(只消滅細菌，不殺死真菌)接種於沙氏瓊脂培養基上，在室溫下培養。經過1～2周時間，真菌就可以長出來，通過觀察菌落的形態及顯微鏡下的結構可以鑒定真菌的類型。如果經3～4周仍無真菌生長，基本上可以說明沒有真菌存在。但培養檢查也不是絕對的，查不到真菌也不能完全排除癬病。必要時可外用抗真菌葯物治療，如果是癬病一般可取得滿意的療效。即使不是癬病，也不會引起嚴重的後果

Ⅱ 臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗知識

臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗知識

真菌是一大類不含葉綠素，無根、莖、葉，由單細胞或多細胞組成的真核細胞型微生物。大部分真菌對人類有益，能引起人類疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是我為大家帶來的病原性真菌檢驗的知識，歡迎閱讀。

一、常見單細胞真菌的形態觀察

1、新型隱球菌墨汁負染色片：可見菌體呈球形，大小不一，有很厚的莢膜，包圍在菌體周圍，透明發亮，並可見發芽的菌體。

2、白色念珠菌菌體形態：用患者的棉拭子標本常法塗片，革蘭氏染色，鏡檢。顯微鏡下可見菌體呈卵圓形，較葡萄球菌大2-5倍，細胞出芽伸長而成假菌絲，在假菌絲生長點上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長的`大而圓的厚膜孢子。

二、皮膚絲狀菌的檢查

材料：

病人的甲屑、皮屑或毛發、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學顯微鏡等。

方法：

1、采標本：用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑，甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。

2、製片：用小鑷子取少許皮(甲)屑標本置於載玻片中央，滴1-2滴10%KOH溶液，覆加一蓋玻片，在火焰上緩慢加熱，以加速角質溶解，使標本透明，然後輕輕加壓使成薄片，驅走氣泡並吸去周圍溢液。

3、鏡檢：先用低倍鏡觀察有無真菌菌絲或孢子，再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的特徵。鏡檢時光線應稍弱，使視野稍暗。陽性標本常可查見分支菌絲或孢子。

三、真菌的培養

材料：

菌種、沙保氏培養基、平皿、載玻片、蓋玻片。

方法：

1、一般培養：分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種於沙保氏培養基，於22℃-28℃下培養(深部真菌可培養於37℃環境)，一周後觀察菌落特徵。真菌菌落在形態上可分為三大類：

酵母型菌落：與細菌菌落相似，圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤。

類酵母型菌落：同酵母型菌落，圓形、較大、白色，但菌落根部有假菌絲長入培養基內。

絲狀菌落：是多細胞真菌的菌落形式。有許多疏鬆的菌絲體構成，菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀，菌落中央有皺折，外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。

2、小培養(玻片法)：在無菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂，待凝固後，無菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊，再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上，然後在小塊培養基四邊接種已分純的真菌菌種，蓋上無菌蓋玻片，移入有一定濕度的無菌平皿內，置22℃-28℃孵育。動態觀察生長過程，根據菌絲和孢子的特點鑒定真菌類別。