A. 怎樣檢測火腿腸中的亞硝酸鈉
分光光度法測定火腿腸中亞硝酸鹽的含量
一,原理
樣品經沉澱蛋白質,除脂肪後,在弱酸條件下亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化,再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紅色染料,通過測定吸光度可與標准進行比較定量.
二,試劑
亞鐵氰化鉀溶液:稱取10.6g K4Fe(CN)6 .3H2O溶於水定容100mL.
乙酸鋅溶液:稱取11g Zn(CHCOO)2 .2H2O加1.5mL冰乙酸,溶於水定容50mL.
飽和硼砂溶液:稱取5g NaB4O7 . 10H2O溶於100mL熱水中,冷卻備用.
20%鹽酸:取54mL濃鹽酸加水45mL.
0.4%對氨基苯磺酸:稱取0.4g對氨基苯磺酸溶於100mL20%鹽酸中.
200ug/mL亞硝酸鈉標准液:精密稱取0.1000g經硅膠乾燥24小時的亞硝酸鈉(GR),加水溶解後,定容500mL.
5.0ug/mL亞硝酸鈉標准使用液:吸取亞硝酸鈉標准液5.0mL於500mL容量瓶中用重蒸餾水定容.
三,儀器
電爐 電熱恆溫水浴鍋 玻棒 漏斗 鐵架台
燒杯(200mL2個,500mL2個,50mL1個)
容量瓶(250ml1個) 吸管(2mL,5mL,10mL,50mL各1支)
比色管(50mL10支)
四,操作步驟
1,樣品處理
稱取3g左右火腿腸於50mL燒杯中,加入飽和硼砂溶液6.3mL,以玻棒攪勻,用70℃左右的重蒸餾水約100mL將其洗入250mL的容量瓶中,置於沸水浴中加熱15分鍾,取出,一邊轉動一邊加入5mL亞鐵氰化鉀溶液,搖勻,再加入5mL乙酸鋅溶液以沉澱蛋白質.定容,混勻,靜置半小時,除去上層脂肪,過濾,棄去初濾液30mL,收集濾液備用.
2,繪制標准曲線
吸取0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20mL亞硝酸鈉標准使用液,分別置入7支50mL比色管中,各加入0.4%對氨基苯磺酸2mL,混勻,靜置3-5分鍾後各加入1.00mL 0.2%鹽酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混勻,靜置15分鍾,用2cm比色皿,以零管調零,於538nm處測量吸光度,以亞硝酸鈉含量為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制標准曲線.
3,樣液測定
吸取40mL樣品處理液於50mL比色管中,按標准曲線繪制步驟進行,測定吸光度,通過吸光度從標准曲線上查出亞硝酸鈉的含量(ug).
五,計算
X × 1000
亞硝酸鈉的含量(g/kg) = ——————————————
m × 40/250 × 1000 ×1000
X —— 40mL樣品處理液中亞硝酸鈉的含量(ug)
M —— 火腿腸的質量(g)
B. 檢驗亞硝酸鈉的方法
先檢亞硝酸鹽，取樣品溶液十毫升，加對氨基苯磺醯胺稀鹽酸溶液1毫升，再加鹽酸萘乙二胺溶液1毫升，應顯粉紅色，鈉的檢驗用焰色法，顯鮮黃色。