南京cck8檢測細胞增殖的方法

Ⅰ cck8實驗步驟及注意事項

cck8實驗步驟：

1、細胞種板：將對數生長期細胞用胰蛋白酶消化，配製成細胞懸液，每孔加入100μl，使每孔細胞密度1000-5000個，邊緣孔用無菌PBS填充。5%CO2，37℃培養至細胞貼壁鋪滿孔底。

2、按實驗方案加入葯物。每種處理建議設置4-6個復孔。

3、處理結束後，每個孔中分別加入10μlCCK-8溶液，輕輕敲擊培養板混勻，培養箱中孵育1-4小時。

4、使用酶標儀測定450nm光吸收值，按公式計算葯物對細胞的抑制率。

注意事項

1、如果暫時不測定OD值，可向每孔中加入10μl0.1M的HCl溶液或者1%SDS（w/v）溶液，室溫避光保存，在24h內測定，吸光值不會發生變化。

2、如果待測物質有氧化性或者還原性，可在加CCK-8之前除去舊培養液，並用培養基洗滌兩次，然後加入新鮮培養基，以去除影響。