Ⅰ 誰知道賴氨酸鹽酸鹽的檢測原理啊
名稱:L-賴氨酸鹽酸鹽
產品含量:99%
CAS 編號: 657-27-2
質量標准:食品級
包裝規格:25KG/紙板桶
中文產品名稱:L-賴氨酸鹽酸鹽
英文產品名稱:L-Lysine monohydrochloride
化學分子式:C6H14N2O2·HCL
化學名稱:
特性與用途:白色或近白色自由流動性的結晶性粉末。幾乎無臭。263~264℃熔化並分解。通常較穩定,高濕度60%以下穩定,60%以上則生成二水合物。與維生素C和維生素K3共存則易著色。鹼性條件及直接與還原糖存在下加熱則分解。易溶於水(40g/ml,35℃),水溶液呈中性至微酸性,與磷酸、鹽酸、氫氧化鈉、離子交換樹脂等一起加熱,起外消旋作用。賴氨酸為必需氨基酸,無法在體內合成,如缺乏則引起蛋白質代謝障礙及功能障礙,導致生長障礙、發育不全、體重下降、食慾不振、血中蛋白減少等。D-型賴氨酸無生理效果。
質量標准:GB 10794--89,強制性國際
項目 質檢標准
含量(以干基計) ≥98.0%
重金屬(Pb計) ≤0.001%
透光度(E10%1cm:400nm) ≥95%
乾燥失重(105℃,3h) ≤1.0%
砷(以As計,GT-3) ≤0.0001%
灼燒殘渣 ≤0.2%
比旋光度[α]25D 19.0°~ +21.5°
PH(10%水溶液) 5.0~ 6.0
功用:營養增補劑。用於強化食品中的賴氨酸。黑麥、米、玉米、花生粉等所含賴氨酸為限制氨基酸,小麥、芝麻、燕麥等所含賴氨酸為第一限制氨基酸。尚可用於蛋黃醬、牛乳、方便麵食品等。亦可用作調味料,以改善風味。
推薦使用量及注意事項:
成人每日最小需要量(以L-賴氨酸計):男性約0.8g,女性約0.4g,青年12~32mg/kg,幼兒180mg/kg(1g 賴氨酸相當於 L-賴氨酸鹽酸鹽1.25g)
毒性:可安全用於食品中
包裝與運輸:
包裝:本品採用雙層包裝:內層用食用聚乙烯塑料袋密封,外用紙板箱包裝。每箱凈含量為25kg,還可根據用戶需要包裝。
運輸:應輕裝輕卸。防止日曬、雨淋,不能與有毒、有害物品混運、本品為非危險品,可按一般化學品運輸。
貯存: 應貯存在乾燥清潔避光的環境中,嚴禁與有毒物質混放,以免污染。保質期為兩年。
Ⅱ 賴氨酸高產菌種的篩選與分離,一般產生菌是哪些菌,怎麼鑒定啊,產生賴氨酸以後怎麼檢測求高手詳細啊
現在大生產上有競爭力的賴氨酸生產菌種均是基因工程菌(例如E.COLI)。自然界的細菌不會積累賴氨酸。菌種的鑒定可以查相關的手冊如伯傑士手冊上的方法進行鑒定。賴氨酸的檢測可以用氨基酸分析儀的方法,也可以用茚三酮顯色的方法。
Ⅲ 測定該轉基因玉米種子中的賴氨酸的含量可以選用雙縮脲試劑嗎
可以的 測定該轉基因玉米種子中的賴氨酸的含量 用雙縮脲試劑,是可以測試出來的
Ⅳ 蛋白葯物生物學活性檢測方法有哪些
一、MTT比色法檢測細胞活性
(一)原理
活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。
(二)試劑准備
1、青鏈黴素溶液(100X):青黴素100萬U,鏈黴素100萬U,溶於100mlddH2O中,抽濾除菌。
2、L15基礎培養基:1000mlL15培養基,加2g碳酸氫鈉,10ml 100X青鏈黴素,5mlHEPES。
3、MTT液:5mg/ml溶於L15基礎培養基。
4、SDS處理液:20gSDS,50μl二甲基甲醯胺,加雙蒸水50ml溶解。
5、L-多聚賴氨酸:50μg溶於1ml雙蒸水中。
6、L15基礎培養基溶解的不同濃度的蛋白液。
(三)操作步驟(以背根神經節細胞培養為例)
1、無菌條件下取新生一天的SD大鼠背根神經節(DRG)。
2、鏡下去除神經根和外膜,放入1ml 0.1%膠原酶中37℃消化30min,每5min搖勻一次。
3、洗去膠原酶,吹打分散後,接種於預先塗有L-多聚賴氨酸的96孔培養板中,每孔含100μl無血清L15培養基,細胞約800個。
4、實驗組分別加入純化的表達蛋白(分別以不同的蛋白濃度),陰性對照加入等體積表達蛋白的溶劑。
5、37℃ 5%CO2培養48hr後,每孔加入10μl MTT,37℃ 5%CO2孵育4hr。
6、加入100μl 20%的SDS處理液,37℃孵育20hr。
7、用EL×800微孔酶標儀測定OD570值,數據分析。
Ⅳ 求助:賴氨酸的檢測方法
飼料級L-賴氨酸鹽酸鹽含量的測定: 試樣預先在105℃乾燥至恆重,稱取乾燥試樣式0.2g,稱准至0.0002g,加3ml甲酸和50ml冰乙酸,再加入5ml乙酸汞的冰乙酸溶液,加入10滴a-萘酚苯基甲醇指示液,用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸標准溶液滴定,試樣液由橙黃色變為黃綠色即為滴定終點。用同樣方法另作空白試驗以校正之。 計算公式:賴氨酸鹽酸鹽的百分含量按下式計算:0.09132*C*(V-V0)/m 式中:c為高氯酸標准溶液之濃度(mol/L);V為試樣消耗高氯酸標准液之體積(ml);V0為空白試驗消耗高氯酸標准溶液之體積(ml);m為試樣之質量(mg);0.09132為每毫摩爾賴氨酸鹽酸鹽之質量(g)。兩個平行試樣測定結果之差不得大於0.2%,以求算術平均值。
Ⅵ 檢驗氨基酸用什麼方法
1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。
Ⅶ 賴氨酸含氮量或者粗蛋白怎麼測要打官司
賴氨酸的含量為19.2%,折成粗蛋白質的含量應是120%,因系數6.25是按氨基酸的平均含氨量16%計算的,如是賴氨酸鹽酸鹽或硫酸鹽還得進行相應的換算
Ⅷ 蛋白質中活性賴氨酸的評價實驗
給你拷了個方法過來,可參考一下:
賴氨酸(lysine, Lys)作為豬的第一限制性氨基酸,從20世紀50年代開始一直是動物營養學研究的熱點之一。Lys在動物飼料中用量大、成本較高,因此必須精確地確定動物最佳生長發育的最低需要量。另一方面許多原料經過加熱、加壓、磨粉、鹼處理或貯存時間過長,均可導致Lys的є-氨基與其它物質發生反應,形成脫氧酮糖化合物,該物質雖能被動物吸收,但無營養價值(Eichner 等, 1994),從而導致部分Lys不能被動物利用。只有準確評價Lys的有效率,才能合理利用Lys,從而避免蛋白質資源的缺乏和浪費,減少動物對氮的排放和環境污染。准確測定飼料和回腸末端食糜活性Lys含量,將有利於動物對Lys需要量的研究。
1 活性Lys(Reactive lysine)的定義
Lys的基本結構為丙胺酸(如圖1),丙胺酸的β-碳原子上帶有一個丙胺基,ε-氨基比α-氨基具有較高的pKa(多肽為10.5),從而使得Lys側鏈的親核性下降。特殊環境作用能夠降低Lys側鏈的pKa,使之變得活躍。活性Lys是指Lys上的є-氨基能與其他物質發生反應的Lys,可利用Lys是指食入的Lys能夠被動物吸收並可用於蛋白質合成的Lys,可消化氨基酸是指食入的Lys經消化後被吸收的Lys,從實用角度,可以把可消化Lys和可利用Lys同等對待,但活性Lys與可消化Lys或可利用Lys有著本質的區別。
圖1 賴氨酸的基本結構
2 活性Lys的測定方法
飼料活性Lys的測定方法有多種,每一種方法都有各自的優缺點,許多研究者對各種方法分別進行了論述(見表1)。
2.1 1-F-2,4-二硝基苯法(FDNB法)
Carpenter(1960)用FDNB法連接Lys殘基,酸水解之後用分光光度計測定DNP-Lys含量,當樣品含有碳水化合物時,會生成一些不穩定的化合物,導致過高估計活性Lys含量(Matheson,1968)。Holm(1971)在碳水化合物水解時,試圖使用色譜法從受到干涉的氨基酸和其他化合物中分離出DNP-Lys。Peterson和Warthesen(1979]使用高效液相色譜來分析活性Lys,檢測波長為436 nm,C18毛細柱,20%乙氰和80% 0.01M醋酸鹽緩沖液(pH 4.0)作為流動相,該法首先應用在分析二硝基苯基化棉籽蛋白的水解產物。Catherine等(1997)[11]應用上述方法未能很好地測定DNP-Lys,並得出DNP-Lys紫外線最大吸收峰在364 nm,而不是在436 nm,並對此分析方法做了改進,用20%乙氰和80%0.01M鄰苯二甲酸氫鉀緩沖劑(pH3.9)混合物作為流動相,在此條件下,DNP-Lys和其它化合物能很好地得到分離。Qin等(1998)報道,用FDNB法測定中國大豆和阿根廷大豆活性Lys,加熱到100℃和118 ℃時,FDNB-活性Lys變化規律不明顯,但當加熱到136℃,兩種大豆中活性Lys含量隨加熱時間的延長而降低。近年來,很多學者用高效液相色譜法測定以穀物為主的嬰兒食物、嬰兒配方食品和其他食品DNP-Lys含量,但是沒有進一步與動物試驗結果進行比較(castillo等,1997;Alala-Hurtado等,1999;Fernandez-Artigas等1999;Hermandez等,2001)。
2.2 胍基反應法 (Guanidination)
胍基反應法是Mauron和Bujard(1964)建立一種活性Lys分析方法,這種方法根據ε-氨基在鹼性條件下與鄰-甲基脲胍基反應形成同型精氨酸,經過水解後同型精氨酸可以用離子交換層析法測定,該測定方法盡管反應時間較長(幾天)、溫度控制嚴格(室溫),但分析結果可靠,因此現在還普遍使用。Mao等(1993)用葡萄糖或鹼處理大豆活性Lys,結果表明,與總Lys分析比較,葡萄糖處理組總Lys含量下降17%~40%,活性Lys含量下降78%~85%。用胍基反應證實了熱鹼處理損害活性Lys更為真實, 其原因是在酸水解時重新除去一些被反應的Lys(如美拉德反應起始物果糖-Lys)。Imbeah 等(1996)在酪蛋白和大豆粉中得到胍基反應的最佳反應條件,得到可溶奶蛋白Lys轉化率為100%,大豆稍低於80%。 Ravindran(1996)等研究了飼料原料胍基反應,以確定內源氨基酸的分泌量,主要集中棉籽蛋白最佳轉化的研究,64% Lys轉化為同型精氨酸。Moughan(1996) 在上述相同的試驗條件下,用胍基反應法與FDNB法測定了熱處理酪蛋白/乳糖混合物中活性Lys含量;Rutherfurd(1997 a)用胍基反應法和FDNB法對血粉、小麥粉、肉骨粉、豆粉、棉子粉活性Lys含量進行比較。兩者結果表明,胍基反應法測出活性Lys含量等於或高於用FDNB法(見表2)。因此,Rutherfurd(1997a, b)、Moughan(1996)指出該方法在消化試驗中能更加精確地確定Lys消化率,因為在分析粗原料和食糜Lys時,沒有減去蛋白質水解前所破壞的Lys。從表3可見,在血粉、豆粉、肉骨粉、乾燥玉米、熱脫脂乳粉以及棉籽粕中,常規氨基酸分析法測定回腸真消化率明顯低於可消化Lys含量。
2.3 熒光計分析法(OPA法)
Goodno等 (1981)設計了一種熒光計分析法,用鄰苯二甲醛(OPA)來估價蛋白質活性Lys。Vigo等(1992報道美拉德反應前後,不同富含碳水化合物奶產品,其活性Lys含量可用OPA分光光度計法進行測定(表4),從FDNB法測得的數據可以看出,透析前活性Lys明顯低於透析後,無透析樣品損失了活性Lys,可能是由於糖含量較高。當有糖存在時,FDNB法測量活性Lys會過低。從OPA法測得的結果來看,透析與不透析的差異不明顯。所以在有高水平糖存在時,用OPA法分析飼料或食物活性Lys應該是可行的。
※樣品1 未加熱, 樣品2 60°C加熱20小時, 樣品3 100°C加熱1小時, 樣品4 120°C加熱45分鍾; 表中數據為平均±標准差。
與其它化學方法比較,用OPA法估計奶產品活性Lys有以下幾個優點:1)糖不會干涉;2)分析樣品量少;3)操作簡單;4)沒有嚴格的處理,如蛋白質水解、加熱或溶劑萃取,可以在短時間內完成。
2.4 化學計量染色法
Ibolya和Margit (1985)使用化學計量染色法確定大豆蛋白活性Lys含量,根據蛋白質自由鹼性基團與1-苯-2萘酚-6, 8二磺酸(OG)反應來確定。蛋白質游離的部分鹼性基團(組氨酸、精氨酸和Lys)來確定總氮含量,部分鹼性基團通過美拉德反應來確定總氮變化。根據兩個分子結構不同而作出的假設,OG顏色敏感性只有AO-12(十二烷基二甲基氧化銨)的一半。因為OG含氮載體能夠結合兩個氨基,而AO-12隻能結合一個氨基。染料與蛋白質比通常小於1, AO-12測定活性Lys是直接根據它的染色能力。
染色法是測量蛋白質熱反應最方便的方法,具有便宜、省時省力、不需要水解蛋白質等優點。3 小結
FDNB法、胍基反應法、熒光計分析法和化學計量染色法四種方法各有優缺點。在實際生產中,為了檢測活性Lys的結果更加准確,應根據不同飼料原料選擇不同的方法。通過測定飼料和回腸食糜活性Lys含量,我們能夠精確估計飼料成本,更有效地選擇飼料原料,從而為配製高效日糧提供理論依據,進一步改善日糧蛋白質的利用效率,為節約蛋白質資源開辟新的道路。
參考文獻
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2 Carpenter, KJ.. The estimation of the available lysine in animal protein foods. J. Biochem. 1960, 77, 604-10.
Ⅸ 熒光檢測賴氨酸的熒光增強的原理
賴氨酸在不同溶劑中熒光強度發生變化。根據查詢賴氨酸的相關資料得知,熒光檢測賴氨酸的熒光增強的原理賴氨酸在不同溶劑中熒光強度發生變化。通過與精氨酸和甘氨酸的對比實驗,賴氨酸在可見光區有較強的熒光,且其吸收也相對較強,同時對賴氨酸的熒光壽命進行了分析測定。實驗結果表明,賴氨酸的熒光性質明顯區別於其它氨基酸,這與其特殊6-氨基官能團密切相關,且可歸屬於氮原子的本質熒光。
Ⅹ 飼料原材料檢驗標准和方法是
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SCT 3504-2006飼料用魚油
DB33T 459-2003 飼料添加劑 飼料用復合酶制劑
GB 10381-89 飼料用花生餅
GB 10382-89 飼料用花生粕
GB 10385-89 飼料用豌豆
GB 10387-89 飼料用蠶豆
GB 10388-89 飼料用木薯葉粉
GB 10389-89 飼料用首蓿草粉
GB 10390-89 飼料用白三葉草粉
GB 10391-89 飼料用甘薯葉粉
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