糖基化血紅蛋白的檢測方法

㈠ 糖化血紅蛋白的檢測方法

1、陽離子交換色譜法
原理：糖化導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中，例如Biorex70，伴有增加的離子濃度和（或）pH下降，糖化血紅蛋白在非糖化血紅蛋白前先洗脫。這現象產生了糖化血紅蛋白最初的術語「快速血紅蛋白」。陽離子交換色譜法可用於小型、微型或大型柱層析方法或部分或全自動的PHLC/FPLC方法。因為，其他翻譯後修飾血紅蛋白，例如醛亞胺型、甲醯化、乙醯化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和異常血紅蛋白電荷交換也不同於正常的HbA0，所以已經列出了許多陽離子交換層析法的干擾因素。使用常規HPLC的方法。分離糖化血紅蛋白亞組分是能達到滿足需求的臨床精密度。然而，已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血紅蛋白部分。少數糖化血紅蛋白也整合到HbA0主峰中。通過使用特殊的柱原料（poly-CATA）和30～40 min分離時間可以改善分離效果。這些方法可以作為參考步驟但不適合常規使用。所有的陽離子交換色譜法對pH和溫度的變化敏感，因此要控制pH和溫度。
說明：根據紅細胞代謝動力學推測初始HbA1c值大約每日破壞1/120（≈0.83%）。因為糖化在合適的治療下甚至健康人也產生，故這個理論值在體外不能達到。控制不理想的糖尿病患者通過加強治療而達到血糖量正常，可以發現HbA1c值最大下降率以大約每10 d下降正常血糖的1%（絕對的）。由於測定糖化血紅蛋白方法的精確性，兩次測定值HbA1c的差異大約1%就可認為具有臨床相關性。因為這些原因，在HbA1c兩次測定間至少有2周的時間，推薦4～6周的間隔。
因為升高的糖化血紅蛋白值是長期高糖血症的糖尿病患者相當可靠的指示劑，因而是可能診斷糖尿病的。在未治療的個體，正常的糖化血紅蛋白值臨床上可以排除明顯的糖尿病。但由於它不能檢測糖耐量受損，所以作為診斷和（或）篩選目的唯一的參數，使用糖化血紅蛋白是存在問題的。
2、電泳法
原理：相比於非糖化血紅蛋白，因糖化而變化的總電荷和糖化血紅蛋白的等電點變化是瓊脂糖凝膠或者pH梯度5.0～6.5的凝膠等電聚焦電泳分離的基礎。瓊脂糖凝膠電泳的血紅蛋白亞組分解析度很小，而等電聚焦可以更好地使亞組分分離。可能由於試驗的自動化程度不足，重要性已經下降。
3、親和層析法
原理：硼酸結合順式-羥基。商品化的m-氨基苯硼酸瓊脂糖共價結合的親和柱已可用於微柱分析檢測。將血樣本中的血紅蛋白加到層析柱後，所有的糖化血紅蛋白（HbA1和旁鏈糖化的血紅蛋白；總糖化血紅蛋白）與硼酸結合而非糖化血紅蛋白通過層析柱可被測量。在加入高濃度也包含順式-羥基的多羥基復合物，例如山梨醇後，糖化血紅蛋白與硼酸的結合被替換而從柱子上洗脫下來。親和層析法對經翻譯以後修飾的血紅蛋白和病理血紅蛋白的影響相對不敏感。利用親和層析法，僅能測定總糖化血紅蛋白。廣泛使用的親和層析方法，允許用經驗演算法從總糖化血紅蛋白值計算出「標準的HbA1c」。
4、免疫分析法
在纈氨酸β-N-末端糖化的血紅蛋白提供了一個容易被抗體識別的抗原表位。可以用單克隆抗體或多克隆抗體進行放射免疫分析和免疫酶學分析測定，抗體特異識別β鏈N-末端糖化的血紅蛋白最後4～8個氨基酸組成的抗原表位。異常的血紅蛋白或翻譯後經修飾的血紅蛋白無干擾。
目前的免疫化學試驗不僅檢測HbA1c，通常也同時檢測HbA2c，因為血紅蛋白A2糖化δ鏈的表位是相同的。抗體直接抗β-鏈的最後四個氨基酸的糖化表位的免疫化學試驗也可用進行檢測，例如HbS1c。在大多數情況下HbA2c意義不大，雖然鐮刀細胞病時可以准確地測定纈氨酸β-N-氨基末端糖化程度，但它仍不能100%代表HbA1c。
5、離子層析法
離子層析法精密度高、重復性好且操作簡單, 被臨床廣泛採用。檢測原理由於血紅蛋白β-鏈N 末端纈氨酸糖化後所帶電荷不同, 在偏酸溶液中總糖化血紅蛋白( GH b) 及H bA 均具有陽離子的特性, 因此經過陽離子交換層析柱時可被偏酸的緩沖液平衡過的樹脂來吸附, 但二者吸附率不同, GH b正電荷較少吸附率較低, H bA 正電荷較多吸附率較高。用不同pH 的磷酸鹽緩沖液可以分次洗脫出GH b 和H bA, 用KCN 可將H b轉化為高鐵氰化血紅蛋白, 用分光光度計測定。或者得到相應的H b層析譜, 其橫坐標是時間, 縱坐標是百分比。HbA1c值以百分率來表示。現在大部分都用全自動測定儀測定。
6、等電點聚集法
是測定GH b的新技術, 它是在聚丙烯酞凝膠中加人載體兩性介質的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH 梯度, 溶血液中各個組份將移動到各自的等電點的pH 位置上, 這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶, 通過解析度高的微量光密度儀掃描, 可以准確地測定出各自組份的含量。由於它能夠分辨出一級結構不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避開各種物質的干擾。
7、化學發光法
採用離子捕捉免疫分析法, 應用抗原抗體反應原理, 聯以熒游標記物, 通過連接帶負電的多陰離子復合物, 吸附到帶正電的纖維表面, 經過一系列徹底清洗等步驟後, 測定熒光強度變化率, 計算濃度。採用專用試劑包和免疫發光分析儀,其檢測系統易於規范和重復, 可減少操作技術誤差, 檢測的靈敏度和特異性高, 批內、批間變異系數小, 回收率高, 准確度高, 交叉污染率小, 影響因素少。
8、酶法
原理為用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min內果糖基氨基酸從H b分離, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )從果糖基氨基酸產生H2O2, H2O2經POD與DA- 64反應, 選擇751 nm 測吸光度改變求得GHb濃度。

㈡ 糖基化血紅蛋白要怎樣測定

實際上1、2次的血糖值並不能真正反映出血糖的階段水平，要想知道血糖的階段值可以測量血糖的糖基化血紅蛋白。糖基化血紅蛋白是葡萄糖與血紅蛋白結合的產物。血糖升高，合成的糖基化血紅蛋白就增加；血糖降低了，新合成的糖基化血紅蛋白就也就隨之降低。但是已經合成的糖基化血紅蛋白在2～3個月內並不減少，而是恆定不變的。因此，該指標穩定性強，不受各種偶然因素影響。近年來，已把它作為評價治療水平的重要指標。但是，糖基化血紅蛋白不能反應血糖的變化規律，所以不能以它替代血糖的測定。正確的作法是血糖與糖基化血紅蛋白結合起來觀察。但要注意的是貧血患者的糖基化血紅蛋白不能准確反應血糖的真實水平。

如果條件允許的話，最好每3個月化驗一次糖基化血紅蛋白。

㈢ 糖化血紅蛋白的標准化檢測

1.HbA1c檢測結果應當在全世界范圍內進行標准化，包括參考系統和結果報告。
2.新的IFCC參考系統是進行A1c檢測標准化的唯一有效的參考標准。
3.全世界范圍，A1c報告結果必須採用IFCC單位（mmol/mol），美國國家糖化血紅蛋白標准化計劃（NGSP）的單位（%）必須採用IFCC-NGSP換算公式進行計算。
4.如果正在進行的「平均血糖研究」得出了優先-特異的標准，那麼由A1c檢測結果計算而得的A1c平均血糖（A1c Derived Average Glucose，ADAG）值應該作為A1c結果的一部分一並報告。
5.在指導臨床治療方面，血糖值和ADAG應該以IFCC單位及測得的NGSP單位表示。

㈣ 糖化血紅蛋白 如何檢查

• 去醫院做個糖化血紅蛋白檢測，一般收費在40~75左右，各地不一樣的，這個的檢測結果代表的是3個月內你的糖化血紅蛋白的情況，比較准確，不會受到幾天內飲食的影響。

㈤ 糖化血紅蛋白儀的檢測方法

糖化血紅蛋白檢測方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。 如毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體，但目前尚無商品化，具有批量樣本通過能力的儀器面世，相當程度地限制了該方法的臨床應用。
金標法的糖化血紅蛋白儀,CV值小於5%。
綜上所述，糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控製程度一項良好的指標，糖尿病患者應定期檢測糖化血紅蛋白，並據此制定，修正相關治療方案。各醫院可根據自身標本的多少，選擇使用有關糖化血紅蛋白的檢測儀器，開展該項目的檢測。

㈥ 糖化血紅蛋白快速檢測儀哪種檢驗方法好

1.HbA1c一滴血樣檢測糖化：適用反映糖尿病患者2-3個月左右的糖代謝情況。監測糖尿病並發在微細血管病變。

2.D－Dimer：適用靜脈血栓，肺栓塞和動脈血栓塞的診斷。

3.DIC的診斷：纖溶作用機制的早期檢測—血栓前危評價，妊娠與分娩復雜性評價，血栓形成過程及溶栓治療的監測，腫瘤輔助診斷。

4.U-Albumin：觀察入微，快速檢測，適用檢測病人尿液中的低濃度的微量蛋白的體外快速診斷。具體哪種方法好，依據不同人的檢測需求。

㈦ 什麼是糖基化血紅蛋白

糖基化血紅蛋白（GHb）反映4～8周前體內血糖的平均水平，並可能是造成糖尿病慢性並發症的一個重要原因。

GHb中以HbA1c的含量最多，對其結構特點研究亦較清楚，故GHb常以HbA1c為代表。GHb的測定方法有層析法（柱層析和高壓液相層析）、比色法、等電聚焦電泳法和放射免疫法等，目前以陽離子交換樹脂的簡易柱層析法應用較廣泛。

㈧ 測定糖基化血紅蛋白的臨床意義是什麼

糖基化血紅蛋白可作為糖尿病患者長期血糖控制的指標。糖基化血紅蛋白的測定目的在於消除波動的血糖對病情控制觀察的影響，因而對血糖波動較大的1型糖尿病患者是一個很有價值的血糖控制指標。對於2型糖尿病也可作為長期血糖的控制指標。若糖基化血紅蛋白＜6%表示血糖控制理想，若＞10%時，說明患者存在著持續性高血糖。

有助於對糖尿病慢性並發症的認識。目前對GHb的研究已遠遠超出在監測糖尿病患者血糖控制上的應用，最近發現血清蛋白、紅細胞膜、細胞內的蛋白及膠原蛋白、角蛋白、眼晶狀體等均有不同程度的糖基化，提示糖尿病的非酶蛋白糖基化並非限於血紅蛋白，而是有全身傾向。國內有資料表明，是否合並糖尿病性微血管病變的糖尿病患者之間平均糖基化血紅蛋白濃度均有顯著性差異。

用於糖尿病的診斷。有研究證明大多數空腹血糖高於正常的糖尿病患者及糖耐量減低的患者糖基化血紅蛋白也增高，故認為糖基化血紅蛋白也可作為糖尿病篩選時應用，但也有認為GHb對診斷糖尿病不是一個敏感指標，不能取代現行的糖耐量試驗和血糖測定。

㈨ 糖基化血紅蛋白的介紹

糖基化血紅蛋白，英文名為Glycosylated hemoglobin or glycated hemoglobin(GHb)，是血紅蛋白的一種形式，用於反映一段時間（4~8周）前的平均血漿葡萄糖濃度。因其中以HA1c含量最多，故有時被縮寫成A1C作其代名詞，糖基化血紅蛋白以非酶糖化形成。血紅蛋白的糖基化可累及到糖尿病患者的腎病和視網膜病變。監測糖基化血紅蛋白有利於Ⅰ型糖尿病患者治療的改善。糖基化血紅蛋白的測定方法，目前以陽離子交換樹脂的簡易柱色譜法應用較廣泛，其它還有高壓液相色譜法、比色法，等電聚焦電泳法和放射免疫法等。