黃酮的薄層檢測方法中國葯典

❶ 總黃酮與單體黃酮的測定方法有什麼不同 高手些，感激啊！

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❷ 黃酮類化合物的含量測定方法哪些

黃酮類化合物的含量測定方法哪些
黃酮類化合物（flavonoids）是一類存在於自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）結構的化合物。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具鹼性，能與強酸成鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃鹼素或黃酮。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結合成苷類，小部分以游離態（苷元）的形式存在。絕大多數植物體內都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發育、開花、結果以及抗菌防病等方面起著重要的作用。
鹽酸-鎂粉還原反應

取葯材粉末少許與試管中，用乙醇或甲醇數毫升溫浸提取，取提取液加鎂粉少許振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2min內即出現顏色。大多黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類顯紅-紫紅色，黃酮類顯橙色，異黃酮及查爾酮類無變化。如蘆丁的鹽酸鎂粉反應中溶液由黃色變紅色。

其他還原反應還有：鹽酸-鋅粉反應，黃酮、黃酮醇類常不顯色，只有二氫黃酮醇類可被鋅粉還原呈深紅色；鈉-汞齊反應，黃酮類成分可產生黃、橙、紅等色；四氫硼鈉（鉀）反應，僅二氫黃酮醇類可被四氫硼鈉還原呈紅色，其他黃酮類不反應。

金屬鹽類試劑絡合反應

黃酮類成分和鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽、鋯鹽等試劑反應，生成有色的絡合物，可供某些類型黃酮的鑒別。產生絡合作用的條件是黃酮類成分必須具備下列條件之一，如5-羥基、3-羥基或鄰二羥基。根據有色絡合物的最大吸收波長，可進行定量測定。常用的試劑有三氯化鋁、醋酸鉛、醋酸鎂與二氯氧化鋯等試劑。

❸ 異黃酮是雌激素,那麼黃酮就是雄激素嗎

一）結構類型
黃酮類化合物 (flavonoids) 是一類存在於自然界的、具有 2- 苯基色原酮 (flavone) 結構的化合物。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具鹼性，能與強酸形成 釒羊 鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃鹼素或黃酮。由黃酮類化合物與糖結合的苷叫做黃酮苷 (flavonoid glycosides) 。目前黃酮類化合物已遠遠超出這個范圍，即凡具有 C 6 -C 3 -C 6 基本骨架的一類化合物被廣義的稱為黃酮類化合物。分子結構中常有 -OH 與 -OCH 3 等取代基。

根據基本結構，黃酮類化合物主要分為黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮、二氫異黃酮、查耳酮、橙酮、花色素、黃烷及雙黃酮類化合物

黃酮類化合物除少數游離外，大多與糖結合成苷。糖基多連在 C 8 或 C 6 位置上，連接的糖有單糖（葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等），雙糖（槐糖、龍膽二糖、芸香糖等），叄糖（龍膽三糖、槐三糖等）與醯化糖（ 2- 乙醯葡萄糖、咖啡醯葡萄糖等）。

天然黃酮類化合物除大多數為 O- 苷外，還發現 C- 苷，如葛根素 (puerarin) 。

（二）理化性質

1. 通性

黃酮類化合物多為結晶性固體，少數為無定形粉末。它的顏色與分子中存在的交叉共軛體系及助色團 (-OH ， -CH 3 等 ) 的類型、數目及取代位置有關。一般來說，黃酮、黃酮醇及其苷類多呈灰黃 - 黃色，查耳酮為黃 - 橙黃色，而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類等因不存在共軛體系或共軛很少，故不顯色。花色苷及其苷元的顏色，因 pH 的不同而變，一般呈紅 (pH<7) 、紫 (pH8.5) 、藍 (pH>8.5) 等顏色。

黃酮苷元一般難溶或不溶於水，易溶於甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機溶劑，易溶於稀鹼液。黃酮類化合物的羥基糖苷化後，水溶性相應加大，而在有機溶劑中的溶解度相應減少。黃酮苷一般易溶於水、甲醇、乙醇、醋酸乙酯、吡啶等溶劑，難溶於乙醚、三氯甲烷、苯等有機溶劑。黃酮類化合物因分子中多有酚羥基而呈酸性，故可溶於鹼性水溶液、吡啶、甲醯胺及二甲基甲醯胺中。有些黃酮類化合物在紫外光 (254nm 或 365nm) 下呈不同顏色的熒光，以氨蒸氣或碳酸鈉溶液處理後熒光更為明顯。多數黃酮類化合物可與鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽或鋯鹽生成有色的絡合物。

2. 鑒別反應

（ 1 ）鹽酸 - 鎂粉還原反應 取生葯粉末少許於試管中，用乙醇或甲醇數毫升溫浸提取，取提取液加鎂粉少許振搖，滴加幾滴濃鹽酸， 1~2min 內即出現顏色。多數黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類顯紅 - 紫紅色，黃酮類呈橙色，異黃酮及查耳酮類無變化。

其它還原反應還有：鹽酸 - 鋅粉反應。黃酮、黃酮醇常不顯色，只有二氫黃酮醇類可被鋅粉還原呈深紅色；鈉汞齊反應，黃酮類成分可產生黃、橙、紅等色；四氫硼鈉 ( 鉀 ) 反應，僅雙氫黃酮醇可以被四氫硼鈉還原呈紅色，其它黃酮類不反應。

（ 2 ）金屬鹽類試劑的絡合反應 黃酮類成分和鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽、鋯鹽等試劑反應，生成有色的絡合物，可供某些類型黃酮的鑒識。產生絡合作用的條件是黃酮類成分必須具備下述條件之一，如 5- 羥基、 3- 羥基或鄰二羥基。

根據有色絡合物的最大吸收波長，可進行定量測定。常用的試劑有三氯化鋁、醋酸鉛、醋酸鎂與二氯氧化鋯等試劑。 ① 與鋁鹽絡合：生葯乙醇或甲醇提取液，加 1% 三氯化鋁甲醇液，黃酮醇、 5- 羥基黃酮與 Al 3+ 絡合顯鮮黃色； ② 與鉛鹽絡合：生葯水提取液，加中性醋酸鉛或鹼式醋酸鉛試劑，可產生黃色、紅色或橙紅色沉澱； ③ 與鎂鹽絡合：生葯乙醇或甲醇提取液，滴於濾紙上，吹乾後噴霧醋酸鎂甲醇試劑，置紫外光下觀察，二氫黃酮及二氫黃酮醇類等顯天藍色熒光，黃酮類、黃酮醇類和異黃酮類等顯黃色、橙色或棕色； ④ 與鋯鹽絡合：生葯乙醇或甲醇提取液，加 2% 二氯氧化鋯 (ZrOCl 2 ) 甲醇液， 5- 羥基黃酮和黃酮醇類顯鮮黃色。顯色後，再加 2% 枸椽酸甲醇液，則 5- 羥基黃酮類可褪色。

此外， 口山 酮 (xanthone) 是結構與性質同黃酮相似的一類化合物。以苷或苷元的形式存在於植物中，它是金絲桃科和龍膽科植物的特徵性成分，石韋、知母、芒果葉中也有存在。

天然的 口山 酮有 C- 苷和 O- 苷。常見的 C- 苷如芒果苷 (mangiferin) 與異芒果苷。 O- 苷僅存在於龍膽科植物中，約有 20 余種，如異龍膽苷 (gentioside) 與獐牙菜苷 (swertionolin) 等。

報春花糖（櫻草花糖）

口山 酮類成分與鹽酸 - 鎂粉反應顯橙黃色，與鹽酸 - 鋅粉反應顯桃紅色。

（三）黃酮類主要定量方法及舉例

黃酮類化合物常可與某些試劑（如硝酸鋁和亞硝酸鈉等）形成穩定的有色絡合物，利用這一性質可以採用可見 - 紫外分光光度法定量分析生葯中總黃酮的含量。常用甲醇提取生葯中的總黃酮，有時也要對樣品進行適當的預處理（如用三氯甲烷脫脂），再用甲醇提取，如《中國葯典》（ 2005 年版）山楂葉中總黃酮的紫外 - 可見分光光度法測定；生葯中單體黃酮可採用薄層掃描法和高效液相色譜法測定，以高效液相色譜法多用。

❹ 總黃酮含量的測定方法，如紫外可見分光光度法 高效液相色譜法，方法的類容詳細點

流動性影響出峰時間、分離度、理論塔板數等，不影響峰面積。 流動相影響總黃酮的保留時間，根據不同的大小，可能提前也可能推後；也影響分離度。 ..

❺ 測定總黃酮含量方法

一 樣品溶液的制備
70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下迴流2h。 取10g樣品放入圓底燒
瓶中加入80ml 70%乙醇溶液迴流2h,抽濾定容至100ml備用。使用時先
離心再用70%乙醇稀釋10倍做樣品溶液。
二 蘆丁標准品的配置
精密稱取蘆丁2mg，加無水乙醇定容至10ml。製得濃度為0.2mg/ml蘆
丁標准品溶液。
三 顯色方法的確定
1 掃描原液 分別取蘆丁溶液和樣品溶液各1ml，加無水乙醇定容至 25ml，空白對照，全波掃描。
2 硝酸鋁顯色法 分別取蘆丁對照品溶液和樣品溶液各5ml，加5%亞硝酸鈉 溶液（1.25g亞硝酸溶於無水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液(4,4014g硝酸鋁.九水溶於無水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml， 搖勻，放置6min，加4%氫氧化鈉試液(2g氫氧化鈉溶於無水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加無水乙醇定容至25ml，搖勻，放置15min， 空白對照，全波掃描 bb 。
3 氯化鋁顯色法 分別取蘆丁對照溶液和樣品溶液各5ml ,加1%的氯化鋁溶液（1g氯化鋁溶於無水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，搖勻放置10min，空白對照，全波掃描。
4 氫氧化鉀顯色法 分別取蘆丁對照品溶液和樣品溶液各5ml，加3ml10%氫氧化鉀溶液（2.5g氫氧化鉀溶於無水乙醇中定容到25ml容量瓶中），充分搖勻顯色5min後，用無水乙醇定容至25ml, 搖勻，空白對照，全波掃描。
四 顯色條件的確定
五 標准曲線的繪制
分別取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml蘆丁對照品溶液，按所選的顯色方法測定
吸光度，繪制標准曲線。

❻ 總黃酮與單體黃酮的測定方法有什麼不同

總黃酮採用蘆丁為標准品即可測定，單體黃酮需要對應的標准品。
黃酮含量的測定方法：
1、 對照法
1）
① 對照品制備：精密稱取蘆丁對照品20.8mg，置於100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解並稀釋至刻度，搖勻。
② 樣品溶液制備
精密稱取樣品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鍾，稱定重量，用70%乙醇補足減失重量，即得。
③ 標准曲線的制備
精密稱取對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置於25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鍾，加1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，加70%乙醇置刻度，搖勻，放置15分鍾。各取10ml置於50ml容量瓶中，用70%乙醇稀釋至刻度。在510nm的波長下測定吸光度。
2）
①樣品溶液的制備：
分別精確稱取80℃恆溫乾燥的樣品用50%甲醇迴流提取，料液比1：15,提取兩次，每次30min，將兩次提取液合並濃縮至一定體積，用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。從其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀釋至刻度，再從100ml容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，為待測樣品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波長的選擇：分別作樣品液Ⅰa、Ⅱa及蘆丁標准品的吸收曲線，均在350 nm 處有一強吸收，因此選擇350 nm為測定波長。
③標准曲線的制定：
精密稱取蘆丁對照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解後，轉移至50ml容量瓶，用蒸餾水定容至刻度。分別精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml蘆丁溶液置於100ml容量瓶中，於350 nm 波長處測定吸光值，以蘆丁空白為參比，以蘆丁濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標繪制標准曲線，提示在4.12～12.36mg／103ml濃度之間，吸光度值與濃度呈現良好的線性關系。
④含量測定結果：
分別吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待測樣品液各適量於石英比色池中，按標准蘆丁一吸光度測定法，以樣液空白參比，於350nm 波長下測定吸光值，計算各提取液中總黃酮含量。
計算公式為:樣品總黃酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式為通過回歸方程轉化而來，式中A為測得樣品液的吸光度值，W為稱樣量。

❼ 薄層色譜法用於雜質檢查常用的方法有哪些

薄層色譜法用於雜質檢查常用的方法有雜質對照法，供試品對照法，對照葯物法，顯色劑。

薄層色譜，或稱薄層層析(thin—layer chromatography)，是以塗布於支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動相，對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術。

這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物鹼及其他多種物質的特別有效的層析方法，從50年代發展起來至今，仍被廣泛採用。

(7)黃酮的薄層檢測方法中國葯典擴展閱讀：

一、基本原理

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發生吸附現象。

物質分子之所以能在固體表面停留，這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。

而處於固體表面的分子所受的力是不對稱的，向內的一面受到固體內部分子的作用力大，而表面層所受的作用力小，因而氣體或溶質分子在運動中遇到固體表面時受到這種剩餘力的影響，就會被吸引而停留下來。

吸附過程是可逆的，被吸附物在一定條件下可以解吸出來。在單位時間內被吸附於吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時間內離開此表面的分子之間可以建立動態平衡，稱為吸附平衡。吸附層析過程就是不斷地產生平衡與不平衡、吸附與解吸的動態平衡過程。

二、相關應用

1、葯物和葯物代謝

薄層色譜法在合成葯物和天然葯物中的應用很廣。有些文獻和內容偏重於合成葯物、化合物及其代謝產物，有文獻為在中草葯分析中的應用。

每一類葯物，例如磺胺、巴比妥、苯駢噻嗪、甾體激素、抗菌素、生物鹼、強心甙、黃酮、揮發油和萜等，都包括幾種或十幾種化學結構和性質非常相似的化合物，可以在上述文獻中找出一、二種全盤的展開劑，一次即能把每一類的多種化合物很好地分開。

葯物代謝產物的樣品一般先經預處理後用薄層分析，應用也很廣，但有時因含量甚微，不用採用氣相和高效液相色譜法靈敏。

2、化學和化工

化工和化學方面的有機原料和產品都可用薄層色譜法分析。例如含各種功能基的有機物，石油產品，塑料單體，橡膠裂解產物，油漆原料，合成洗滌劑等，內容非常廣泛。

3、醫學和臨床

薄層色譜法的應用還滲透到醫學和臨床中去，例如它是一種快速的診斷方法可用於妊娠的早期診斷。

方法是基於在孕婦的尿中能檢出比未媳婦婦女的尿中含更多的孕二醇，把兩者的尿提取後點在薄層上比較，即可作出判斷。這一方法可不用動物而在2~3小時內化驗出結果。

❽ 葯典 總黃酮測定方法樣品空白和標准曲線空白的問題

用移液管量取5 mL蘆丁標准應用液置於25 mL容量瓶中，加入10％的NaNO2溶液1mL，搖勻後放置6 min，加入10％的Al(NO3)3溶液1mL，搖勻後放置6 min，再加入1 mol／L的NaOH溶液10mL，加30％的乙醇至刻度，混勻。靜置15min。以不加蘆丁標准應用液的試管作為空白試劑，在360—600nm波長的范圍內測定吸光度，選擇吸光度值最大時的波長為蘆丁標樣的最大特徵吸收波長。結果表明，在510nm處標樣吸光度最大，故510nm為最大特徵吸收波長。
亞硝酸鈉-硝酸鋁比色法[11]繪制標准曲線，做標准方程。
分別移取蘆丁標准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0mL於25 mL容量瓶中，補加濃度30％乙醇至12.5mL，加入1 mL濃度5％NaNO2，6 min後加入1 mL濃度為10％Al(NO3)3，6 min後加10mL濃度1 mol／L NaOH，用濃度30％乙醇定容，搖勻，15 min後於510 nm處以試劑空白為參比，測定吸光度。以濃度—吸光度進行回歸，繪制標准曲線，求得回歸方程。
(這個是我本科學位論文的一部分，空白就是上文那個移取蘆丁標准溶液0.0的。也不一定非要按照這個一樣，各種葯品濃度和取量可以根據實際情況調節)

❾ 如何用薄層色譜鑒別黃酮拜託了各位 謝謝

摘 要 目的 探討鑒別廣金錢草黃酮和生物鹼成分的方法。方法 應用薄層色譜法鑒別廣金錢草黃酮和生物鹼成分，黃酮採用ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液顯色，生物鹼採用稀碘化鉍鉀試液顯色。結果與結論 以薄層色譜鑒別廣金錢草黃酮和生物鹼成分，不同於一般化學鑒別（試管法），其分離效果較好，專屬性強，具有實際參考價值。 關鍵詞 廣金錢草；薄層色譜鑒別；黃酮；生物鹼 廣金錢草是豆科植物廣金錢草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr. 的乾燥地上部分，為較常用中葯［1，2］。中國葯典2000年版收載有「清熱除濕，利尿通淋」的作用［1］。對廣金錢草的鑒別，文獻主要介紹性狀鑒別、顯微鑒別及一般的化學鑒別（試管法） ［1，3］。本文以薄層色譜法鑒別廣金錢草中的黃酮和生物鹼成分，報道如下。 1 儀器及試劑 1.1 儀器 20 cm×10 cm雙槽展開缸。 1.2 試劑 薄層層析硅膠G(化學純)，GF254(化學純)，青島海洋化工廠產品。 層析氧化鋁（鹼性），100～200目，上海社園精細有限公司產品。羧甲基纖維素鈉，上海化學試劑分裝，黏度2%水溶液為300～800 mPa/s。其餘試劑均為分析純。 2 供試品及對照葯材 2.1 廣金錢草葯材購自采芝林葯店北京路分店，經廣東葯學院葯用植物與生葯學教研室鑒定為豆科廣金錢草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr.（中國葯典2000年版一部）的全草。 2.2 廣金錢草對照葯材由廣東省葯品檢驗所中葯室提供。 3 廣金錢草黃酮薄層色譜鑒別［2］ 取廣金錢草粉末1 g，置圓底瓶中，加甲醇20 mL，加熱迴流1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，濾過，濾液用醋酸乙酯提取2次，每次10 mL，合並醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取廣金錢草對照葯材1 g，同法製成對照葯材溶液。照薄層色譜法（中國葯典2000版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各10 μL，分別點於同一以ρ=0.3%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以ψ(醋酸乙酯∶甲酸∶水)=（8∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液［4,5］， 105 ℃加熱約5 min，置紫外光燈（365 nm）下檢視［6］，供試品色譜中，在與對照葯材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。見圖1。 4 廣金錢草生物鹼薄層色譜鑒別 取廣金錢草粉末1 g，置圓底瓶中，加濃氨溶液5 mL［6］，密塞，搖勻，放置30 min，加氯仿50 mL，加熱迴流2 h，取出放冷，分取氯仿液，葯渣再用氯仿適量洗滌，合並氯仿液，用無水硫酸鈉脫水，置水浴上蒸至約1 mL，加於鹼性氧化鋁柱（5 g，直徑15 mm）上，用ψ(氯仿∶無水乙醇)=（1∶1）混合溶液50 mL洗脫［6］，收集洗脫液，置水浴上蒸至約1 mL，作為供試品溶液。另取廣金錢草對照葯材1 g，同法製成對照葯材溶液。照薄層色譜法（中國葯典2000版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各4 μL，分別點於同一以ρ=3%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以ψ(苯∶丙酮∶甲醇)=（8∶3∶0.5）為展開劑，另槽用等量的濃氨溶液預平衡15 min，展開，取出，晾乾。置254 nm下檢視，供試品色譜中，在與對照葯材色譜相應的位置上，顯相同的暗斑點；噴以稀碘化鉍鉀試液［6,8］，供試品色譜中，在與對照葯材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

希望採納