Ⅰ 百度提問
【什麼是卵巢囊腫】
卵巢囊腫屬廣義上的卵巢腫瘤的一種,各種年齡均可患病,但以 20-50 歲最多見。卵巢惡性腫瘤由於患病期很少有病,因此早期診斷困難,就診時 70 %已屬晚期,很少能得到早期治療, 5 年生存率始終徘徊在 20-30 %,是威脅婦女生命最嚴重惡性腫瘤之一,卵巢是人體中較小的器官,但為多種多樣腫瘤的好發部位,卵巢腫瘤可以有各種不同的性質和形態--單一型或混合型、一側性或雙側性、囊性或實質性、良性或惡性,並有不少卵巢腫瘤能產生婦性或男性的性激素。
[編輯本段]【卵巢囊腫是怎麼造成的】
長期的飲食結構,生活習慣不好、心理壓力過大等因素造成體質過度酸化,人體整體的機能下降,引起腎虛,肝腎同源,腎卵巢囊腫病理虛肝亦虛,進而引起下焦代謝循環變慢,造成卵巢疾病和內分泌失調,免疫功能下降,從而發展為卵巢組織異常增生,終致卵巢囊腫,甚至癌變。
身體組織液酸化,身體細胞處於酸性體液中,進而形成身體正常細胞溶氧量下降,造成細胞的活性下降,代謝循環減慢,下降到正常值的65%時,正常細胞就無法生存,但也有不惜改變染色體採取主動變異的細胞,細胞的表型發生改變,腫瘤性狀得以表達,這些細胞迅速擴增,從而形成真正的腫瘤實體。
另外,還有因體質酸化身體發生其他組織的癌變,又因身體機能下降,身體組織液酸化,造成了卵巢囊腫。
[編輯本段]【多囊卵巢綜合征】
多囊卵巢綜合征是一種常見的女性內分泌疾病,是導致生育期女性月經紊亂的最常見的原因之一。患此症的女性多有較明顯的自覺症狀,如:月經失調(多為月經稀發或閉經)、不孕、多毛、痤瘡、肥胖、黑棘皮症(陰唇、頸背部、腋下、乳房下等處皮膚出現色素沉著,對稱,皮膚增厚而柔軟)。因此多能自覺就診。由於PCOS異常的內分泌環境,還易發生2型糖尿病』>糖尿病、妊娠期糖尿病』>糖尿病(GDM)、糖耐量減低、高脂血症、高血壓、血液高凝狀態和冠心病等代謝綜合征。所以認為多囊卵巢綜合征是一種復雜的多系統綜合征。
多囊卵巢綜合征的病因尚不清楚,目前僅有一些假說。由於其病因不清,治療也多以對症為主,主要有以下幾個方面的治療:
1、 控制體重
嚴格限制熱量的攝入和長期堅持體育鍛煉。部分病人可能恢復排卵及生育功能。
2、調節月經周期
對於青春期和沒有生育要求的患者,可以選擇口服避孕葯(目前常用的有媽富隆和達英-35),用葯後可以使月經規則,改善痤瘡及多毛。連續應用3個周期後可以明顯改善性激素紊亂,從而調整月經周期。
3、促排卵治療
促排卵治療適用於有生育要求的患者,克羅米芬,促性腺激素,二甲雙胍手術治療 腹腔鏡下卵巢打孔術,超聲引導下經陰道未成熟卵泡穿刺術,經陰道超聲引導卵巢間質水凝術等
[編輯本段]【卵巢早衰是怎麼回事】
卵巢早衰不代表整個機體的衰老
卵巢功能早衰對女性機體的影響確實是明顯的,由於性激素過早地撤退,可導致月經紊亂、閉經、絕經期提前來臨,出現一些本該發生在更年期的代謝紊亂。但是,卵巢功能早衰並不一定意味著人整個機體的衰老。科學研究認為,即使是進入更年期月經停止後,女性全身調節系統會做出積極的變化,進入一種新的平衡狀態,從而確保全身其他系統的正常運轉。
關鍵是卵巢功能衰減者要正視現實,擺脫精神上的壓力,調整好心態,注意自我保健。另外出現了卵巢早衰,應及時用葯物治療。「卵巢保養」目前沒有醫學根據目前一些美容院(科)推出了所謂的「卵巢保養」,是用一種從植物里提煉的「香精油」在女性小腹上進行按摩,並刺激一些穴位的療法
正常婦女卵巢功能在45歲至50歲左右時才開始衰退,如果在40歲以前出現衰退跡象,醫學上稱之為卵巢功能早衰。這種女性常伴有閉經或少經。
引起卵巢早衰可能與精神壓力過大有關
引起卵巢早衰的原因有很多,最大的因素可能與現代女性精神壓力過大有關。卵巢功能早衰的特點是卵巢對正常的促性腺激素不能做出正常反應,出現了體內促性腺激素水平很高,而卵巢產生的雌激素水平很低的現象。並非過早出現閉經、少經都是卵巢早衰。要確診卵巢早衰需要做內分泌檢查,卵巢早衰會出現促黃體素、促卵泡激素增高,性激素降低。
[編輯本段]【卵巢囊腫早期症狀】
卵巢囊腫在臨床上多表現有小腹疼痛,小腹不適,白帶增多,白帶色黃,白帶異味,月經失常,而且通常小腹內有一個堅實而無痛的腫快,有時性交會發生疼痛。當囊腫影響到激素生產時,可能出現諸如陰道不規則出血或毛體增多等症狀。囊腫而發生扭轉,則有嚴重腹痛腹帳、呼吸困難、食慾降低、惡心及發熱等。較大的囊腫會對膀胱附近造成壓迫,引起尿頻和排尿困難。尤其當這些症狀比較嚴重、出血頻繁且同時出現時,女性患卵巢囊腫的可能性更高,病變惡性卵巢癌的危害就更大。
[編輯本段]【卵巢囊腫的臨床表現】
卵巢囊腫在早期並無明顯的臨床表現患者往往因其他疾病就醫在行婦科檢查時才被發現以後隨著腫瘤的生長患者有所感覺其症狀與體征因腫瘤的性質大小發展有無繼發變性或並發症而不同
1、下腹不適感 為患者未觸及下腹腫塊前的最初症狀由於腫瘤本身的重量以及受腸蠕動及體位變動的影響使腫瘤在盆腔內移動牽扯其蒂及骨盆漏斗韌帶以致患者有下腹或骼窩部充脹下墜感
2、腹圍增粗腹內腫物 是主訴中最常有的現象患者覺察自己的衣服或腰帶顯得緊小方才注意到腹部增大或在晨間偶然感覺因而自己按腹部而發現腹內有腫物加之腹脹不適
3、腹痛 如腫瘤無並發症極少疼痛因此卵巢瘤患者感覺腹痛尤其突然發生者多系瘤蒂發生扭轉偶或為腫瘤破裂出血或感染所致此外惡性囊腫多引起腹痛腿痛疼痛往往使患者以急症就診
4、月經紊亂 一般卵巢甚至雙側卵巢囊腫由於並不破壞所有的正常卵巢組織故多半不引起月經紊亂有的子宮出血並不屬於內分泌性或因卵巢瘤使盆腔的血管分布改變引起子宮內膜充血而起;或由於卵巢惡性腫瘤直接轉移至子宮內膜所致因內分泌性腫瘤所發生的月經紊亂常合並其他分泌影響
5、壓迫症狀 巨大的卵巢腫瘤可因壓迫橫膈而引起呼吸困難及心悸卵巢腫瘤合並大量腹水者也可引起此種症狀;但有的卵巢腫瘤患者的呼吸困難系由一側或雙側胸腔積液所致;並且往往合並腹水形成所謂 M eigs 綜合症
巨大的良性卵巢囊腫充盈整個腹腔使腹腔內壓增加影響下肢靜脈迴流可導致腹壁及雙側下肢水腫;而固定於盆腔的惡性卵巢囊腫壓迫髂靜脈往往引起一側下肢水腫,盆腹腔臟器受壓發生排尿困難尿瀦留便急或大便不暢等現象,主要表現在以下幾方面:
(1)、腹內腫塊 中等大以下的腹內腫塊如無並發症或惡變其最大特點為可動性往往能自盆腔推移至腹腔 腫塊一般無觸痛但如有並發症或惡變則不僅腫塊本身有壓痛甚至出現腹膜刺激症狀
(2)、腹水征 腹水存在常為惡性腫瘤的特徵但良性囊腫如卵巢纖維瘤及乳頭狀囊腺瘤亦可產生腹水 內分泌症狀 如多毛聲音變粗陰蒂肥大等為男性化囊腫
(3)、惡病質 其特徵是腹部極度膨大顯著消瘦痛苦的面部表情及嚴重衰竭
臨床上對於卵巢瘤的診斷應達到4個要求:(1)是否卵巢腫瘤;(2)是何種卵巢腫瘤;(3)有無並發症;(4)何側生長
[編輯本段]【卵巢囊腫導致不孕】
卵巢是卵子發育、成熟、排出的場所,而各個不同階段的卵泡在卵巢皮質,若卵巢遭受到破壞,使卵子發育、成熟及排出受損,就會導致不孕。卵巢囊腫屬於卵巢腫瘤的一種,其引起不孕的機制與干擾排卵功能有關。某些含有內分泌功能的卵巢囊腫,如卵巢甲狀腺瘤、卵巢顆粒—卵泡膜細胞瘤、睾丸母細胞瘤等,可因其所含腫瘤組織成分不同而產生某些相應激素,從而干擾了卵巢激素的正常分泌和排卵,出現閉經,子宮出血,多毛和不孕等症狀。
[編輯本段]【如何預防卵巢囊腫】
研究表明:
1、腫瘤不能在弱鹼性的人體中形成;
2、腫瘤只能在酸性身體中形成;
3、如果你有腫瘤,說明身體是酸性的;
4、 腫瘤只能在一個酸性的身體擴展;
5、 如果你的身體變弱鹼性,腫瘤不能擴展;
6、 如果你能平衡你的身體PH值,讓你的身體轉變成弱鹼性,不管你得的是什麼腫瘤都有轉變和被治好;
7、不管你的情況多麼糟糕,哪怕只能活6個月,如果你能轉變你的身體PH值到弱鹼性,你的腫瘤就不會擴展,就會好;
8 、不用擔心你的家族中你的媽媽、爸爸或任何人有腫瘤,只要你的身體是弱鹼性的,你不會得,如果你已經有了,它將會轉變;
9、 腫瘤都是酸性體液中生存的,沒別的。如果你的身體是酸的,你就會得腫瘤。如果是弱鹼的,你就不會得腫瘤。如果你已有了腫瘤,只要你能調整你身體的PH值到弱鹼性,腫瘤就會離你而去。
預防腫瘤的秘訣十分簡單,就是常吃鹼性食物以防止酸性廢物的累積,因為酸化的體液環境,是正常細胞癌變的肥沃土壤,調整體液酸鹼平衡,是預防癌症的有效途徑。
1) 養成良好的生活習慣,戒煙限酒。吸煙,世界衛生組織預言,如果人們都不再吸煙,5年之後,世界上的癌症將減少1/3;其次,不酗酒。煙和酒是極酸的酸性物質,長期吸煙喝酒的人,極易導致酸性體質。
2) 不要過多地吃咸而辣的食物,不吃過熱、過冷、過期及變質的食物;年老體弱或有某種疾病遺傳基因者酌情吃一些防癌食品和含鹼量高的鹼性食品,保持良好的精神狀態。
3) 有良好的心態應對壓力,勞逸結合,不要過度疲勞。可見壓力是重要的癌症誘因,中醫認為壓力導致過勞體虛從而引起免疫功能下降、內分泌失調,體內代謝紊亂,導致體內酸性物質的沉積;壓力也可導致精神緊張引起氣滯血淤、毒火內陷等。
4) 加強體育鍛煉,增強體質,多在陽光下運動,多出汗可將體內酸性物質隨汗液排出體外,避免形成酸性體質。
5) 生活要規律,生活習慣不規律的人,如徹夜唱卡拉OK、打麻將、夜不歸宿等生活無規律,都會加重體質酸化,容易患癌症。應當養成良好的生活習慣,從而保持弱鹼性體質,使各種癌症疾病遠離自己。
6) 不要食用被污染的食物,如被污染的水,農作物,家禽魚蛋,發霉的食品等,要吃一些綠色有機食品,要防止病從口入。
[編輯本段]【卵巢囊腫的診斷及治療】
在日常生活中,定期去體檢,時常注意自己的身體有無卵巢囊腫的徵兆,如果有一些反應就要弄清楚到底是什麼原因造成的不適。要確診是不是卵巢囊腫需要到醫院去做具體的檢查,看自己的血檢指標,CEA,CA125,做核磁共振等檢查確診。
如果確診是卵巢囊腫,首先不要慌,一定要根據具體的情況做判斷應該如何治療,進行多方面的咨詢。隨著卵巢囊腫早期診斷方法的出現,治療技術及術後綜合治療的日趨成熟,一般的卵巢囊腫不易做手術,建議保守治療,進行食療。
[編輯本段]治療:卵巢囊腫應該如何治療?
卵巢囊腫是卵巢囊性腫塊的統稱,它對於身體的危害以及對它的治療,取決於它的性質。
一般來說,如囊腫直徑小於5厘米,又無證據提示腫瘤的話,多為功能性囊腫,可以密切隨訪,即2-3個月檢查一次,以後再根據情況調整檢查間隔時間;
若囊腫直徑大於5厘米,則多為卵巢腫瘤,一般需要手術治療;
如果同時伴有進行性加重的痛經及性交痛、盆腔有觸痛性結節,則應考慮子宮內膜異位症(即巧克力囊腫)。可根據具體情況,採取不同的治療。
[編輯本段]【中醫學對卵巢囊腫的看法】
中醫學認為,引起卵巢囊腫主要有以下諸因素。
1、痰瘀凝結,憂思傷;虛生痰,痰飲停聚而阻滯氣機,引起氣滯血瘀、痰飲與血瘀結成塊。痰瘀久積也可導致癌症。除有上述氣血凝滯的症狀外,患者常有胃脘滿悶、心慌、氣短、納差,浮腫、嘔惡、筋惕肉、腹圍增粗、月經紊亂,排尿困難,便急或大便不暢、下腹或窩部充脹,有下墜感等現象。
2、氣血凝滯期或產後受寒,寒凝血滯。或內傷情志,抑鬱傷肝,氣機運行不暢,氣滯血也滯,氣血瘀凝而致。若瘀積日久變成癌症。表現為除下腹部有腫塊外,一般無明顯症狀或僅見舌有瘀點。如為惡性者,下腹部腫塊堅硬固定,疼痛拒按,皮膚不潤面色紫;,舌有瘀點。惡性晚期患者可有腹水,形;枯槁,神疲乏力等症。
[編輯本段]【現代治療卵巢囊腫的方法】
日前,國內外對卵巢囊腫的治療多採用手術,化療、放療等,但大多難以治癒,惡性腫瘤病程短,發展快,根據惡性程度高低手術切除的多少或放化療的敏感度,復發有早有晚,手術後瘤體還會再復發、再生長因此大部分患者手術後仍然會再復發。
目前,中醫治療卵巢囊腫已經獲得一定突破,大部分9CM以下普通液性囊腫,只需一月即治癒,巧克力性的卵巢囊腫也只需三月左右!
[編輯本段]【食療法治療卵巢囊腫】
今天我們治療卵巢囊腫所採取的方法手術和化療為什麼沒有真正的治癒癌症,減輕患者的痛苦呢,人們最終沒有得到康復的真正原因就是體液是酸化的,酸性體液不改變卵巢囊腫也就不會死亡,這就是因為做了手術和化療後卵巢囊腫再度轉移和復發的原因。要治療卵巢囊腫還得從改善自身的體質開始,從源頭上餓死變異細胞。多吃鹼性食品,改善自身的酸性體質,同時補充人體必須的有機營養物質,這樣才能在餓死變異細胞的同時,恢復自身的免疫力。
[編輯本段]【常見的酸性食物與鹼性食物】
1、強酸性食品:蛋黃、乳酪、白糖做的西點或柿子、烏魚子、柴魚等。
2、中酸性食品:火腿、培根、雞肉、鮪魚、豬肉、鰻魚、牛肉、麵包、小麥、奶油、馬肉
等。
3、弱酸性食品:白米、落花生、啤酒、酒、油炸豆腐、海苔、文蛤、章魚,泥鰍。
4、弱鹼性食品:紅豆、蘿卜、蘋果、甘藍菜、 洋蔥、豆腐等。
5、中鹼性食品:蘿卜干、大豆、紅蘿卜、蕃茄、 香蕉、橘子、番瓜、草莓、蛋白、梅干、檸檬、菠菜等。
6、強鹼性食品:恰瑪古、葡萄、茶葉、海帶芽、海帶,檸檬等。
[編輯本段]【卵巢囊腫的飲食宜與忌】
【宜】�
1、宜多吃具有抗腫瘤作用的食物:鱟、海馬、鱉、龍珠茶、山楂。
2、出血宜吃羊血、螺獅、淡菜、烏賊、薺菜、藕、蘑菇、馬蘭頭、石耳、榧子、柿餅。
3、感染宜吃鰻魚、文蛤、水蛇、針魚、鯉魚、麒麟菜、芹菜、芝麻、蕎麥、油菜、香椿、赤豆、綠豆。
4、腹痛、腹脹宜吃豬腰、楊梅、山楂、橘餅、核桃、栗子。
【忌】
1、忌煙、酒。
2、忌蔥、蒜、椒、桂皮等刺激性食物。
3、忌肥膩、油煎、霉變、腌制食物。
4、忌羊肉、狗肉、韭菜、胡椒等溫熱動血食物。
卵巢囊腫注意事項
1、發現卵巢腫瘤生長速度較快者,為手術指征。
2、突然下腹部陣發性絞痛,婦檢或B超提示卵巢腫瘤扭轉者,也應及時手術或保守治療。
3、發現惡性卵巢腫瘤者,應先予手術,術後予以中西葯綜合治療。
4、患者化療期間身體較虛弱,容易感冒或受細菌感染,因此中醫治療至關重要。
卵巢囊腫類型
目前多數採用按組織發生、組織形態的分類方法。
1、 普通上皮性囊腫
2、性索間質性囊腫
3、生殖細胞囊腫
[編輯本段]【卵巢囊腫分幾類】
大致上卵巢囊腫的種類可分為下列幾種:
1、功能性囊腫:這是最常見的囊腫。發生在排卵周期的育齡婦女,異常量的液體聚集在濾泡內或黃體內,形成濾泡囊腫或黃體囊腫。這種功能性囊腫有時會很大,但不管用葯與否,通常會在三個月內自行消失。
2、出血性囊腫:有時濾泡囊腫及黃體囊腫生長過速,造成卵巢的組織牽扯而裂開流血。這些血液因沒有出口出去而積在卵巢里,就稱為出血性囊腫。這種囊腫一般會自行消失但所需時間較長。如果身體不適的現象較為明顯,則可服葯減緩症狀。只有在少數的情況下,病人呈現較嚴重症狀時才需要開刀切除。
3、漿液性上皮囊腫及黏液性上皮囊腫:在觀察三個月後,仍然存在的囊腫有可能是屬於上皮卵巢囊腫,而非功能性囊腫。這是因為具有分泌功能的漿液細胞及黏液細胞在排卵後被包埋在卵巢內,不斷的分泌液體形成囊腫。這種囊腫是不會消失的,需要開刀切除。
4、巧克力囊腫(子宮內膜異位瘤):是指子宮內膜異位症長在卵巢內,在卵巢內形成大量黏稠咖啡色像巧克力狀的液體。因為子宮內膜異位瘤會隨著時間增加而變大,漸漸侵蝕正常的組織,造成卵巢組織不可逆的損害。經過評估其嚴重性後,可能需要開刀處理。
5、畸胎瘤:這是一種很特別的囊腫,可能是在胚胎時期的細胞分化上出了問題, 經過很久的時間才表現出來。它會在卵巢內生成毛發、牙齒還有一些油脂類的聚集。由於畸胎瘤本身不會自行消失,而且還有可能不斷的成長, 另有15% 機率會造成卵巢扭轉,所以最好及早切除。一般來說惡性的比率小於千分之一。
6、卵巢癌:罹患卵巢癌的機率相當低,但因為位於骨盆腔內,並不容易早期發現。
卵巢的惡性腫瘤,種類繁多,其預後情形皆不相同。一般來說,中老年女性較容易得到上皮細胞癌,此種癌症復發機率較高,預後較差。
【超聲介入治療卵巢囊腫】
超聲介入療法是一種治療各類囊腫、肌瘤的先進醫療辦法,是在超聲引導下直接穿刺到病變組織,注入葯物,使病變組織迅速脫水、變性壞死、萎縮纖維化的方法,其特點有:
1、顯示病灶准確。實時超聲監測可以准確顯示病灶的精確部位,找到最佳進針點,確定進針的部位、角度、方向和深度,同時顯示人體不同解剖層次,保證不刺破重要器官、血管和膽道,最大限度減少穿刺的危險性。
2、操作簡便、迅速。超聲引導下既簡便,又迅速,在門診、在病人床邊均可進行,給病人提供很大方便。
3、治療效果明顯。超聲介入治療各類囊腫,不需開腹,在超聲的引導下,精確定位,採用進口穿刺針從腹部進針,穿刺囊腫,抽出囊液,注入特效葯物,使囊腫萎縮、消失,單純無分隔囊腫可一次性治癒,並有效避免了腹腔粘連的發生,也不必擔心手術時因剝離而破裂,避免復發。
4、患者組織損傷小、痛苦少。18G進口細針穿刺,針眼不足1毫米,無創傷,不痛苦,不影響正常工作和生活,隨治隨走。
5、費用低廉。CT、核磁、同位素引導介入,費用均比較昂貴,需要重復檢查患者費用更高;超聲介入療法比起手術、長期葯物治療的費用而言相對較低,患者能在花費較少的醫療費用就能獲得一次性治療不反復的最佳效果。
6、無放射性損傷。無論是X引導,CT引導還是磁共振引導,病人均會或多或少地受到放射污染或核污染,而超聲介入治療囊腫肌瘤,在超聲引導下,避免了多次的放射污染或核污染。
【腹腔鏡治療卵巢囊腫】
近年來腹腔鏡技術日趨成熟,廣泛應用於婦產科領域,使卵巢囊腫的治療也從「巨創」走向「微創」。因其具有手術創傷小、出血少、手術時間短、術後恢復快、住院時間短、 腹部幾乎不留瘢痕、盆腔粘連少、輸卵管阻塞輕微,更易於保留輸卵管。組織凝固創面可以防止纖維素的滲出、沉積、明顯提高患者手術後的生活質量。深受廣大患者歡迎。
卵巢囊腫與相似疾病的區別】
如何才能明確的診斷與治療出呢?應該注意與以下疾病進行鑒別:
1、卵巢瘤樣病變:濾泡囊腫和黃體囊腫最常見。多為單側,直徑小於5cm,壁薄,2個月內自行消失。
2、輸卵管卵巢囊腫:為炎性囊塊,常有不孕或盆腔感染史,兩側附件區形成囊性塊物,邊界清或不清,活動受限。
3、子宮肌瘤:漿膜下肌瘤或肌瘤囊性變易與卵巢實質性腫瘤或囊腫相混淆。肌瘤常為多發性,與子宮相連,並伴月經異常如月經過多等症狀,檢查時腫瘤隨宮體及宮頸移動。
4、妊娠子宮:妊娠早期,三合診時宮體與宮頸似不相連,易將柔軟的宮體誤認為卵巢腫瘤。但妊娠婦女有停經史,若能詳細詢問病史,作HCG測定或B型超聲檢查可鑒別。
5、腹水:大量腹水應與巨大卵巢囊腫鑒別,腹水常有肝病、心臟病史,平卧時腹部兩側突出如蛙腹,叩診腹部中間鼓音,兩側實音,移動性濁音陽性;巨大囊腫平卧時腹部中間隆起,叩診濁音,腹部兩側鼓音,移動性濁音陰性;下腹塊物邊界清楚,B型超聲檢查可以鑒別
為什麼會得卵巢囊腫】
卵巢囊腫是指卵巢內有囊性的腫物形成,可分為腫瘤性和非腫瘤性兩類。腫瘤性囊腫即為卵巢腫瘤,非腫瘤性囊腫包括卵巢的功能性囊腫以及子宮內膜異位囊腫。生育年齡的婦女最容易發生的卵巢囊腫是卵巢的功能性囊腫,它是由於卵巢本身或葯物刺激造成的過度生理性反應所致。卵巢囊腫患者一般沒有任何症狀,少數人可能會有月經失調,多因其它原因就醫檢查時意外發現。卵巢囊腫西醫多採用手術治療的辦法,我院特效中醫中葯治療卵巢囊腫有特效,經過長期實踐及無數患者驗證。
Ⅱ Th細胞的Th細胞胞外細胞檢測
胞外細胞因子的檢測:主要檢測血漿(血清)和其他本液中的細胞因子,血漿(血清)中細胞因子的測定。可確切反應細胞因子的表達狀態,某些體液標本如腦脊液、滑膜組織液、支氣管灌洗液、胸腹水等與特定疾病直接相關。 流式細胞術(flow cytometery,FCM)其基本原理是:用刺激劑PMA、ionomycin(離子黴素)體外激活淋巴細胞,用蛋白轉運抑制如黃能黴素(monensin)阻止細胞因子分泌到細胞外,細胞內蛋白質轉運方式被打亂,引起細胞因子向高爾基體積聚,用流式細胞儀便可測出增強細胞因子。這一技術的發展使得以往通過T細胞克隆方式在幾個月才能回答的問題,在幾個小時內就能得以解決。該技術成為單細胞水平上檢測細胞因子產生的標准分析方法,盡管細胞因子標記流式細胞技術具有其他方法無可比擬的優越性,但是在操作過程中,需要對細胞進行刺激、阻斷、固定、穿透和標記,任何一個環節都會影響實驗結果[8]。流式細胞儀法常用檢測指標為以CD4設門進行FCM分析。通過CD4+ 細胞中IFN-γ和IL-4的表達來確定TH1/ TH2細胞的百分率[9-10]。以CD3/CD8設門,用FCM檢測分析TH1/ TH2細胞的表達率,結果准確可靠,操作方便快捷,是檢測TH1/ TH2細胞較理想的方法[11-12]。近年來發現CD4+T細胞向不同的方向極化,細胞表面表達不同趨化因子受體(chemokine receptor),趨化因子受體CCR5主要表達於TH1細胞表面,是TH1細胞的特異性標記[14],因此,利用針對趨化因子受體的特異性單克隆抗體來測定TH不同亞群特異笥較高,而且操作較簡單。CCR5和CCR3抗體是最近開發出來的,但只能反映TH細胞數量上的變化,其與功能(細胞因子分泌)的變化不否一致,有待進一步的研究。
Ⅲ 簡述檢測蛋白質磷酸化的檢測方法及其原理
方法及原理:
1.激酶活性分析
生物學樣品中的激酶活性通常是在體外測定的,在ATP的存在下將免疫沉澱的激酶與外源底物共同孵育。之後通過一些報告系統來評估特定激酶對底物的磷酸化,包括顯色、放射性或熒光檢測。
直接測定蛋白磷酸化的一種經典方法是將整個細胞與放射性標記的32P-磷酸鹽共同孵育,獲得細胞提取物,通過SDS-PAGE分離,並曝光在膠片上。這種繁瑣的方法需要多次幾小時的孵育,且使用放射性同位素。其他傳統方法包括2D凝膠電泳,這種技術假定磷酸化會改變蛋白的遷移率和等電點。
2.WesternBlot
利用SDS-PAGE分離生物樣品,隨後轉移到膜上(通常是PVDF或尼龍膜),之後利用磷酸化特異的抗體來鑒定目的蛋白。
由於測得的磷酸化蛋白水平可能隨處理或凝膠上樣誤差而變化,研究人員常常利用一個抗體來檢測同源蛋白的總水平(而不考慮磷酸化狀態),以確定磷酸化組分相對於總組分的比例,並充當上樣內對照。化學發光和顯色法都很常用,而分子量marker常用來提供蛋白分子量的信息。
3.酶聯免疫吸附分析(ELISA)
ELISA的定量能力優於Westernblot,且在調節激酶活性和功能的研究中表現出巨大的作用。這種微孔板形式的分析一般利用目的蛋白特異的捕獲抗體,與磷酸化狀態無關。隨後讓目的蛋白結合在抗體包被的分析板中,目的蛋白可以是純的,也可以是復雜的異質樣品(如細胞裂解液)中的一個組分。加入待分析的磷酸化位點特異的檢測抗體。這些分析通常設計為顯色或熒光檢測。
4.基於細胞的ELISA
來自目的蛋白的信號可通過第二種蛋白來標准化,校正各孔之間的差異,實現磷酸化蛋白水平的准確評估,並比較多個樣品,與傳統免疫印跡中使用磷酸化特異和總蛋白抗體相似。這些分析繞過了制備細胞裂解液的需要,因此更適合高通量分析。
5.質譜
首先,磷酸化肽段的信號通常較弱,因為它們帶負電荷,而電噴霧質譜在正電模式下作用,因此電離效果不好。其次,在大量非磷酸化蛋白的高背景之下,很難觀察到低豐度目的蛋白的信號。
6.多個分析物圖譜分析
Ⅳ 用什麼辦法才能查出身體是酸性和鹼性呢
判斷自己是酸性或鹼性體質 :
第一種辦法是自我感覺,如果長期體力不支、容易疲勞、形容憔悴或有其他亞健康特徵,無疑說明自己的體液在酸化。
第二種辦法是用PH試紙檢測。最簡單的是連續三天清晨空腹檢測唾液,如PH平均值小於7.0即為酸性體質。
第三種辦法是到醫院查血。
需要說明的是,血液的PH值波動范圍極小,為7.35-7.45。小於7.35即為酸性,小於7.0,表明病情極為嚴重。
酸性體質的形成是一個漫長的過程,對身體的影響也是一個從量變到質變的過程。當酸性不很強時,反應出來的是亞健康狀態,進一步酸化,就會出現各種疾病。這幾乎是所有內源性慢性疾病的患病原因。比如,癌症病人的體液都是酸性的,病情越重,酸性越強。因為癌細胞只能在酸性體液和缺氧的條件下,才會瘋狂的生長,形成腫瘤。糖尿病人、痛風病人、心血管病病人的體液都是酸性的。所以說,酸性體質是百病之源。
同理,疾病的治療必須從根本上改變酸性體質。
酸性體質 :正常人的體液平均PH值是7.0——7.4,為中性或弱鹼性。低於這個平均值,就是酸性體質。
人的身體構成中約有70%是水分,成為體液。體液含有各種人體不可缺少的離子、化合物以及代謝物。生命活動的大多數生化反應都是在水溶液中進行的。
體液包括細胞內液(占體液的2/3)和細胞外液(占體液1/3)。細胞外液包括血液、淋巴液、組織液、腦脊液和各種分泌液(如唾液、尿液、眼淚、汗液、胃液、精液、宮頸液等)。
形成酸性體質主要有三個因素:
第一,代謝因素。人體體內每時每刻都在進行新陳代謝,產生的代謝物是酸性的。
第二,飲食因素。絕大多數人的日常飲食都是酸性食物為多,如肉類、蛋類、奶類、酒類、碳酸飲料類等等,這些食物消化後在體內留下硫、氮、磷、氯等酸性物質,在體內形成酸根,這是導致酸性體質形成的最重要的原因。
第三,環境因素。大環境的被污染同樣影響著體內小環境,破壞了體內酸鹼平衡體系,加速了體液的酸化 。
酸性體質對 身體的危害:
一.、對循環系統的影響:體液偏酸使 血液粘稠度增高、血液循環減慢、血液中的脂質類物質易沉積在血管壁上,導致早期動脈硬化、血栓或心、腦血管疾病。
對骨骼的影響:偏酸的體液刺激甲狀旁腺,使甲狀旁腺素分泌增多,骨骼釋放到血液中的鈣增多,鈣雖然可以中和血液中的酸,但這樣長期「借」鈣的結果,會導致骨質疏鬆、骨質增生、骨骼變形及牙損害等。
對眼睛影響:體液偏酸、血液粘稠度增高、血循環減慢、對組織細胞供氧減少,易造成組織細胞衰老死亡,而眼底的血管又細又長,所以極易受累病變,使循環不暢,發生眼部疾病。
對皮膚的影響:偏酸的體液使皮脂臘的微酸性狀態受到破壞,失去了對細菌的抑製作用,易引發痤瘡、毛囊炎、癤腫等感染性皮膚病。據調查,80%痤瘡患者的體液偏酸。粘稠度增高,血循環減慢,黑色素及酸性產物在皮下瘀積,晚出現色素斑、皮膚乾燥,以及皮膚彈性差、晦暗等。此時皮膚還處於高敏感狀態,極易過敏。
對免疫系統的影響:體液偏酸、人的免疫力降低,易患感冒及其他感染性疾病。因此,體液的酸鹼平衡對健康與美容起著很重要的作用。
酸性體質是百病之源,增加鹼性營養才是健康的真正出路,恰瑪古富含植物有機活性鹼,是維吾爾族人葯食同源的鹼性食物。
二..食品的酸鹼性:
1.食品的酸鹼性與其本身的PH值無關(味道是酸的食品不一定是酸性食品),主要是食品經過消化、吸收、代謝後,最後在人體內變成酸性或鹼性的物質來界定。產生酸性物質的稱為酸性食品,如動物的內臟、肌肉、植物種子(五穀類)。產生鹼性物質的稱為鹼性食品,如蔬菜瓜豆類,茶類等。
2. 動物的內臟、肌肉、脂肪、蛋白質、五穀類,因含硫(S)、磷(P)、氯(Cl)元素較多,在人體內代謝後產生硫酸、鹽酸、磷酸和乳酸等,他們是人體內酸性物質的來源;而大多數菜蔬水果、海帶、豆類、乳製品等含鈣(Ca)、鉀(K)、鈉(Na)、鎂(Mg)元素較多,在體內代謝後可變成鹼性物質。
3.如果過多食用酸性食品,以至不能中和而導致酸性,消耗鈣、鉀、鎂、鈉等鹼性元素,會導致血液色澤加深,粘度、血壓升高、從而發生酸毒症(Acidosis),年幼者會誘發皮膚病、神經衰弱、胃酸過多、便秘、蛀牙等,中老年者易患高血壓、動脈硬化、腦出血、胃潰瘍等症。酸毒症是由於過多食用酸性食品引起的,所以不能偏食,應多吃蔬菜和水果保持體內酸鹼的平衡。
4.水果雖然含有各種有機酸,吃起來有酸味,但消化後大多氧化成鹼性食物。但草莓有不能氧化代謝的有機酸(苯甲酸、草酸),會使體液的酸度增加,屬於酸性食品,是個例外。存在於蔬菜中的有機酸主要是蘋果酸、檸檬酸、酒石酸和草酸。這里特別要注意的是草酸,它的有機體不易氧化,與鈣鹽形成的草酸鈣不溶於水而累積於腎臟中,影響了鈣的吸收。在菜蔬中,番茄、馬鈴薯、菠菜等都含有草酸。理論上鹼性中毒(alkalosis)亦會發生,但人類鹼性中毒現象不常見,因為人類有大量的胃酸可以中和。
體液酸鹼度[PH值]小於7.35時,稱體液酸化,酸性體質。產生酸性體質的因素主要是:營養過剩、運動較少、壓力過大和環境污染。其中最主要的因素是營養過剩,體內攝入過多的酸性食物,無法排出體外,其酸性分解產物導致體液酸化,如蛋白質分解出尿酸,脂肪分解出乙酸,糖類分解出丙酮酸、乳酸。
酸性食物:
好吃的東西幾乎都是酸性的,如:魚、肉、米飯、酒、砂糖等,全都是酸性食物,相反,鹼性食物如海帶、蔬菜、白蘿卜、豆腐等多半是不易引起食慾但卻對身體有益的食物。外行人的想法,以為酸的東西就是酸性食物,諸如一看就會令人流口水的草莓、檸檬等,其實,這些東西正是典型的鹼性食物,麻煩也就在這個地方。
可以參考食物中的鈣、磷的含量來判斷,鈣質多的就是鹼性食物,磷質多的就是酸性食物。所以我們應該好好檢討自己平日所吃的東西,是否有酸性過度的傾向。
白米飯是典型酸性食物,以此為主食的中國人,如果沒有攝取相當量的鹼性食物,就容易變成酸性體質。尤其是近年來,工業發展而引起環境污染、果菜類的農葯污染、化學性加工食品等危害,變本加厲,加上土壤的酸性化導致食物中的鈣也相對缺少。
此外還有一種酸性體質的原因,那就是都市人精神上的壓力反應。從外面而來的壓力,透過間腦而傳到副腎和腦下垂體,以荷爾蒙分泌再傳達到各器官,此時,若測定血液中的鈣離子,一定會比正常值下降,也就是壓力使血液中的鈣離子降低,使血液變成酸性化。總之,環境污染及不正常生活及飲食習慣,使我們體質逐漸轉為酸性、生活步調失常會造成酸性體質、情緒過於緊張、動手術之身體的負荷都易讓體質變成酸性。
保持鹼性體質的措施:
1、保持良好的心情、情緒對體液酸化影響很大。適量運動以及杜絕抽煙、酗酒等不良嗜好。
2、不吃宵夜:通常晚上八點過後進食就稱之為宵夜。因晚上人體活動力低,且大部分處於休息狀態,因此食物 留在腸子理會變酸、發酵、產生毒素,使體質變酸。
3、要吃早餐:人體在凌晨 4 : 30 體溫達到最低點,血循會變慢,如果睡太晚再加上不吃早餐,血液循環變慢, 氧氣減少,形成缺氧性燃燒,會使體質變酸。
4、調整飲食結構,酸鹼食物的比例建議為 20 ∶ 80 。多喝鹼性離子水,少喝酸性水,如純凈、可樂等。如果體質偏酸性,可多實用鹼性食物,例如糙米、蔬菜水果,另外海藻類食品也是很好的選擇。體重反應身體健康,身體的健康與否,在於您平日的保健,多一分關心,將多一些健康。
我們日常攝取的食物可大致分為酸性食物和鹼性食物。從營養的角度看,酸性食物和鹼性食物的合理搭配是身體健康的保障。
食物酸鹼一覽表 :
強酸性食品:蛋黃、乳酪、甜點、白糖、金槍魚、比目魚。
中酸性食品:火腿、培根、雞肉、豬肉、鰻魚、牛肉、麵包、小麥。
弱酸性食品:白米、花生、啤酒、海苔、章魚、巧克力、空心粉、蔥。
強鹼性食品:葡萄、茶葉、葡萄酒、海帶、柑橘類、柿子、黃瓜、胡蘿卜。
中鹼性食品:大豆、蕃茄、 香蕉、草莓、蛋白、梅干、檸檬、菠菜等。
弱鹼性食品:紅豆、蘋果、甘藍菜、豆腐、捲心菜、油菜、梨、馬鈴薯。
大部分人對食物酸鹼性的認識十分模糊,認為吃起來酸酸的檸檬就是酸性的。其實,食物的酸鹼性不是用簡單的味覺來判定的。所謂食物的酸鹼性,是指食物中的無機鹽屬於酸性還是屬於鹼性。食物的酸鹼性取決於食物中所含礦物質的種類和含量多少的比率而定:鉀、鈉、鈣、鎂、鐵進入人體之後呈現的是鹼性反應;磷、氯、硫進入人體之後則呈現酸性。
鹼性食物主要分為:
一、蔬菜、水果類;
二、海藻類;
三、堅果類;
四、發過芽的谷類、豆類。
要避免或減少以下酸性食物的攝取:
一、澱粉類;
二、動物性食物;
三、甜食;
四、精製加工食品(如白麵包等);
五、油炸食物或奶油類;
六、豆類(如花生等)
Ⅳ 關於細胞膜通透性的檢測方法,有哪些
當細胞膜的通透性發生改變時,一些正常情況下不能透過細胞膜的外部物質進入細胞的量增多,正常細胞內的有些物質也易於釋放到細胞外,檢測細胞通透性變化的方法也就是基於這樣的原理而設計的。常用的細胞膜通透性的檢測方法有:
(1)死/活細胞染色法 : 使用選擇性死/活細胞染色的特殊染料如不易穿透活細胞膜的台盼蘭、苯胺黑及用於活細胞著色的中性紅、健那綠、亞甲藍、甲苯胺藍等,通過染色區分死活細胞並計數來間接判斷細胞膜通透性的改變情況。該方法簡單,方便,價廉;但靈敏度和精確性差。
(2)熒游標記法 : 使用二乙酸熒光素(FDP)、碘化丙啶(PI)或異硫氰酸熒光素鈉標記的熒光染料與細胞共孵育,用流式細胞儀檢測熒光染色陽性細胞的比率。此法其實是(1)法的「熒光」版,但其在靈敏性和准確性方面明顯要優於後者。
(3)硝酸鑭(La)示蹤法: 在正常的生物組織中鑭微粒可沉積於細胞間隙,但不能穿過具有1~ 2nm 微小間隙的細胞膜性結構(包括細胞膜和細胞器膜),也不能穿過細胞間的緊密連接。在膜性結構通透性增高時, 鑭微粒則可進入細胞、細胞器和緊密連接內, 並在電鏡下顯示, 鑭鹽標記技術被認為是一種有效的監測細胞膜通透性變化的標記技術。
(4)LDH釋放法: 在正常情況下,細胞內大分子物質LDH 是不能通過細胞膜的, 但在細胞膜受損傷而通透性增加時,可通過受損的細胞膜釋放出來。LDH 能較好地反映細胞膜損傷程度。類似的還有檢測細胞外K+的漏出率等。
還有一些檢測指標是針對不同細胞的一些特殊成分變化而設計。原則都是檢測正常細胞內、外某類些物質的比例變化情況。
Ⅵ 細胞活性檢測的方法有多少種 每種的原理是什麼
簡單說幾個把
染色體法 主要在培養基中利用死活細胞對燃料親和力不同 來判斷
克隆形成實驗 原理是單個細胞在體外增至六代後,後代形成的細胞群體 ,通過計算其克隆形成率 來判斷
比色法 也是比較經典的 M,RR 活體細胞中的線粒體中的琥珀酸脫氫酶可以將M,rr還原成藍紫色的結晶甲醋 死細胞無此功能
Ⅶ 簡述T細胞功能測定的常用方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。1.體液免疫測定主要利用抗原與相應抗體在體外發生特異性結合,並在一些輔助因子參與下出現反應,從而用已知抗原或抗體來測知未知抗體或抗原。此外,尚包括檢測體液中的各種可溶性免疫分子,如補體、免疫球蛋白、循環復合物、溶菌酶等。2.細胞免疫測定法是根據各種免疫細胞(T細胞、B細胞、K細胞、NK細胞及巨噬細胞等)表面所具有的獨特標志和產生的細胞因子等,測定各種免疫細胞及其亞群的數量和功能,以幫助了解機體的細胞免疫水平。體液免疫檢測法1.凝集反應。顆粒性抗原(細菌或紅細胞等)與相應抗體特異性結合,在電解質參與下形成肉眼可見的凝集物,稱之為凝集反應。1)直接凝集反應。顆粒性抗原與相應抗體直接結合所產生的凝集現象,前者多為細胞表面的結構成分,如細菌或紅細胞的表面結構抗原。⑴玻片法:多用於抗原的定性檢測。⑵試管法:多用於抗體的定量檢測。2)間接凝集反應。將可溶性抗原吸附於載體顆粒(如乳膠顆粒、紅細胞等)的表面,稱之為致敏顆粒。當致敏顆粒與相應抗體結合,即可出現凝集現象。這個反應常用於測定細菌性抗體、病毒性抗體、鉤端螺旋體和梅毒螺旋體抗體及某些自身抗體(如抗核抗體、抗腎抗體、抗甲狀腺抗體等)。根據凝集反應的原理,還有間接凝集抑制試驗、反向間接凝集試驗、協同凝集試驗等。2.沉澱反應。可溶性抗原(外毒素、血清、細菌培養的濾液、組織浸出液等)與相應抗體特異性結合,在電解質參與下,形成沉澱物,稱為沉澱反應。沉澱反應的抗原多為多糖、類脂、蛋白質等。1)單向擴散試驗。這是一種抗原定量試驗,是可溶性抗原在含抗體的瓊脂介質中擴散的沉澱反應。此法常用於檢測血清免疫球蛋白和補體各成分的含量。2)雙向擴散試驗。這是可溶性抗原與抗體在瓊脂介質中相互擴散的沉澱反應。本法常用於定性試驗,如檢測血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。單克隆抗體技術3)對流免疫電泳。對流電泳是一敏感快速的檢測方法,即在電場作用下的雙向免疫擴散。此法常用於檢測血清中的乙型肝炎表面抗原與甲胎蛋白等。3.中和試驗。特異性抗體可抑制相應抗原物質的活性,抗體使相應抗原的毒性或傳染性消失的反應為中和試驗。例如抗毒素中和外毒素的毒性,病毒的中和抗體可使病毒失去感染性等。診斷風濕熱的抗鏈球菌溶血毒素「O」試驗也為一種中和試驗。乙型溶血性鏈球菌能產生一種溶解人、兔紅細胞的溶血毒素「O」,該毒素的溶血毒性可被抗溶血毒素「O」抗體所中和而不出現溶血。試驗時將病人血清與溶血毒素「O」混合,作用一段時間後加入人紅細胞,紅細胞不被溶解為陽性反應,表示病人血清中存在抗溶血毒素「O」抗體。血清抗體效價達400單位以上時提示患者曾感染乙型溶血性鏈球菌,有助於風濕熱的診斷。4.免疫熒光法(熒光抗體法)。是應用熒光素染料(如異硫氰酸熒光黃等)來標記抗體,但不影響其活性,此種抗體稱熒光抗體。用已知種類的熒光抗體浸染待檢的含有抗原的細胞或組織切片,如有相應抗原存在,則抗原即與此種抗體發生特異性結合,形成復合物而粘著在細胞上,不易洗脫,在熒光顯微鏡下成為發出熒光的可見物,可達到診斷或定位的目的。包括直接法和間接法。5.酶聯免疫吸附試驗。本法的原理是利用酶(常用辣根過氧化物酶)標記的抗原或抗體,以測定被檢標本中有無相應的抗原或抗體。有間接法、雙抗體法、競爭法三種。6.溶血空斑試驗。7.免疫印跡技術。免疫印跡或免疫轉印技術(immunoblotting或Westernblot)是在Southern(1975)抗體抗原反應創建的DNA印跡術(Southernblotting)基礎上發展起來的新型免疫生化技術。細胞免疫檢測法近代免疫學廣泛採用了細胞生物學、免疫血清學、免疫標記、免疫組化等多方面技術,不斷發展和完善了一系列細胞免疫檢測技術,用於檢測各類免疫細胞的表面標志(包括抗原及受體)、細胞的活化、增殖、吞噬、殺傷功能、各種細胞因子的活性或含量等方面。這些技術為深入研究和認識機體免疫系統的生理、病理改變,闡明某些疾病的發病機制和臨床診治提供了有用的手段。隨著細胞免疫學的迅猛發展,時有新的細胞免疫檢測技術出現。二十一世紀初期,新發展的項目集中在對有關細胞因子以及細胞受體方面的檢測。1.淋巴細胞轉化試驗。人類淋巴細胞在體外與特異性抗原(如結核菌素)或非特異性有絲分裂原(如植物血凝素,PHA)等一起孵育,T細胞即被激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加,最後導致細胞分裂。在光學顯微鏡下可計數轉化後的淋巴母細胞數,也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)摻入正在分裂的淋巴細胞,用液閃測定儀來確定摻入量以確定淋巴細胞轉化率。2000年開始出現一種不用同位素,又可用儀器測量的淋巴細胞增殖反應的檢查法,稱為MTT檢測法。MTT是一種甲氮唑鹽,它是細胞線粒體脫氫酶的底物,細胞內的酶可將MTT分解產生藍黑色成分。該產物的多少與活細胞數成正比,結果可用酶標儀(595nm)測量光密度,作為MTT法的指標。2.E-花環法。人類T細胞表面有羊細胞受體(CD2)能與羊紅細胞結合形成玫瑰花樣結構。即將分離液分離出的外周的單個核細胞懸液與羊紅細胞在體外混合,經37℃培養5~10分鍾後放4℃過夜,取細胞懸液計數,外周血淋巴細胞中約70%~80%淋巴細胞結成花環即為T細胞,此法可用來分離T細胞。3.T細胞亞群檢測。4.細胞毒試驗。Tc細胞、NK細胞、LAK細胞、TIL細胞等對其靶細胞有直接的細胞毒(殺傷)作用。抗體制備常用的檢測方法是51Cr(鉻)釋放法,將51Cr-Na2CrO4鹽水溶液與靶細胞(不同的細胞需不同的靶細胞,如NK細胞的靶細胞為K562),於37℃培養1小時左右,51Cr即進入靶細胞,與胞漿結合,洗去游離的51Cr後,即可得到51Cr標記的靶細胞,將待測細胞毒的細胞與51Cr標記的靶細胞混合(比例約為50:1或100:1),靶細胞殺傷越多,釋放到上清液中的游離51Cr就越多,且不能再被其他細胞吸收,用γ射線測量儀檢測上清液中的cpm值,可計算出待檢細胞殺傷活性高低。細胞毒的檢測對腫瘤免疫有較大價值。5.巨噬細胞吞噬功能的測定。將中葯(10%斑蝥)乙醇浸出液浸漬的濾紙(1cm2大小)置於受試者前臂屈側皮膚上,4~5小時後取下濾紙。48小時內皮膚局部可水泡,內含巨噬細胞。取水泡液0.5ml加雞紅細胞懸液0.01ml,37℃經30分鍾後作塗片、染色與鏡檢,計算吞噬百分率及每個巨噬細胞吞噬雞紅細胞的平均數。本試驗有助於腫瘤病情及療效的觀察。6.移動抑制試驗。致敏淋巴細胞與其特異性抗原再次接觸時,可以產生移動抑制因子(MIF)。這種因子可以抑制巨噬細胞和中性粒細胞的移動,使之定位於局部而增強其免疫作用。本試驗用來觀察受檢者淋巴細胞在體外受特異性抗原刺激後,有無MIF產生,以測定機體對某種抗原的特異性細胞免疫反應的功能。7.時間分辨熒光測量技術。時間分辨熒光測量技術(time-resolvedfluorometry,TrF)是一項新型的超微量非放射性分析技術。該技術的敏感性和特異性與放射性核素測量技術相仿,但無放射測量的弊端,故問世雖短,進展卻極為迅速,有取代放射測量之勢。8.細胞因子檢測技術。細胞因子的檢測,2005年起在中醫臨床及實驗室中已廣泛應用。9.細胞受體的檢測。受體是細胞表面標志之一,通過對受體的檢測,可以了解細胞的功能,並為某些疾病的發病機制提供一定的理論依據。
Ⅷ 細胞活力測定常用的簡便方法是
MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)並沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞碸(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤葯物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
缺點:由於MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶於水,需被溶解後才能檢測。這不僅使工作量增加,也會對實驗結果的准確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗者也有損害。
細胞活力常用百分比表示,活力的大小對試驗結果有很大影響。細胞活力的測定有許多方法,最簡便常用的方法是台盼藍(trypanblue)染色法。台盼藍又稱錐藍,是一種陰離子型染料,這種染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。
Ⅸ 細胞免疫功能檢測常用有哪幾種方法
細胞免疫(CMⅠ)是由多種細胞相互作用的結果。免疫細胞間相互作用導致多種細胞因子的釋放。因此細胞功能測定不僅涉及T細胞的數量和功能與包括各類因子活性測定,因此評價機體的細胞免疫功能不僅程序復雜,且很難標准化。
一、遲發型過敏反應的體外檢測方法
皮膚試驗和接觸性過敏的誘發是檢測遲發型過敏反應(DTH)的兩種常用方法。皮膚試驗中誘發對曾經使病人致敏的抗原的再次應答,而接觸性過敏是測試受者對從未接觸過的物質發生致敏的能力。
1.皮膚試驗 用皮膚試驗診斷DTH,常用的抗原有結核菌純蛋白衍生物(PPD)、腮腺炎病毒、念珠菌素等,在人類試驗時在前臂皮內注射少量可溶性抗原,24~48小後,測量紅腫硬結的大小,硬結直徑大於10mm即被看作為陽性。表明受試者對該病原菌有了一定的細胞免疫能力,若皮試無反應,可用更高濃度的抗原重復試驗,若仍無反應即為陰性,需排除皮試技術誤差,也可能受試者從未接觸過此抗原,也可能由於細胞免疫功能缺損,或由於細胞免疫功能缺損,或由於嚴重感染(麻疹、慢性播散性結核)造成的無反應性。
2.接觸性過敏常應用低分子量化合物如二硝基氯苯(DNCB)誘生接觸性過敏。化合物與皮膚蛋白質結合而導至DTH反應。在動物試驗時,初次皮膚上塗抹DNCB後間隔7~10天再激發刺激,則皮膚出現即為陽性。此試驗人類已不使用。
二、細胞免疫的體外檢測方法
體外檢測淋巴細胞的數量和功能,最易採集的是血標本,首先需分離或純化淋巴細胞,一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重為1.077的淋巴細胞分層液,當將血液重疊於淋巴細胞分層液之上離心時,由於紅細胞(1.092)、多形核白細胞(1.090)、淋巴細胞(1.070)的比重不同而相互分開。淋巴細胞和單核細胞在血漿和分層液交界處形成一薄層。仔細分出這一薄層的細胞,其中淋巴細胞佔80%,單核細胞佔20%,淋巴細胞中T細胞佔80%,B細胞佔4%~10%,其作為非DT、非B細胞。
1.T細胞計數
(1)E花環法:人類T細胞表面有SRBC受體(CD2)能與SRBC結合形成玫瑰花環樣結構,將經分層液分離現的RBM懸液與SRBC在含有血清的平衡鹽水中混合,經37℃培養5~10分鍾放4℃過夜,取細胞懸計數,外周血淋巴細胞中約70%~80%淋巴細胞結成花環即為T細胞。目前此方法已用來分離T細胞,而不用做T細胞計數。
(2)用單克隆抗體計數T細胞:將人的PBM分成三等份,分別用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的單克隆抗體作第一抗體與細胞結合,再用FITC標記的兔抗小鼠IgG抗體作第二抗體進行間接免疫熒光染色,在熒光顯微鏡下或流式細胞儀檢測結果,在PBM中被CD3抗體染上熒光的細胞稱為CD3 細胞即總T細胞。正常人在PBM中T細胞佔70%~80%。正常人的CD4 細胞和CD8 細胞之和應與CD3 細胞數一致。CD4 細胞與CD8 細胞的比值正常人約為2/1而艾滋病患者則比值小於1.7。
2.T細胞活化試驗 T細胞能被非特異的物質稱為有絲分裂原所激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加,最圖導致細胞分裂。在光學顯微鏡下可計數轉化後的淋巴細胞數,也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷(3HTdR)摻入正在分裂的淋巴細胞,用液閃測定儀檢查摻入正在分裂的淋巴細胞,用液測量儀檢查摻入的3H-TdR的多少確定淋巴細胞轉化率。最近有一種不用同位素,又可用儀器測量的淋巴細胞增殖反應的檢查法,稱為MTT檢測法,MTT是一種甲氮唑鹽,它是細胞線粒體脫氫酶的底物,細胞內的酶可將MTT分解產生藍黑色甲(fromazan)產物。該產物的多少與活性細胞數正相關。結果可用酶標檢測儀(595mm)測量匯豐銀行密度,做為MTT法的檢查指標。此法的結果與3H-TdR摻入法平行,並能反應試驗中的活細胞數。
3.細胞毒試驗 TC細胞、NK細胞、LAK細胞、TIL細胞對其靶細胞有直接的細胞毒(殺傷)作用。常用的栓測細胞毒效應的方法是51Cr-Na2Cro4鹽水溶液與靶細胞胞混合,於37℃培養1小時左右,51Cr即可進入靶細胞,與胞漿蛋白結合,洗去游離的51Cr後,即可得到51Cr標記的靶細胞,將待檢細胞毒性的細胞與51Cr標記的靶細胞混合(比例約為50:1或100:1)靶細胞被殺傷越多,釋放到上清液中的液游離的51Cr越多,且不能被其他細胞吸收。用γ射線測量儀檢測上清液中的cpm值,即可計算出待檢細胞殺傷活性的高低。
細胞毒試驗檢測Tc細胞效應功能是否健全,及經IgG介導的ADCC效應,或NK細胞在抗腫瘤免疫中的作用是有意義的。
4.混合淋巴細胞的反應(MIR) 是體外研究T細胞的較好的方法,雙向MLR常被用來篩選骨髓移植的供體。來自不同供體的淋巴細胞分別與病人的淋巴細胞混合培養4~5天,在最後8小時摻入51TdR摻入法測T細胞的反應性。或用細胞毒法觀察受刺激的T細胞與活的靶細胞混合(靶細胞來自與刺激細胞相同的個體)如果T細胞受刺激後產生了細胞毒T細胞,可殺死活的細胞,根據靶細胞釋放51Cr的多少算出T細胞移動抑制因子)和LIF(白細胞移動抑制因子)來評估細胞免疫功能。近年來應用測定IL-2的免疫酶技術,操作簡單,並能定量以取代了MIF和LIF的測定。單個核細胞與分裂原一起培養24小時,然後測定清液中的IL-2活性。在細胞免疫功能缺損時,特別是AIDS病人,IL-2分泌明顯降低。而有些疾病,如多發性硬化、類風濕關節炎、移植排斥反應等病人體內血清中IL-2水平升高,表明病人T細胞活性增高。發生移植排斥反應的病人尿中IL-2也可升高。
也可用酶聯免疫吸附試驗測定各種體液中活化的T細胞脫落的IL-2受體(CD25),一般來說IL-2的水平和IL-2受體水平是平行的,IL-2和IL-2受體的檢測可用於對某些疾病的監測,如移桿排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治療的病人。
對體外培養的細胞進行細胞因子產生能力檢測是檢查細胞培養上清液中細胞因子的生物活性或抗原性。現已可用核酸雜交技術,即從組織中或細胞中提取RNA,與同位素或酶標記的該種細胞因子的cDNA探針作分子雜交試驗,即印跡(dot blotting)或Northern印跡,若查出有某種因子的mRNA存在,即說明該細胞在所處培養條件下有產生某種細胞因子的能力。
Ⅹ 怎樣測驗身體體液酸鹼性
酸性體質的形成是一個漫長的過程,對身體的影響也是一個從量變到質變的過程。當酸性不很強時,反應出來的是亞健康狀態,進一步酸化,就會出現各種疾病。這幾乎是所有內源性慢性疾病的患病原因。比如,癌症病人的體液都是酸性的,病情越重,酸性越強。因為癌細胞只能在酸性體液和缺氧的條件下,才會瘋狂的生長,形成腫瘤。糖尿病人、痛風病人、心血管病病人的體液都是酸性的。所以說,酸性體質是百病之源。
同理,疾病的治療必須從根本上改變酸性體質。
什麼是酸性體質
人的身體構成中約有70%是水分,成為體液。體液含有各種人體不可缺少的離子、化合物以及代謝物。生命活動的大多數生化反應都是在水溶液中進行的。
體液包括細胞內液(占體液的2/3)和細胞外液(占體液1/3)。細胞外液包括血液、淋巴液、組織液、腦脊液和各種分泌液(如唾液、尿液、眼淚、汗液、胃液、精液、宮頸液等)。
正常人的體液平均PH值是7.0——7.4,為中性或弱鹼性。低於這個平均值,就是酸性體質。
如何判斷自己是酸性體質
第一種辦法是自我感覺,如果長期體力不支、容易疲勞、形容憔悴或有其他亞健康特徵,無疑說明你的體液在酸化。
第二種辦法是用PH試紙檢測。最簡單的是連續三天清晨空腹檢測唾液,如PH平均值小於7.0即為酸性體質。
需要說明的是,血液的PH值波動范圍極小,為7.35-7.45。小於7.35即為酸性,小於7.0,表明病情極為嚴重。
形成酸性體質主要有三個因素:第一,代謝因素。人體體內每時每刻都在進行新陳代謝,產生的代謝物是酸性的。第二,飲食因素。絕大多數人的日常飲食都是酸性食物為多,如肉類、蛋類、奶類、酒類、碳酸飲料類等等,這些食物消化後在體內留下硫、氮、磷、氯等酸性物質,在體內形成酸根,這是導致酸性體質形成的最重要的原因。第三,環境因素。大環境的被污染同樣影響著體內小環境,破壞了體內酸鹼平衡體系,加速了體液的酸化