血細胞分析儀染色方法

① 血液細胞分析儀的工作原理

自動化血液細胞分析儀由於操作簡便、快速、結果准確及精密度高，少量血液就可完成多項參數的分析，大大促進了血液學檢驗技術的發展並為臨床醫學提供了更多的診斷信息，現正逐漸取代傳統的顯微鏡計數法而被廣泛應用.因此，了解血液細胞分析儀的基本原理和分析參數的臨床意義已屬當務之急。
目前，自動化血液細胞分析儀按其工作原理主要可分為電阻型、激光型和運用多項高新技術的綜合運用型(應用流式細胞術，細胞化學染色，特殊細跑質去除法等)。 血液按一定比例稀釋後經負壓吸引通過儀器的一個微孔小管，由於血細胞與稀釋液相比是相對不良導體，當每個血細跑通過微孔時均擠代等體積的稀釋液在電路上形成一短暫的電阻而導致電壓的變化，產生相應的脈沖信號並經放大、甄別後被累加記錄。脈沖數被轉換為細胞數量；脈沖的高低與細胞體積大小成正比，經計算機處理得出各種血細胞的數量、血細胞體積大小的平均數、變異系數、佔全血體積的百分比和體積大小分布直方圖等。一般儀器分為紅細胞/血小板和白細胞/血紅蛋白兩個通道，白細胞/血紅蛋白通道需加入溶血劑使紅細胞破壞後測定血紅蛋白、白細胞數量和粗略分類(按溶血後白細胞體積大小分出兩類或三類白細胞)。
由於電阻型血液細胞分析儀操作簡便、快速、分析參數較多、價格便宜，目前已在國內普遍使用。 血液按一定比例稀釋後形成一個極細的液流穿過激光束，每個血細胞被激光照射後產生光散射並被光電倍增管接收。細胞的前向角散射與細胞的體積大小有關、側向角(或高角)散射與細胞的內部結構、顆粒性質等有關，細胞數量則與細胞通過激光束時光散射的脈沖次數相同。各種檢測信號被放大、甄別後經計算機處理可得到各種血細胞的數量和體積大小的平均數、變異系數、佔全血體積的百分比及體積大小分布直方圖等.血紅蛋白測定同電阻型儀器.白細胞可分為三類細胞。
激光型比電阻型儀器穩定，不易受外電場的干擾，但激光管壽命有限。 此類儀器是多種先進的細胞分析技術的高度綜合應用，對血細胞的分析參數更多，結果也更准確。如Coulter VCS血細胞分析儀就採用了體積分析、高頻傳導和激光散射等多項技術，Technicon H*3血細胞分析儀則採用了激光流式細胞分析、細胞化學染色、細胞分光光度術等多項技術。Technicon H*3的分析參數可達四十餘項，對紅細胞除可作一般分析外尚可對單個細胞內血紅蛋白含量、濃度、細胞大小不等、高低色素性變化做出定量描述，而且可測定網織紅細胞的數量、形態、體積、血紅蛋白含量及濃度等.對白細胞可分出三類5種並提示幼稚細胞數量，還可對核象左移、核象右移、過氧化物酶染色強度作定量描述，而且還能分析淋巴細胞亞群等。
此類綜合型儀器的性能代表了當今血液細胞分析儀的最新發展趨勢，但價格昂貫，在臨床常規血液學檢查方面尚難普及。