1. 癲癇常用的功能定位檢查方法有什麼
前新的檢查方法的不斷出現為功能性致癇灶的檢出提供了可能。現將常用的功能定位檢查方法有以下六種。癲癇活動灶的准確定位可使醫生的注意力集中在切除癲癇病灶或阻斷癲癇放電的擴散途徑上。癲癇外科手術成功的關鍵是癲癇灶的准確定位。 癲癇常用的功能定位檢查方法之一：磁共振成像波譜分析( MRS ) 活體 MRS 利用磁共振技術檢測體內含有特定原子核的化學成份的無創性功能影像檢查方法，目前多應用是 1 H-MRS 。1 H-MRS 主要應用於顳葉癲癇的診斷，多個研究顯示 MRS 對判斷癲癇灶的側有非常高的敏感性。MRS 對於一些雙顳葉代謝異常的病人的術後結果的估計有重要意義， MRS 還用於癲癇的發病機理研究 。 癲癇常用的功能定位檢查方法之二：單光子發射計算機斷層掃描( SPECT ) SPECT 是一種把放射性核素應用於計算機斷層掃描的新的診斷技術，主要是反應局部腦組織的血流情況。可以在發作間期或發作期進行檢查，發作期常表現為高灌流，可以顯示有 90 %的病人癲癇灶區有血流的增加，發作間表現為低灌流，但對於結果的分析較為困難。 癲癇常用的功能定位檢查方法之三：腦磁圖( MEG ) MEG 是一種對人體完全無接觸，無侵襲，無損傷的診斷儀器，目前已廣泛應用於手術前的腦功能檢測定位，癲癇病灶焦點的定位，生理學上的功能性缺損診斷，神經葯理學的調查，腦外傷的診斷，在神經科學和精神醫學領域內的應用也日益廣泛。其中最直接的臨床應用是癲癇灶定位。 MEG 可以准確的癲癇灶定位，並明確病灶與腦重要結構和功能區的關系，對採取正確的手術方案和取得較滿意的治療效果十分重要。利用 MEG 發現原發性癲癇病灶後還能將其焦點位置定位在 MRI 或 CT 上形成集病灶與腦重要功能區為一體的的解剖/功能形態學影象，這為外科手術治療頑固性癲癇提供了准確的癲癇灶定位。利用信號時限差技術 MEG 不僅可以確定雙側大腦半球同時出現而 EEG 難以鑒別的雙側廣泛性癲癇波病灶，而且還能分辨一側半球中多腦葉出現的異常間歇期活動病灶。沒有一種功能定位的方法是完善的，癲癇定位往往需要幾種方法，包括解剖影像的聯合應用。 目前各種方法互為補充，因此聯合取得了良好的結果，如 EEG/MEG 和 CT/MRI 的融合、EEG和 fMRI、 PET和 MRI的融合等。 癲癇常用的功能定位檢查方法之四：正電子發射計算機斷層掃描( PET ) 目前常用的示蹤劑主要是反應葡萄糖代謝的 18 FDG 。 FDG - PET 檢查癲癇灶在發作期的發作早期多為高代謝灶，發作間期主要為低代謝灶，由於發作期不適於進行癲癇檢查，所以 PET 結果顯示癲癇灶為發作間期的低代謝灶， PET 檢查准確率達到 85。7% ，對顳葉癲癇和嬰幼兒癲癇敏感性和特異性均較高， FDG-PET 對顳葉癲癇的診斷敏感性可以達到 84 %，特異度可達 86 %。 癲癇常用的功能定位檢查方法之五：功能性磁共振成像( fMRI ) fMRI 是一種在 MRI 基礎上發展的，能反映特定的腦功能活動或血液動力學變化的腦組織的實時功能性成像技術，既保留的普通 MRI 的解剖學成像特點，又可同時獲得生理學信息。常用的成像技術有彌散成像，灌注成像，血氧水平依賴測量，圖像採集序列有 GRE ， FLASH ， EPI ，磁共振功能成像研究人腦的功能結構最常用的是血氧水平依賴測量 EPI 成像。目前有關 fMRI 應用主要是判斷語言，情感，視覺，運動等功能區的部位及癲癇灶的位置，以便合理選擇治療方式， fMRI 可以來判斷前顳葉切除後的癲癇控制和功能缺失情況。MRS 和 fMRI 均為無創性檢查，不需要射線或對比照影劑或者放射性同位素示蹤的情況下時間解析度為數秒級，空間解析度為毫米級，但檢查時間長。 癲癇常用的功能定位檢查方法之六：腦電圖( EEG ) 近年來發展的視頻腦電 (VEEG) 成為鑒別發作性質及類型的最有效的檢查方法之一，亦是國際上普遍採用的癲癇和癲癇綜合征分類的重要依據。視頻腦電在臨床實時記錄病人發作期或發作間期的腦電活動及體態活動，為醫生提供最為直接，准確的評斷依據。隨著視頻腦電長程監測技術的發展，對癲癇類型的判定，致癇部位的定位，尤其對全身性癲癇棘波灶的起源和定位提供了前所未有的有利依據。而且近年來為增強檢測的准確性，在腦電圖的導聯數上得到了極大的發展，目前已能提供達到 256 導的頭皮電極。目前偶極子定位法的應用在一定程度上提高了定位的精確性。目前本方法又稱為癲癇刀，實際上是對128導全數字化偶極子定位、三維圖像融合長程視頻腦電監測系統的一種俗稱。以往癲癇手術治療的效果一直不佳，主要原因在於對病灶難以准確定位。而最新型癲癇刀的最大優點就是定位精確，而且能夠在術中進行全程監測，使醫生盡量做到在關顱前不留遺憾。治療有效率由傳統方法的75%提高到90%以上。 目頭顱 CT 與 MRI 掃描已成為癲癇病人檢查的常規，特別是 MRI 掃描不僅要包括 T1 ， T2 像，還要進行 Flair 掃描和常規的海馬冠狀掃描，其主要目的是發現顱內異常結構病灶，排除腫瘤、血管病等病變，但僅 20% 的癲癇能夠通過MRI或CT等結構影象檢查確認病理灶定位，同時通常病理灶與癲癇灶不吻合或不完全吻合。無論是否存在結構性病灶，確定引起癲癇發作的功能性致癇灶是最重要的。
2. 細胞免疫功能檢測常用有哪幾種方法
細胞免疫（CMⅠ）是由多種細胞相互作用的結果。免疫細胞間相互作用導致多種細胞因子的釋放。因此細胞功能測定不僅涉及T細胞的數量和功能與包括各類因子活性測定，因此評價機體的細胞免疫功能不僅程序復雜，且很難標准化。
一、遲發型過敏反應的體外檢測方法
皮膚試驗和接觸性過敏的誘發是檢測遲發型過敏反應（DTH）的兩種常用方法。皮膚試驗中誘發對曾經使病人致敏的抗原的再次應答，而接觸性過敏是測試受者對從未接觸過的物質發生致敏的能力。
1．皮膚試驗 用皮膚試驗診斷DTH，常用的抗原有結核菌純蛋白衍生物（PPD）、腮腺炎病毒、念珠菌素等，在人類試驗時在前臂皮內注射少量可溶性抗原，24～48小後，測量紅腫硬結的大小，硬結直徑大於10mm即被看作為陽性。表明受試者對該病原菌有了一定的細胞免疫能力，若皮試無反應，可用更高濃度的抗原重復試驗，若仍無反應即為陰性，需排除皮試技術誤差，也可能受試者從未接觸過此抗原，也可能由於細胞免疫功能缺損，或由於細胞免疫功能缺損，或由於嚴重感染（麻疹、慢性播散性結核）造成的無反應性。
2．接觸性過敏常應用低分子量化合物如二硝基氯苯（DNCB）誘生接觸性過敏。化合物與皮膚蛋白質結合而導至DTH反應。在動物試驗時，初次皮膚上塗抹DNCB後間隔7～10天再激發刺激，則皮膚出現即為陽性。此試驗人類已不使用。
二、細胞免疫的體外檢測方法
體外檢測淋巴細胞的數量和功能，最易採集的是血標本，首先需分離或純化淋巴細胞，一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重為1.077的淋巴細胞分層液，當將血液重疊於淋巴細胞分層液之上離心時，由於紅細胞（1.092）、多形核白細胞（1.090）、淋巴細胞（1.070）的比重不同而相互分開。淋巴細胞和單核細胞在血漿和分層液交界處形成一薄層。仔細分出這一薄層的細胞，其中淋巴細胞佔80%，單核細胞佔20%，淋巴細胞中T細胞佔80%，B細胞佔4%～10%，其作為非DT、非B細胞。
1．T細胞計數
（1）E花環法：人類T細胞表面有SRBC受體（CD2）能與SRBC結合形成玫瑰花環樣結構，將經分層液分離現的RBM懸液與SRBC在含有血清的平衡鹽水中混合，經37℃培養5～10分鍾放4℃過夜，取細胞懸計數，外周血淋巴細胞中約70%～80%淋巴細胞結成花環即為T細胞。目前此方法已用來分離T細胞，而不用做T細胞計數。
（2）用單克隆抗體計數T細胞：將人的PBM分成三等份，分別用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的單克隆抗體作第一抗體與細胞結合，再用FITC標記的兔抗小鼠IgG抗體作第二抗體進行間接免疫熒光染色，在熒光顯微鏡下或流式細胞儀檢測結果，在PBM中被CD3抗體染上熒光的細胞稱為CD3 細胞即總T細胞。正常人在PBM中T細胞佔70%～80%。正常人的CD4 細胞和CD8 細胞之和應與CD3 細胞數一致。CD4 細胞與CD8 細胞的比值正常人約為2/1而艾滋病患者則比值小於1.7。
2．T細胞活化試驗 T細胞能被非特異的物質稱為有絲分裂原所激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加，最圖導致細胞分裂。在光學顯微鏡下可計數轉化後的淋巴細胞數，也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷（3HTdR）摻入正在分裂的淋巴細胞，用液閃測定儀檢查摻入正在分裂的淋巴細胞，用液測量儀檢查摻入的3H-TdR的多少確定淋巴細胞轉化率。最近有一種不用同位素，又可用儀器測量的淋巴細胞增殖反應的檢查法，稱為MTT檢測法，MTT是一種甲氮唑鹽，它是細胞線粒體脫氫酶的底物，細胞內的酶可將MTT分解產生藍黑色甲（fromazan）產物。該產物的多少與活性細胞數正相關。結果可用酶標檢測儀（595mm）測量匯豐銀行密度，做為MTT法的檢查指標。此法的結果與3H-TdR摻入法平行，並能反應試驗中的活細胞數。
3．細胞毒試驗 TC細胞、NK細胞、LAK細胞、TIL細胞對其靶細胞有直接的細胞毒（殺傷）作用。常用的栓測細胞毒效應的方法是51Cr-Na2Cro4鹽水溶液與靶細胞胞混合，於37℃培養1小時左右，51Cr即可進入靶細胞，與胞漿蛋白結合，洗去游離的51Cr後，即可得到51Cr標記的靶細胞，將待檢細胞毒性的細胞與51Cr標記的靶細胞混合（比例約為50：1或100：1）靶細胞被殺傷越多，釋放到上清液中的液游離的51Cr越多，且不能被其他細胞吸收。用γ射線測量儀檢測上清液中的cpm值，即可計算出待檢細胞殺傷活性的高低。
細胞毒試驗檢測Tc細胞效應功能是否健全，及經IgG介導的ADCC效應，或NK細胞在抗腫瘤免疫中的作用是有意義的。
4．混合淋巴細胞的反應（MIR） 是體外研究T細胞的較好的方法，雙向MLR常被用來篩選骨髓移植的供體。來自不同供體的淋巴細胞分別與病人的淋巴細胞混合培養4～5天，在最後8小時摻入51TdR摻入法測T細胞的反應性。或用細胞毒法觀察受刺激的T細胞與活的靶細胞混合（靶細胞來自與刺激細胞相同的個體）如果T細胞受刺激後產生了細胞毒T細胞，可殺死活的細胞，根據靶細胞釋放51Cr的多少算出T細胞移動抑制因子）和LIF（白細胞移動抑制因子）來評估細胞免疫功能。近年來應用測定IL-2的免疫酶技術，操作簡單，並能定量以取代了MIF和LIF的測定。單個核細胞與分裂原一起培養24小時，然後測定清液中的IL-2活性。在細胞免疫功能缺損時，特別是AIDS病人，IL-2分泌明顯降低。而有些疾病，如多發性硬化、類風濕關節炎、移植排斥反應等病人體內血清中IL-2水平升高，表明病人T細胞活性增高。發生移植排斥反應的病人尿中IL-2也可升高。
也可用酶聯免疫吸附試驗測定各種體液中活化的T細胞脫落的IL-2受體（CD25），一般來說IL-2的水平和IL-2受體水平是平行的，IL-2和IL-2受體的檢測可用於對某些疾病的監測，如移桿排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治療的病人。
對體外培養的細胞進行細胞因子產生能力檢測是檢查細胞培養上清液中細胞因子的生物活性或抗原性。現已可用核酸雜交技術，即從組織中或細胞中提取RNA，與同位素或酶標記的該種細胞因子的cDNA探針作分子雜交試驗，即印跡（dot blotting）或Northern印跡，若查出有某種因子的mRNA存在，即說明該細胞在所處培養條件下有產生某種細胞因子的能力。
3. 什麼是功能醫學檢測
功能醫學檢測是以科學為基礎的保健醫學，以先進及准確的實驗為工具，檢測個人的生化體質(biochemicalindiviality)、代謝平衡(metabolic balance)、生態環境(ecological context)，以達到早期改善並維持生理、情緒/認知及體能的平衡的檢測方法。
簡單地說，功能醫學檢測是根據每一個病人獨特而與眾不同的體質，評估身體器官無臨床症狀變化的功能狀況，"其評估器官的"功能"而非僅器官的"病理"。
4. 檢測巨噬細胞的功能還有什麼方法
巨噬細胞功能檢測方法：
人巨噬細胞可從外周血或經斑蝥激發的皮皰液中獲取，也可從肺灌洗液或患者腹膜透析液中分離，但操作繁鎖，得量不多。許多實驗室在進行基礎或配合臨床研究巨噬細胞功能及其與疾病的關系、或篩檢免疫增強葯物和探討其作用機制時，常選用小鼠腹腔巨噬細胞為研究對象，常用的檢測方法如下。
（一）炭粒廓清試驗
正常小鼠肝中枯否細胞可吞噬清除90%炭粒醫學教|育網搜集整理，脾巨噬細胞約吞噬清除10%炭粒，據此給小鼠定量靜脈注射印度墨汁（炭粒懸液），間隔一定時間反復取靜脈血，測定血中炭粒的濃度，根據血流中炭粒被廓清的速度，判斷巨噬細胞的功能。
（二）吞噬功能的檢測
巨噬細胞具有較強的吞噬功能，實驗室常用比細菌大的細胞性抗原作為被吞噬顆粒，如雞紅細胞。其檢測原理是將受檢細胞與適量的顆粒抗原混合後，置
37℃保溫0.5～1h，其間時加振搖，最後離心取測定細胞製成塗片，染色鏡檢，分別計數出吞噬百分比和吞噬指數。各實驗室應根據自己的條件建立正常參考值。
（三）巨噬細胞溶酶體酶的測定
巨噬細胞富含溶酶體酶，如酸性磷酸酶、非特異性酯酶、溶菌酶等，測定這些酶的活性也是衡量巨噬細胞功能的實用指標之一。
1.酸磷酸酶的測定
（1）硝酸鉛法：本法優點是用普通試劑，價格便宜，一般實驗室均有條件做，封片後可較長時間保存，並可用電子顯微鏡研究觀察細胞的超微結構。缺點是細胞必需固定，而且固定條件要求嚴格，如處理不當酶活性易消失，反應步驟也較多。
該法基本原理是在適當的酶性條件下，巨噬細胞內的酸性磷酸酶能使β甘油磷酸鈉水解成磷酸鹽後，後者與硝酸鉛反應產生磷酸鉛，而磷酸鉛再與硫酸銨反應則形成黑色硫化鉛，沉積在胞漿內酸所在處，顯示棕黑色顆粒。酶活性強弱可根據顆粒的數量和粗細不同而分級判斷，顆粒數量少則細的為+，顆粒多而粗的為++，顆粒很多且很粗的為+++.
（2）偶氮法：本法操作簡便，反應液中的底物α-萘磷酸鈉被酸性磷酸酶分解後，形成萘酚和磷酸鹽，而萘酚結構中的羥基（-OH）鄰近的活潑碳原子，立即與偶氮染料起反應，而產生鮮艷的棕色沉積在酶所在處，缺點是封片後保存時間短。
2.非特異性酶的測定該酶比較穩定，酶活性喪失較慢，細胞經塗片乾燥，置室溫至少可保存半天至一天，因此特別有利於臨床檢驗室採用。
常用α-萘醋酸法，該酶可將-萘醋酸分解成萘酚和醋酸，萘酚迅速與偶染料結合，形成有色反應物而沉積。
（四）巨噬細胞促凝血活性測定
激活巨噬細胞可產生一種與膜結合的凝血活性因子，加速正常血漿的凝固，為此取已經37℃預溫的正常兔血漿和CaC12混合液，加入經粘附單層巨噬細胞的試管中，移置37℃，即時記錄血漿凝固時間。實驗證明當巨噬細胞與LPS、腫瘤相關抗原或HbsAg等溫育後，可見血漿凝固時間明顯縮短。本法穩定方便，也是檢測不同疾病患者巨噬細胞功能的指標之一。
5. 肝功能檢測方法(專業)
什麼是乙肝
乙型病毒性肝炎簡稱乙型肝炎，是由乙型肝炎病毒（HBV）引起，通過血液與體液傳播，具有慢性攜帶狀態的傳染病，臨床表現多樣化，包括急性、慢性、淤膽型和重症型肝炎，容易發展為慢性肝炎和肝硬化，少數病例可轉變為原發性肝細胞癌。本病在我國廣泛流行，人群感染率達60%，HBsAg陽性率約為10-15%。是當前危害人民健康最嚴重的傳染病。
乙肝的傳播途徑
1.血源性傳播：接受被乙肝病毒污染的血液或血製品。
2.母嬰傳播：乙肝病毒能通過胎盤傳播（宮內傳播），或在孕婦分娩時從產道傳播（圍產期傳播）。
3.醫源性傳播： 如醫療器械被乙肝病毒污染而未經消毒或處理不當可造成傳播。
4.性接觸傳播： 性亂交、同性戀性接觸及夫妻之間性生活未採取防護措施。
5.密切接觸傳播：乙肝患者或攜帶者的血液、精液、陰道分泌物、乳汁都可能含有乙肝病毒，可污染器具、物品而具有傳染性。
乙肝二對半檢查
乙型肝炎病毒免疫學標記一共3對，即表面抗原(HBsAg)和表面抗體(抗HBs或HBsAb)、e抗原(HBeAg)和e抗體(抗HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗體(抗HBc或HBcAb)。由於核心抗原在血中不易測到，目前試劑盒也不過關，所以還剩二對半抗原抗體，這就是人們常說的乙肝「二對半」檢查，或稱「乙肝五項」檢查。乙肝五項臨床意義如下：
1.乙肝表面抗原：是乙肝病毒的外殼蛋白，本身不具有傳染性，但它的出現常伴隨乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的標志。在感染乙肝病毒2個月～6個月、丙氨酸氨基轉移酶升高前2周～8周時，可在血清中測到陽性結果。它的出現表明是急性乙肝、慢性乙肝患者或病原攜帶者，急性乙肝患者大部分可在病程早期轉陰，慢性乙肝患者或病毒攜帶者表面抗原可持續陽性。
2.乙肝表面抗體：是對乙肝病毒免疫和保護性抗體。它的陽性表明既往感染過乙肝病毒，但已經排除病毒，或者接種過乙肝疫苗，產生了保護性抗體。血清中乙肝表面抗體滴度越高，保護力越強。但也有少數人乙肝表面抗體陽性而又發生了乙型肝炎，可能為不同亞型感染或是乙肝病毒發生了變異。
3.e抗原：急性或慢性乙肝患者體內可查出e抗原，它的陽性說明乙肝病毒在體內復制活躍，傳染性強。
4.e抗體：它的陽性表明患者的傳染性降低，病毒復制降低或緩解。也有個別人e抗體陽性，病情遷延不愈，多為感染了變異的乙肝病毒所致。
5.核心抗體：它的滴度高，表明乙肝病毒正在復制，有傳染性，可持續存在數年至數十年。低滴度的核心抗體表明既往感染過乙肝病毒。
如何看化驗單（乙肝三系檢查、肝功能檢查）
（一）乙肝三系檢查（代表體內病毒情況）
1.HBsAg(表面抗原)
2.HBsAb(表面抗體)
3.HBeAg(E抗原)
4.HBeAb(E抗體)
5.HBcAB(核心抗體)
A 1、3、5項陽性說明感染的是大三陽，病毒復制快，有傳染性。
B 1、4、5陽性說明感染的是小三陽，病毒復制相對較慢，傳染性相對較小。
C 單獨2項陽性說明原來感染過乙肝，或者注射過乙肝疫苗。
D 1、5或者4、5陽性說明正在感染其間，或者正在康復之中。具體分析看病情而定。
E 1、3陽性說明正在感染之中，應該及時治療。
（二）肝功能檢查（代表肝臟本身的變化）
項目 單位 參考范圍
總蛋白： G/L 60-83
白蛋白 G/L 35-53
球蛋白： G/L 25-33
谷丙轉氨酶 U/L 0-40
穀草轉氨酶 U/L 0-50
總膽紅素 umo/l 0-20
直接膽紅素 umo/l 0.0-6.0
肝功各項化驗指標的臨床意義:
通常醫院所做的肝功能化驗指標包括谷丙轉氨酶(ALT),穀草轉氨酶(AST),鹼性磷酸酶(ALP),γ-谷醯轉肽酶(GGT),白蛋白/球蛋白(A/G),總膽紅素(T-Bil),直接膽紅素(D-Bil)。 ALT與AST主要分布在肝臟的肝細胞內，如果肝細胞壞死, ALT和AST就會升高，但這兩種酶在肝細胞內的分布是不同的，ALT分布在肝細胞漿,AST分布在肝細胞漿和線粒體中。急性肝炎和輕症的慢性肝炎, 主要表現為ALT的升高，因此,AST/ALT<1;慢性肝炎的後期,肝硬化和肝癌患者,肝細胞的破壞程度是嚴重的,線粒體也受到了嚴重的破壞,因此,AST升高明顯, AST/ALT>1甚至>2。 ALP和GGT在淤膽型肝炎和肝外梗阻時明顯升高, 酒精性肝炎患者的GGT明顯升高。白蛋白是在肝臟製造的, 當肝功能受損時, 白蛋白產生減少, 球蛋白是機體免疫器官製造的, 當體內存在"敵人"時, 球蛋白產生增加, 因而慢性肝炎病人由於肝功能減退,白蛋白產生減少,又由於體內存在肝炎病毒這個"敵人",球蛋白產生增加, 而造成A/G比值倒置。 肝細胞受損時, 膽紅素的代謝及泄均發生障礙, 因此T-Bil和D -Bil均升高。
何謂"大三陽"，何謂"小三陽"
肝功化驗1、3、5陽性，屬於「大三陽」，即表面抗原（HBsAg)、e抗原（HBeAg)和核心抗體（HBcAb)同時出現陽性。這些患者由於HBeAg(+),因此提示乙型肝炎病毒在體內復制(繁殖)活躍,且傳染性較強。這些患者還分為兩種情況: 一種是肝功正常的患者,說明這些患者雖然病毒在體內較活躍,但並沒有引起嚴重的肝損害。這些患者可以正常工作和學習。又因其病毒復制活躍,還應經常檢查肝功能,一旦發現異常及時治療，同時可在醫生的指導下進行免疫治療和抗病毒治療。另一種是肝功異常的患者,這些患者不但傳染性強,而且已有了較明顯的肝臟損害。對這樣的患者首先要積極治療肝功能異常,可在保肝功物的基礎上加用免疫調節治療,而且要注意休息。如果沒有很好的治療,患者則容易發展為肝硬化。其次,在肝功能穩定的情況下,由醫生決定是否應用抗病毒葯物。還有,由於其傳染性強,密切接觸的親屬、配偶、子女也應注射乙肝疫苗。
肝功化驗1、4、5陽性，屬於「小三陽」，即表面抗原（HBsAg)、e抗體（HBeAb)和核心抗體（HBcAb)同時出現陽性。相對於大三陽患者來說，小三陽患者體內的病毒復制已經由活躍轉為靜止，血中的帶病毒量也明顯減少，傳染性相對降低，病情開始好轉。對於「小三陽」患者還應區分兩種情況，一種是肝功能長期正常（每3個月復查肝功一次，持續2～3年），稱之為「穩定的小三陽」，這是乙肝表面抗原攜帶者或急性乙肝患者較好的轉歸，可看成是一個健康者，一般不會發展為慢性乙肝病人，也不具有傳染性。第二種情況是肝功檢查經常異常，時好時壞，稱之為「不穩定的小三陽」；這主要是由於乙肝病毒發生變異所致，當肝功能異常時要按肝炎進行治療，也具有較強的傳染性。
乙型肝炎的發病機理
乙型肝炎的發病機理是一個復雜的問題,迄今尚未完全闡明。國內外學者對此進行了大量研究，結果表明, 乙型肝炎病人的肝臟受損,並不是乙型肝炎病毒在肝細胞內繁殖的直接結果, 而是機體的免疫反應造成的。乙型肝炎病毒感染人體後,可激發機體產生對乙型肝炎病毒的各種細胞免疫反應和體液免疫反應,並激發自身免疫反應引起免疫調節功能紊亂。機體的這些免疫反應, 可清除已感染病毒的肝細胞, 又可引起肝細胞的損傷, 造成不同類型的病理變化及臨床轉歸。
幼兒時感染HBV,常常因免疫功能不健全,而缺乏上述的免疫反應,造成乙型肝炎病毒攜帶狀態或慢性肝炎。成年感染乙型肝炎病毒的多數患者病毒是可以通過上述免疫反應,引起急性肝炎的症狀,同時清除肝炎病毒的。
什麼是「澳抗」
「澳抗」的全稱是澳大利亞抗原，它是乙型肝炎(簡稱乙肝)病毒免疫指標之一，亦叫做乙肝表面抗原(HBsAg),由於首先在澳大利亞發現，故稱之為「澳抗」。
乙型肝炎表面抗原攜帶者應注意的問題
攜帶者除不能獻血外，可照常工作和學習，一般不必治療，但必須注意下列幾點：
（1）定期（3-6月）復查，包括肝功能、B超、AFP（甲胎蛋白）及白細胞、血小板。一旦發現異常，就需根據不同情況進行治療。雖然肝功能檢查正常，但肝、脾腫大或白細胞、血小板減少也應引起重視。進行必要的治療；
（2）忌酒；
（3）生活規律，勿過累；
（4）注意個人衛生和月經衛生，防止唾液、血液污染周圍環境，感染他人，所用食具、刮刀修面用具、牙刷、盥洗用品應與別人分開；
（5）如HBeAg陽性或HBVDNA陽性，則不宜從事接觸直接入口食品、食具和嬰幼兒工作。 要知道無症狀HBsAg攜帶者中有一部分人的肝臟可能有炎症，實際上為慢性肝炎；也有一部分攜帶者在某一時期可能會發病，母嬰傳染的攜帶者常常在青春期前後發病。一般認為30歲以上攜帶者發病的可能性明顯減少。
對乙型肝炎表面抗原攜帶者有哪些限制
由於人們對乙型肝炎表面抗原攜帶者的認識不夠全面，以至一些乙型肝炎表面抗原攜帶者中的青年在升學、就業、結婚甚至出國等都發生了各式各樣的問題。其實有些問題並非那麼嚴重。乙型肝炎表面抗原攜帶者約占我國總人口的10%，他們中不乏有科學家、名演員和為國爭光的優秀運動員。除了某些學業，如幼兒師范、護士、飲食服務行業等外，對升學、就業，甚至出國不應有太多的限制。這是因為乙肝的傳染主要通過血液，偶爾通過唾液、精液傳染，日常生活中一般接觸是不太可能傳染給別的人。至於結婚，只要對方抗HBs陽性，或HBsAg陽性，就不存在相互傳染的問題。如果對方乙肝標志全部陰性，建議注射乙肝疫苗後再結婚。
"小三陽"患者為什麼有的轉氨酶正常,有的不正常
小三陽患者是指HBsAg(+), 抗HBc(+)和抗HBe(+)的患者。一般認為病毒復制不活躍, 傳染性也不強。但乙型肝炎的肝損害,不取決於病毒是否活躍,而取決於患者本身的免疫系統如何對待乙型肝炎病毒。如果與病毒"和平共處", 就不會引起肝損傷, 肝功能就正常, 如果與病毒"作戰", 就會在"作戰"的同時,破壞肝細胞, 引起肝功能異常。如果在"作戰"時,有效地清除了病毒,就會全愈。而在"作戰"時,只破壞肝細胞,而對病毒的"殺傷"不利,就發展成為慢性肝炎,造成長期的肝功能異常。
e抗體陽性是不是一定好
e抗原陽性轉變為e抗體陽性，可能有二種情況。一種是隨著e抗原轉陰,HBVDNA也轉為陰性，繼而肝功能也正常，一般認為這是一種預後良好，傳染性沒有的表現；另一種情況是e抗原轉陰，e抗體轉陽，但HBVDNA仍陽性，或者血中HBVDNA陰性但肝組織中的HBVDNA仍陽性，雖然病毒復制降低，但仍在復制，仍有傳染性，肝臟仍在受損，病情仍在發展。因此，e抗體轉陽並非都是好事。此外，還有一種變異的乙肝病毒，始終不出現e抗原陽性，但HBVDNA 持續陽性，說明病毒從未減少過，這種類型的乙型肝炎對人的危害更大。
乙型肝炎病毒攜帶者入學、就業時應注意的問題
乙型肝炎的傳染性較弱, 一般接觸不易被感染。因此乙型肝炎患者只要身體狀況允許,是可以正常入學並參加工作的。但在選擇職業時,要注意不宜從事餐飲,保育員等工作,其他職業均可參加。學校和單位也不應因為HBsAg(+)而拒絕接受這些人員入學或工作。
乙型肝炎病毒攜帶者與慢性乙型肝炎如何區別
乙型肝炎病毒攜帶者與慢性肝炎的主要區別在於前者沒有或很少引起肝細胞的損傷,後者引起肝細胞的損傷並表現出肝功能異常及相應的臨床症狀。
親吻和性交是否能傳播乙型肝炎病毒
由於親吻和性交都接觸了病人的體液,因此是可以傳播乙型肝炎病毒的。目前婚前檢查要求檢查HBsAg, 如一方HBsAg(+), 另一方則應進行乙型肝炎的預防接種。
怎樣預防乙型肝炎發展成為肝硬化
乙型肝炎發展成為肝硬化的原因是,肝細胞不斷的壞死。肝細胞壞死後,正常的肝組織發生"塌陷",機體的再生功能就會再生出一些纖維,來充填"塌陷"的部位。這是機體對壞死的組織的一種正常代償功能,代表壞死部位的癒合,是好事。但是,如果肝細胞不斷地壞死,肝臟內不斷地再生纖維,這些纖維取代了大部分的肝組織,而它們又沒有正常肝細胞的功能,肝臟變得又硬又小,這就形成了肝硬化。因此, 預防乙型肝炎患者發展為肝硬化的關鍵在於阻斷肝細胞的壞死。這就是說要保證肝功能的正常。肝功能異常就是肝細胞壞死的標志。因此,乙型肝炎患者一定要定期檢查肝功能,一旦肝功能異常就要及時治療。另外,中葯中的一些活血化瘀葯(丹參等)滋補葯(冬蟲夏草、鱉甲等)均有軟化肝臟,減少肝內纖維生成的作用。
乙肝病人能結婚生育嗎
(1)急性乙肝恢復期、慢性遷延期肝炎、慢性活動性肝炎、以及活動性肝硬化在肝功能恢復正常後連續化驗肝功能六個月及一、二年內均正常、乙肝病毒復制指標陰轉，可以結婚。
(2)肝功能一貫正常，僅乙肝「兩對半」呈「大三陽」的乙肝患者也暫不宜結婚或過性生活，若婚後才發生一方呈「大三陽」時，而對方「兩對半」全陰性，待全陰性者產生足夠的保護性抗體時，才有可能不被對方乙肝病毒感染。但只能保持3－5年。在一方病情復制指標未轉陰前，應採取避孕措施（若患者為男方，應使用避孕套）。並積極採取抗病毒治療。
(3)單項HBsAg陽性者，原則上可以結婚。但也非絕無傳染性，應產生足夠保護性抗體時再結婚。
(4)慢性表抗原HBsAg攜帶者若僅伴抗－HBe一項陽性者可以結婚。
(5)「兩對半」中呈1.4.5或1.5陽性者，若抗－HBe滴度高，可能有傳染性。等抗－HBe滴度明顯下降後才結婚。
(6)即使只有HBsAg或抗－HBe單項陽性的患者，或者2.4.5或2.5陽性的患者，雖可結婚，但性生活應有節制。
(7)父母或家庭中如有明顯肝硬化、肝癌遺傳傾向的乙肝患者，婚後最好不要生育。
父親為乙肝病毒攜帶者,對胎兒及子女的影響
父親為乙肝病毒攜帶者,對胎兒及子女的影響有兩種。一種是造成乙型肝炎病毒的傳播。除母嬰傳播外,父親也有垂直傳播的可能,但機率遠比母嬰傳播小。其傳播途徑主要是產後密切接觸傳播。另一種是把乙肝病毒的易感基因遺傳給下一代,使其子女容易感染乙肝病毒。因此,父親為乙肝病毒攜帶者,孩子也應注射乙肝疫苗。
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6. 簡述T細胞功能測定的常用方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。1．體液免疫測定主要利用抗原與相應抗體在體外發生特異性結合，並在一些輔助因子參與下出現反應，從而用已知抗原或抗體來測知未知抗體或抗原。此外，尚包括檢測體液中的各種可溶性免疫分子，如補體、免疫球蛋白、循環復合物、溶菌酶等。2．細胞免疫測定法是根據各種免疫細胞（T細胞、B細胞、K細胞、NK細胞及巨噬細胞等）表面所具有的獨特標志和產生的細胞因子等，測定各種免疫細胞及其亞群的數量和功能，以幫助了解機體的細胞免疫水平。體液免疫檢測法1.凝集反應。顆粒性抗原（細菌或紅細胞等）與相應抗體特異性結合，在電解質參與下形成肉眼可見的凝集物，稱之為凝集反應。1）直接凝集反應。顆粒性抗原與相應抗體直接結合所產生的凝集現象，前者多為細胞表面的結構成分，如細菌或紅細胞的表面結構抗原。⑴玻片法：多用於抗原的定性檢測。⑵試管法：多用於抗體的定量檢測。2）間接凝集反應。將可溶性抗原吸附於載體顆粒（如乳膠顆粒、紅細胞等）的表面，稱之為致敏顆粒。當致敏顆粒與相應抗體結合，即可出現凝集現象。這個反應常用於測定細菌性抗體、病毒性抗體、鉤端螺旋體和梅毒螺旋體抗體及某些自身抗體（如抗核抗體、抗腎抗體、抗甲狀腺抗體等）。根據凝集反應的原理，還有間接凝集抑制試驗、反向間接凝集試驗、協同凝集試驗等。2．沉澱反應。可溶性抗原（外毒素、血清、細菌培養的濾液、組織浸出液等）與相應抗體特異性結合，在電解質參與下，形成沉澱物，稱為沉澱反應。沉澱反應的抗原多為多糖、類脂、蛋白質等。1）單向擴散試驗。這是一種抗原定量試驗，是可溶性抗原在含抗體的瓊脂介質中擴散的沉澱反應。此法常用於檢測血清免疫球蛋白和補體各成分的含量。2）雙向擴散試驗。這是可溶性抗原與抗體在瓊脂介質中相互擴散的沉澱反應。本法常用於定性試驗，如檢測血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。單克隆抗體技術3）對流免疫電泳。對流電泳是一敏感快速的檢測方法，即在電場作用下的雙向免疫擴散。此法常用於檢測血清中的乙型肝炎表面抗原與甲胎蛋白等。3．中和試驗。特異性抗體可抑制相應抗原物質的活性，抗體使相應抗原的毒性或傳染性消失的反應為中和試驗。例如抗毒素中和外毒素的毒性，病毒的中和抗體可使病毒失去感染性等。診斷風濕熱的抗鏈球菌溶血毒素「O」試驗也為一種中和試驗。乙型溶血性鏈球菌能產生一種溶解人、兔紅細胞的溶血毒素「O」，該毒素的溶血毒性可被抗溶血毒素「O」抗體所中和而不出現溶血。試驗時將病人血清與溶血毒素「O」混合，作用一段時間後加入人紅細胞，紅細胞不被溶解為陽性反應，表示病人血清中存在抗溶血毒素「O」抗體。血清抗體效價達400單位以上時提示患者曾感染乙型溶血性鏈球菌，有助於風濕熱的診斷。4.免疫熒光法（熒光抗體法）。是應用熒光素染料（如異硫氰酸熒光黃等）來標記抗體，但不影響其活性，此種抗體稱熒光抗體。用已知種類的熒光抗體浸染待檢的含有抗原的細胞或組織切片，如有相應抗原存在，則抗原即與此種抗體發生特異性結合，形成復合物而粘著在細胞上，不易洗脫，在熒光顯微鏡下成為發出熒光的可見物，可達到診斷或定位的目的。包括直接法和間接法。5．酶聯免疫吸附試驗。本法的原理是利用酶（常用辣根過氧化物酶）標記的抗原或抗體，以測定被檢標本中有無相應的抗原或抗體。有間接法、雙抗體法、競爭法三種。6．溶血空斑試驗。7．免疫印跡技術。免疫印跡或免疫轉印技術(immunoblotting或Westernblot）是在Southern(1975)抗體抗原反應創建的DNA印跡術(Southernblotting）基礎上發展起來的新型免疫生化技術。細胞免疫檢測法近代免疫學廣泛採用了細胞生物學、免疫血清學、免疫標記、免疫組化等多方面技術，不斷發展和完善了一系列細胞免疫檢測技術，用於檢測各類免疫細胞的表面標志（包括抗原及受體）、細胞的活化、增殖、吞噬、殺傷功能、各種細胞因子的活性或含量等方面。這些技術為深入研究和認識機體免疫系統的生理、病理改變，闡明某些疾病的發病機制和臨床診治提供了有用的手段。隨著細胞免疫學的迅猛發展，時有新的細胞免疫檢測技術出現。二十一世紀初期，新發展的項目集中在對有關細胞因子以及細胞受體方面的檢測。1．淋巴細胞轉化試驗。人類淋巴細胞在體外與特異性抗原（如結核菌素）或非特異性有絲分裂原（如植物血凝素，PHA）等一起孵育，T細胞即被激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加，最後導致細胞分裂。在光學顯微鏡下可計數轉化後的淋巴母細胞數，也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR）摻入正在分裂的淋巴細胞，用液閃測定儀來確定摻入量以確定淋巴細胞轉化率。2000年開始出現一種不用同位素，又可用儀器測量的淋巴細胞增殖反應的檢查法，稱為MTT檢測法。MTT是一種甲氮唑鹽，它是細胞線粒體脫氫酶的底物，細胞內的酶可將MTT分解產生藍黑色成分。該產物的多少與活細胞數成正比，結果可用酶標儀(595nm）測量光密度，作為MTT法的指標。2．E-花環法。人類T細胞表面有羊細胞受體(CD2）能與羊紅細胞結合形成玫瑰花樣結構。即將分離液分離出的外周的單個核細胞懸液與羊紅細胞在體外混合，經37℃培養5～10分鍾後放4℃過夜，取細胞懸液計數，外周血淋巴細胞中約70%～80%淋巴細胞結成花環即為T細胞，此法可用來分離T細胞。3．T細胞亞群檢測。4．細胞毒試驗。Tc細胞、NK細胞、LAK細胞、TIL細胞等對其靶細胞有直接的細胞毒（殺傷）作用。抗體制備常用的檢測方法是51Cr（鉻）釋放法，將51Cr-Na2CrO4鹽水溶液與靶細胞（不同的細胞需不同的靶細胞，如NK細胞的靶細胞為K562），於37℃培養1小時左右，51Cr即進入靶細胞，與胞漿結合，洗去游離的51Cr後，即可得到51Cr標記的靶細胞，將待測細胞毒的細胞與51Cr標記的靶細胞混合（比例約為50:1或100:1），靶細胞殺傷越多，釋放到上清液中的游離51Cr就越多，且不能再被其他細胞吸收，用γ射線測量儀檢測上清液中的cpm值，可計算出待檢細胞殺傷活性高低。細胞毒的檢測對腫瘤免疫有較大價值。5．巨噬細胞吞噬功能的測定。將中葯(10%斑蝥）乙醇浸出液浸漬的濾紙（1cm2大小）置於受試者前臂屈側皮膚上，4～5小時後取下濾紙。48小時內皮膚局部可水泡，內含巨噬細胞。取水泡液0.5ml加雞紅細胞懸液0.01ml，37℃經30分鍾後作塗片、染色與鏡檢，計算吞噬百分率及每個巨噬細胞吞噬雞紅細胞的平均數。本試驗有助於腫瘤病情及療效的觀察。6．移動抑制試驗。致敏淋巴細胞與其特異性抗原再次接觸時，可以產生移動抑制因子(MIF）。這種因子可以抑制巨噬細胞和中性粒細胞的移動，使之定位於局部而增強其免疫作用。本試驗用來觀察受檢者淋巴細胞在體外受特異性抗原刺激後，有無MIF產生，以測定機體對某種抗原的特異性細胞免疫反應的功能。7．時間分辨熒光測量技術。時間分辨熒光測量技術(time-resolvedfluorometry,TrF）是一項新型的超微量非放射性分析技術。該技術的敏感性和特異性與放射性核素測量技術相仿，但無放射測量的弊端，故問世雖短，進展卻極為迅速，有取代放射測量之勢。8．細胞因子檢測技術。細胞因子的檢測，2005年起在中醫臨床及實驗室中已廣泛應用。9．細胞受體的檢測。受體是細胞表面標志之一，通過對受體的檢測，可以了解細胞的功能，並為某些疾病的發病機制提供一定的理論依據。
7. DNA甲基化的內容、功能、檢測及其研究方法
DNA甲基化（DNA methylation）
DNA甲基化是最早發現的修飾途徑之一，大量研究表明，DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變，從而控制基因表達。
在甲基轉移酶的催化下，DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基，形成5－甲基胞嘧啶，這常見於基因的5'-CG-3'序列。大多數脊椎動物基因組DNA都有少量的甲基化胞嘧啶，主要集中在基因5』端的非編碼區，並成簇存在。甲基化位點可隨DNA的復制而遺傳，因為DNA復制後，甲基化酶可將新合成的未甲基化的位點進行甲基化。DNA的甲基化可引起基因的失活。
DNA甲基化主要形成5－甲基胞嘧啶（5-mC）和少量的N6-甲基嘌呤（N6-mA）及7－甲基鳥嘌呤（7-mG）
結構基因含有很多CpG 結構, 2CpG 和2GPC 中兩個胞嘧啶的5 位碳原子通常被甲基化, 且兩個甲基集團在DNA 雙鏈大溝中呈特定三維結構。基因組中60%～ 90% 的CpG 都被甲基化, 未甲基化的CpG 成簇地組成CpG 島, 位於結構基因啟動子的核心序列和轉錄起始點。有實驗證明超甲基化阻遏轉錄的進行。DNA 甲基化可引起基因組中相應區域染色質結構變化, 使DNA 失去核酶ö限制性內切酶的切割位點, 以及DNA 酶的敏感位點, 使染色質高度螺旋化, 凝縮成團, 失去轉錄活性。5 位C 甲基化的胞嘧啶脫氨基生成胸腺嘧啶, 由此可能導致基因置換突變, 發生鹼基錯配: T2G, 如果在細胞分裂過程中不被糾正,就會誘發遺傳病或癌症, 而且, 生物體甲基化的方式是穩定的, 可遺傳的。
DNA 甲基轉移酶有兩種: 1) DNM T1, 持續性DNA 甲基轉移酶—— 作用於僅有一條鏈甲基化的DNA 雙鏈, 使其完全甲基化, 可參與DNA 復制雙鏈中的新合成鏈的甲基化,DNM T1 可能直接與HDAC (組蛋白去乙醯基轉移酶) 聯合作用阻斷轉錄; 2)DNM T3a、DNM T3b從頭甲基轉移酶, 它們可甲基化CpG, 使其半甲基化, 繼而全甲基化。從頭甲基轉移酶可能參與細胞生長分化調控, 其中DNM T3b在腫瘤基因甲基化中起重要作用。
DNA 去甲基化有兩種方式: 1) 被動途徑: 由於核因子N F 粘附甲基化的DNA , 使粘附點附近的DNA不能被完全甲基化, 從而阻斷DNM T1 的作用; 2) 主動途徑: 是由去甲基酶的作用, 將甲基集團移去的過程。在DNA 甲基化阻遏基因表達的過程中, 甲基化CpG 粘附蛋白起著重要作用。雖然甲基化DNA 可直接作用於甲基化敏感轉錄因子E2F、CREB、A P2、CM ycöM yn、N F2KB、Cmyb、Ets, 使它們失去結合DNA 的功能從而阻斷轉錄, 但是, 甲基化CpG 粘附分子可作用於甲基化非敏感轉錄因子(SP1、CTF、YY1) , 使它們失活, 從而阻斷轉錄。人們已發現5 種帶有恆定的甲基化DNA 結合域(MBD ) 的甲基化CpG 粘附蛋白。其中M ECP2、MBD1、
MBD2、MBD3 參與甲基化有關的轉錄阻遏;MBD1 有糖基轉移酶活性, 可將T 從錯配鹼基對TöG 中移去,MBD4 基因的突變還與線粒體不穩定的腫瘤發生有關。在MBD2 缺陷的小鼠細胞中, 不含M ECP1 復合物, 不能有效阻止甲基化基因的表達。這表明甲基化CpG 粘附蛋白在DNA 甲基化方式的選擇, 以及DNA 甲基化與組蛋白去乙醯化、染色質重組相互聯系中的有重要作用。
8. 功能測試常用方法都有哪些
一，頁面鏈接檢查；二，相關性檢查；三，檢查按鈕的功能是否正確；四，字元串長度檢查；五，字元類型檢查；六，標點符號檢查；七，中文字元的處理；八，檢查帶出信息的完整性；九，信息重復；十，檢查刪除功能；十一，檢查添加和修改是否一致；十二，檢查修改重名；十三，檢查多次使用back鍵的情況；十四，搜索功能檢查；十五，輸入信息位置；十六，上傳下載文件檢查；十七，必填項檢查；十八，快捷鍵檢查；十九，回車鍵檢查。
9. 基因功能研究方法(細胞水平功能獲得、功能+缺失方法、蛋白質相互作用)
摘要 您好，很高興回答你的問題