分光光度計計算方法

① 分光光度計測樣品含量，標准曲線得出來了，樣品的吸光度和濃度怎麼算

1、樣品的濃度，必須按照測定方法標準的結果計算式進行計算：
2、一般來說結果計算式： c = m/V =[（ A-Ao）/b]/V
式中： c -- 樣品測定結果（mg/L）
（ A-Ao） -- 樣品測定吸光度減空白吸光度
b -- 標准曲線 的回歸方程（Y = a + b X） 的斜率
V -- 樣品 取樣體積（ml）

② 誰能告訴我可見分光光度計的計算公式和計算方法

答「；
【】可見分光光度法的計算：求標准曲線的回歸方程；將樣品的吸光度代入回歸方程,可以得到其質量（ug）
【】質量（ug）數除以取樣體積,得到樣品檢測結果

③ 我想用分光光度計測試眼鏡片的黃色指數，公式裡面需要用到X、Y、Z三刺激值，這三個值怎麼計算

光譜儀可以測出RGB的光譜分布
然後將光譜分布加權對應波長的標准光譜三刺激值（常數）就是對應的RGB光譜三刺激值。
最後加總上述RGB對應的XYZ光譜三刺激值就是你要的X Y Z

④ 簡述721分光光度計的使用方法

721型分光光度計的使用方法為：

1、檢查儀器各調節鈕的起始位置是否正確，接通電源開關，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處於「0」位，預熱20min後，再選擇須用的單色光波長和相應的放大靈敏度檔，用調「0」電位器調整電表為T=0%。

2、蓋上樣品室蓋使光電管受光，推動試樣架拉手，使參比溶液池（溶液裝入4/5高度，置第一格）置於光路上，調節100%透射比調節器，使電表指針指T=100%。

3、重復進行打開樣品室蓋，調0，蓋上樣品室蓋，調透射比為100%的操作至儀器穩定。

4、蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置於光路上，讀出吸光度值。讀數後應立即打開樣品室蓋。

5、測量完畢，取出比色皿，洗凈後倒置於濾紙上晾乾。各旋鈕置於原來位置，電源開關置於「關」，拔下電源插頭。

6、放大器各檔的靈敏度為：「l」 ×1倍；「2」×10倍；「3」×20倍，靈敏度依次增大。由於單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調到T= 100%處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩定性。

(4)分光光度計計算方法擴展閱讀

使用721分光光度計的注意事項:

1、該儀器應放在乾燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作台上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。

2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。

3、在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然後再按通電源開關。

4、改變靈敏度檔後，應重新調「0」和「100」。

⑤ 請問分光光度法測物質含量的原理及方法是什麼

分光光度計原理大致是採用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品後，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
根據朗伯比爾定律單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度；
I。為入射的單色光強度；
I 為透射的單色光強度；
T 為物質的透射率；
k 為摩爾吸收系數；
L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長
c 為物質的濃度
物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數後可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身並沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色後再測定,故又稱比色分析。由於顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標准品或對照品同時操作。

⑥ 光度如何計算

光度是不是吸光度？
如果是，就按照朗伯比爾定律計算：A=kbc
其中A為吸光度，k為摩爾吸光系數，b為液層厚度，c為溶液的摩爾濃度。通常測定吸光度是為了確定已知物質的未知濃度。
一般吸光度不是通過計算得到的，而是通過對比得到的。即：先用已知濃度c(已知)的標准液確定好該儀器(分光光度計)的最大吸收波長和A(標准)的kb是多少，然後測定未知濃度的A(未知)，通過對比即可得知c(未知)。

⑦ 分光光度計怎麼計算純度

1、測定的物質要稱量其質量數G；
2、測定的物質中的某個組分的純度，通過分光光度法求出其質量m；
3、計算純度= （m/G) x100%

⑧ 分光光度計的工作原理

分光光度計的基本工作原理是基於物質對光（對光的波長）的吸收具有選擇性，不同的物質都有各自的吸收光帶。

所以，當光色散後的光譜通過某一溶液時，其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下，溶液中物質的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關系，即符合比爾定律。

T = I/Io lg（Io/I）=εcb

式中，T為透過率，Io為入射光強度，I為透射光強度，A為消光值（吸光度），ε為吸收系數，b為溶液的光徑長度，c為溶液的濃度。從以上公式可以看出，當入射光、吸收系數和溶液厚度一定時，透光率是根據溶液的濃度而變化的。

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用於核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

注意事項：

1、該儀器應放在乾燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作台上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。

2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然後再按通電源開關。

3、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須於「0」刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。

⑨ 紫外可見分光光度計怎麼由吸光度計算含量

根據朗伯比爾定律得出：當一束平行單色光通過一定液層厚度的有色溶液時，由於溶質吸收了光能，光的強度就會減弱。溶液濃度越大，液層越厚，入射光越強，光被吸收的就越多。

如果用公式表示的話，就可以表示為表示為：A=E*C*L（A為吸光度，C為溶液濃度，L為液層厚度）。E是物質在一定波長下的特徵

常數，與對光吸收的靈敏度呈正相關。該公式適用於有色溶液和均勻非散射的吸光物質（如：固、液、氣）。在進行含量測定的時候，我們往往選擇被測物質的最大吸收波長來作為使用波長，以防止外界干擾。於是，我們可以根據公式可以計算測定管中物質的含量，過程如下：

A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2

A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)

由於標准液和待測液中的物質相同，故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因為標准液和待測液的體積相等，物質含量m=C*V*M（M為相對分子質量，V為體積）故m2=（A2/A1)*m1所以溶液中物質的含量m2。

(9)分光光度計計算方法擴展閱讀：

在分光光度分析中，比爾定律是一個有限的定律，其成立條件是待測物為均一的稀溶液、氣體等，無溶質、溶劑及懸濁物引起的散射；入射光為單色平行光。

導致偏離朗伯-比爾定律的原因很多，但基本上可分為物理和化學兩個方面。物理方面主要是入射光的單色性不純所造成的；化學方面主要是由於溶液本身化學變化造成的。

比爾定律在有化學因素影響時不成立。解離、締合、生成絡合物或溶劑化等會對比爾定律產生偏離。離解是偏離朗伯-比爾定律的主要化學因素。溶液濃度的改變，離解程度也會發生變化，吸光度與濃度的比例關系便發生變化，導致偏離朗伯-比爾定律。

溶液中有色質點的聚合與締合，形成新的化合物或互變異構等化學變化以及某些有色物質在光照下的化學分解、自身的氧化還原、干擾離子和顯色劑的作用等，都對遵守朗伯-比爾定律產生不良影響。

來自出射狹縫的光，其光譜帶寬度大於吸收光譜帶時，則投射在試樣上的光就有非吸收。這不僅會導致靈敏度的下降，而且使校正曲線彎向橫坐標軸，偏離朗伯-比爾定律。非吸收光越強，對測定靈敏度影響就越嚴重。並且隨著被測試樣濃度的增加，非吸收光的影響增大。當吸收很小時，非吸收光的影響可忽略不計。