A. 雙縮脲試劑怎麼使用
要
雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A(NaOH)和雙縮脲試劑B(CuSO4)兩種試劑組成(雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液,雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液),雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
具體方法是:
先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,振盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑B,振盪均勻。如果組織里含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-CONH-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色。
在使用雙縮脲試劑時候,必須注意,必須是先加0.1 g/mL氫氧化鈉溶液,再加0.01 g/mL硫酸銅的水溶液。(若先加入硫酸銅[CuSO4]溶液,再加入氫氧化鈉[NaOH]溶液,則無法充分製造鹼性環境,此時CuSO4會與NaOH發生復分解反應,生成藍色氫氧化銅[Cu(OH)2]沉澱,導致現象不清,無法較好地達到實驗目的.)
祝你學習進步!
B. 雙縮脲試劑的使用方法
先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,振盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑B,搖盪均勻。如果組織里含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。 雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。 雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-CONH-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色。