分離黃酮類化合物最常用的方法是

Ⅰ 活性成分總黃酮的提取方法有哪些

總黃酮的提取方法
1、 熔劑法
熱水提取法、鹼性水或鹼性稀醇提取法、有機溶劑提取法 2、
2、微波提取法
微波提取是利用不同結構的物質在微波場中吸收微波能力的差異，使基體物質中的某些區域或提取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使被提取物質從基體或體系中分離，進入介電常數較小，微波吸收能力相對差的提取劑[1]。這種方法的優點是對提取物具有較高的選擇性、提取率高、提取速度快、溶劑用量少、安全、節能、設備簡單[2]。 2.2 超聲波提取法
用超聲波提取法提取黃酮類物質，是目前比較新的方法。原理是利用超聲波在液體中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，還利用其次效應，如機械振動、擴散、擊碎等，使其加速被提取成分的擴散、釋放。超聲波提取法具有設備簡單，操作方便，提取時間短，產率高，無需加熱，同時有利於保護熱不穩定成分，省時，節能，提取率高的優點。
3、 超臨界流體萃取法
超臨界流體萃取技術是利用超臨界流體處於臨界溫度和臨界壓力以上，兼有氣體和液體的雙重特點，對物質具有良好的溶解能力，從而作溶劑進行萃取分離。可做超臨界流體的物質很多，一般為低分子量的化合物，如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。目前多採用CO2 做萃取劑，因為它具有密度大、溶解能力強、臨界壓力適中、臨界溫度接近常溫、不影響萃取物的生理活性、無毒無味、化學性質穩定、生產過程中容易回收、無環境污染、價格便宜等一系列優點。但單一的CO2作萃取劑只對低極性、親脂性化合物有較強的溶解能力，對大多數極性較強的組分則不起作用，因此，在其中加入夾帶劑，通過影響溶劑的密度和溶質與夾帶劑分子間的作用力來影響溶質在二氧化碳流體中的溶解度和選擇性[15]。超臨界流體萃取技術有許多傳統分離技術不可比擬的優點：過程容易控制、達到平衡的時間短、萃取效率高、無有機溶劑殘留、對熱敏性物質不易破壞等[16]。但它所需要的設備規模較大，技術要求高，投資大，安全操作要求高，難以用於較大 規模的生產。
4、 酶法提取
酶解法適用於被細胞壁包圍的黃酮類物質，利用酶反應的高度專一性，破壞細胞壁，使其中的黃酮類化合物釋放出來。黃劍波等[22]採用纖維素酶輔助法從甜茶中提取黃酮類化合物，黃酮類物質的提取率為91%，提取純度為54%。王悅等[23]對桔皮細胞進行游離酶、固定化酶和常規法提取，黃酮得率分別是1.43%，0.94% 和0.79%，和傳統的方法相比，游離酶法的總黃酮得率提高了81%。
5、雙水相提取法
雙水相提取技術是瑞典Per Albersson首先發現並研究 的一種技術，雙水相萃取法屬於液- 液萃取，當物質進入雙 水相體系後，由於表面性質、電荷作用和各種力的作用，溶 液環境的影響，其在上、下相中的濃度不同，即各成分在兩 相間選擇性分配，從而達到萃取的目的。由於雙水相體系分 相快、使用溫度低、容易操作、無污染、提取率高，因此成 為黃酮化合物富集分離的一種有效方法。張春秀等[24]取一 定量的銀杏葉浸提液，加到PEG1500/ 磷酸鹽體系雙水相 系統中，則黃酮類化合物進入上相PEG，從而將黃酮類化合 物分離，提取率可達98.2%。
6、 半仿生提取法
半仿生提取法是將整體葯物研究法與分子葯物研究法相結合，模擬口服給葯後葯物經胃腸道轉運的環境，為經消化道給葯的中葯制劑設計的一種新的提取工藝。這種提取方法的特點是可以提取和保留更多的有效成分，能縮短生產周期、降低成本。
7、膜分離法
膜分離法主要有超濾、微濾、納濾和反滲透等，其中超濾法是膜分離的代表，它是唯一能用於分子分離的過濾方法，是以多孔性半透膜為分離介質，依靠薄膜兩側壓力差作為推動力來分離溶液中不同分子量的物質。由於大多數黃酮類化合物的分子量在1000 以下，而非有效成分如大多數的多糖、蛋白質等分子量多在50000 以上，因而使用超濾能有效去除蛋白質、多肽、大分子色素、澱粉等，達到除菌、除熱原、提高葯液澄明度以及提高有效成分含量等目的。這種方法操作簡便、不需要加熱、不損壞黃酮類化合物，提取效果好、超濾裝置可反復使用。於濤等[26]研究了銀杏葉中黃酮類化合物的提取過程及工藝，使用超濾技術對粗提的產品進行精製，對影響超濾的工藝條件進行了考察，超濾後產品中黃酮質量分數達到33.99%。
8、 熱壓流體萃取法
熱壓流體萃取法是一種快速、環保、便宜、有效地萃取生物活性物質的方法。Chaorui Chen等[27]採用熱壓流體萃取法從巴西蜂膠中提取了7種黃酮類化合物，結果表明，通過熱壓水萃取的樣品中當存在表面活性劑時萃取物的固體含量更高，當使用熱壓脂溶萃取時，7種黃酮類化合物的含量在脂溶萃取中超過了水溶萃取。KairHartonen等[28]用熱壓水萃取法從白楊中萃取了黃酮類化合物，考察了萃取時間、溫度和壓力等因素的影響，並與超聲波萃取、高速逆流色譜做了比較，結果表明用熱壓水萃取法在150℃萃取35min效 果最好。
2.9 高壓液相提取法
Ying Zhang等[29]通過高壓液相萃取法從魚腥草中萃取了黃酮類化合物，研究了乙醇濃度、流速、溫度和壓強等因素的影響，並與熱浸法和超聲波輔助萃取法進行對比，發現高壓液相萃取法提取效果較好，當使用50% 乙醇，溶劑流速為1.8mL/min，溫度為70℃，壓強為8MPa 時，黃酮類化合物的得率和濃度可以達到3.152% 和23.962%

Ⅱ 游離黃酮和蒽醌的提取都可以採用什麼方法

離。
二 分離方法：
1 蒽醌苷類和游離蒽醌衍生物的分離：用分步提取法（如前述） 2 游離蒽醌衍生物的分離：可選用分步結晶法、梯度pH萃取法或層析法進行。
梯度pH萃取法是分離游離蒽醌衍生物的經典方法：
1.局限性
2.原理 性質相似，酸性差別不大的混合物不適用
3 有些蒽酮雖然存在酚羥基，但在稀鹼溶液中較相應的蒽醌難溶，
如大黃酚蒽酮-9，故蒽醌衍生物的苯提取液用極稀的NaOH液萃取，可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中。 示例
色譜法在蒽醌苷元分離中的應用：
一般先用經典方法（如梯度pH萃取）對其進行初步分離，再結合柱色譜法或制備性TLC法作進一步的分離，多用硅膠吸附色譜，而氧化鋁一般不用，也常用聚醯胺作為柱色譜的填料。
•
三、 黃酮類化合物的提取與分離
（一）提取
黃酮甙類以及極性稍大的甙元（如羥基黃酮等），一般可
用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。一些多糖甙類可用沸水提取。在提取花青素類化合物時，可加入少量酸（0.1%鹽酸，應當慎用，避免發生水解）。

劑進行提取。對得到的粗提物可進行下列精製處理，常用方法有：

（一）溶劑萃取法 利用黃酮類化合物與混入的雜質極性不同，選用不同溶劑進行地萃取可達到精製純化目的。例如植物葉子的醇浸液，可用石油醚處理，以便除去葉綠素、胡蘿卜素等脂溶性色素。而某些葯料水溶液則可加入多倍量濃醇，以沉澱除去蛋白質、多糖類等水溶性雜質。
有時溶劑萃取過程也可以用逆流分配法連續進行。常用的溶劑系統有：水-醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。
溶劑萃取過程在除去雜質的同時，往往還可以收到分離甙和甙元或極性甙元與非極性甙元的效果。
（二）鹼提取酸沉澱法 黃酮甙類雖有一定極性，可溶於水，但卻難溶於酸性水，易溶於鹼性水，故可用鹼性水提取，再於鹼水提取液中加入酸，黃酮甙類即可沉澱析出。此法簡便易行，如蘆丁、橙皮甙、黃芩甙的提取都應用了這個方法。
茲以從槐米中提取蘆丁為例說明該法的操作過程。 槐米（槐樹Sophora japonica L. 花蕾）加約6倍量水，煮沸，在攪拌
下緩緩加入石灰乳至pH8~9，在此pH條件下微沸20~30分鍾，趁熱油濾，殘渣同上再加4倍水煎1次，乘熱抽濾。合並濾液在60~70℃下，用濃鹽酸調至pH為5，攪勻，靜置24小時，抽濾。沉澱物水洗至中性，60℃乾燥得蘆丁粗品，於水中重結晶，70~80℃乾燥得
蘆丁純品。
在用鹼酸法進行提取純化時，應當注意所用鹼液濃度不宜過高，以免在強鹼性下，尤其加熱進破壞黃酮母核。在加酸酸化時，酸性也不宜過強，以免生成（金羊）鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產品收率。
當葯料中含有大量果膠、粘液等不溶性雜質時，如花、果類葯
材，宜用石灰乳或石灰水代替其它鹼性水溶液進行提取，以使上述含羥基的雜質生成鈣鹽沉澱，不致溶出。這也有利於黃酮類化合物的純化處理。
（三）碳粉吸附法 主要適於甙類的精製工作。通常，在
植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，攪拌，靜置，直至定性檢查上清液無黃酮反應時為止。過濾，收集吸甙炭末，依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液進行洗脫，各部分洗脫液進行定性檢查（或用PPC鑒定）。通過對Baptisia lecontei 中黃酮類化合物的研究證明，大部分黃酮甙類可用7%酚/水洗下。洗脫液經減壓蒸發濃縮至小體積，再用乙醚振搖除去殘留的酚，餘下水層減壓濃縮即得較純的黃酮甙類成分。

Ⅲ 黃酮類化合物的分離

較常用的分離方法有： （一）柱層析法 分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚醯胺及纖維素粉等。此外，也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。 1.硅膠柱層析： 此法應用范圍最廣，主要適於分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙醯化）的黃酮及黃酮醇類。少數情況下，在加水去活化後也可用於分離極性較大的化合物，如多羥基黃酮醇及其苷類等。 2. 聚醯胺柱層析： 對分離黃酮類化合物來說，聚醯胺是較為理想的吸附劑。其吸附強度主要取決於黃酮類化合物分子中羥基的數目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚醯胺之間形成氫鍵締合能力的大小。 聚醯胺柱層析可用於分離各種類型的黃酮類化合物，包括苷及苷元、查耳酮與二氫黃酮等 3.葡聚糖凝膠(Sephadex gel)柱層析： 對於，主要用兩種型號的凝膠：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。 葡聚糖凝膠分離黃酮類化合物的機理是： 分離游離黃酮時，主要靠吸附作用。凝膠對黃酮類化合物的吸附程度取決於游離酚羥基的數目。但分離黃酮苷時，則分子篩的屬性起主導作用。在洗脫時，黃酮苷類大體上是按分子量由大到小的順序流出柱體。 分離游離黃酮主要是吸附作用，極性小到大順序洗脫。 分離黃酮苷類，主要是分子篩作用，分子大到小順序洗脫。 總的洗脫順序：糖多的苷到糖少的苷到游離苷元（極性小到大） 葡聚糖凝膠柱層析中常用的洗脫劑有： 鹼性水溶液（如0.1mol/L NH4OH），含鹽水溶液(0.5mol/L NaCl等)。 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。 其它溶劑：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。 二）梯度pH萃取法 梯度pH萃取法適合於酸性強弱不同的黃酮苷元的分離。根據黃酮類苷元酚羥基數目及位置不同其酸性強弱也不同的性質，可以將混合物溶於有機溶劑（如乙醚）後，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2% NaOH及4%NaOH水溶液萃取，來達到分離的目的。 酸性:7，4-二OH溶於5%NaHCO3液 ) 7-或4-OH （5%Na2CO3液） 一般OH（0.2%NaOH） 5-OH （4% NaOH液） 具黃酮類化合物與鉛鹽生成的沉澱，濾集後按常法懸浮在乙醇中，通入H2S進行復分解，濾除硫化鉛沉澱，濾液中可得到黃酮類化合物。但初生態的PbS沉澱具有較高的吸附性，因此現多不主張用H2S脫鉛，而用硫酸鹽或磷酸鹽，或用陽離子交換樹脂脫鉛。 有鄰二酚羥基的黃酮可與硼酸絡合，生成物易溶於水，可與不具上述結構的黃酮類化合物相互分離。

Ⅳ 黃酮類化合物有哪些提取方法蘆丁提取有哪些方法

有鹼法酸沉法,水提醇沉法,醇提水沉,浸漬法等,蘆丁在教課書就有,有鹼法酸沉法

Ⅳ 分離黃酮類化合物的洗脫條件是如何確定的

分離黃酮類化合物的洗脫條件確定方式：極性差異、酸性強弱、分子大小和特殊結構，其中常用的洗脫劑：鹼性水溶液、含鹽水溶液、醇及含水醇。

主要是利用吸附作用，游離酚羥基數目越多，則吸附力越強，越難洗脫。化合物靠分子篩，洗脫時按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。

分離原理分析

1、吸附原理：一般認為是通過分子中的醯胺羰基與酚類、黃酮類化學物的酚羥基，或醯胺鍵上的游離氨基與醌類、脂肪羧酸形成氫鍵締合而產生吸附。

2、吸附強弱的規律：形成氫鍵的基團數目越多，則吸附能力越強。成鍵位置對吸附力也有影響。形成分子內氫鍵者，其在聚醯胺上的吸附即相應減弱。

Ⅵ 柑橘屬中黃酮類化合物的提取分離

柑橘屬類黃酮多以極性較大的糖苷形式存在,目前廣泛採用極性較大的有機溶劑進行浸提。對胡柚皮的提取工藝表明,在乙醇濃度90%,料液比1:5,提取2h,提取溫度40-60℃時類黃酮提取率較高。研究化橘紅用8倍量80%乙醇迴流提取3次,1·5 h/次,得到較大的提取率。研究枳實葯材中總黃酮提取工藝,得到60%的乙醇,8倍量,迴流提取2次,每次1·5 h。近年來微波、超聲波輔助提取法應用於植物細胞的破壁,有效地提高了有機物的吸收率,縮短提取時間,提高效率。對於柑橘屬類黃酮的分離純化,目前應用最廣的為HPLC、柱層析、薄層層析等方法。近年來採用超臨界CO2萃取也獲得了純度較高的類黃酮。同時採用樹脂提取技術也得到了很好的應用,由於樹脂穩定性好、再生簡單等優點,也是一種有效的黃酮類物質分離純化材料,柚皮黃酮經大孔樹脂純化後總黃酮含量達到39·67%,回收率為62·48%。

Ⅶ 提取黃酮類化合物發現物質不融於乙醇,得到的量很小很小，可以換用什麼溶劑提取

關於黃酮類化合物的提取方法。

（1）溶劑法

乙醇和甲醇是最常用的黃酮化合物提取溶劑。利用黃酮類化合物與混入的雜質極性不同，選用不同溶劑進行萃取可達到精製純化的目的。

（2）鹼提酸沉法

酚羥基黃酮鹼性水或鹼性稀醇（如50%的乙醇）浸出浸出液經酸化黃酮類化合物沉澱析出，或用有機溶劑萃取。

蘆丁、橙皮苷、黃芩苷均可用此法提取。

常用的鹼性水溶液為稀氫氧化鈉溶液和石灰水。

注意：

①鹼濃度不宜過高，以免在強鹼下加熱時破壞黃酮類化合物母核。

②加酸酸化時，酸性也不宜過強，以免生成（釒羊）鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產品收率。

③當分子中有鄰二酚羥基時，應加硼酸保護。

黃酮類化合物的提取，主要是根據被提取物的性質、伴存的雜質以及要用部位等來選擇適合的提取溶劑。大多數游離的黃酮類化合物宜用極性較小的溶劑，如用氯仿，乙醚，乙酸乙酯等提取，而對多甲基黃酮，甚至可用苯進行提取。黃酮苷類以及極性較大的游離黃酮，一般可用乙酸乙酯，丙酮等。

具體選擇還要看樓主所要提取物質的具體結構和性質！

Ⅷ 怎樣把植物中的黃酮分離出來

用乙醇、乙酸乙酯等有機溶劑先把總黃酮提取出來，然後石油醚，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取；再將各個萃取相上聚乙醯胺柱，結合薄層色譜進行分離。當然柱層析要多次。