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什麼是篩查抗體最常用的方法

發布時間:2022-06-09 21:36:52

① 自身抗體的檢測方法哪些

1、抗核抗體檢測

抗核抗體是一組將自身真核細胞的各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱,主要是IgG,其次是IgM和IgA,無器官和種屬特異性。ANA在大多數自身免疫性疾病中均可呈陽性,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA檢測在臨床自身免疫病診斷與鑒別診斷中是一個重要的篩查試驗。

2、類風濕因子

類風濕因子是變性lgG刺激機體產生的一種自身抗體,主要存在於類風濕關節炎患者的血清和關節液內。主要為lgM型,也有lgG、lgA、lgD和IgE型。

3、抗中性粒細胞胞漿抗體

抗中性粒細胞胞漿抗體是指與中性粒細胞及單核細胞胞漿成分發生反應的抗體。當中性粒細胞受抗原刺激後,胞漿中的α-顆粒釋放蛋白酶-3、髓過氧化物酶等物質,刺激機體而產生ANCA。

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自身抗體的產生原因:

人體的生長、發育和生存有完整的自身免疫耐受機制的維持,正常的免疫反應有保護性防禦作用,即對自身組織、成分不發生反應。—旦自身耐受的完整性遭到破壞,則機體視自身組織、成分為「異物」,而發生自身免疫反應,產生自身抗體。

正常人體血液中可以有低滴度的自身抗體,但不會發生疾病,但如果自身抗體的滴度超過某—水平,就可能對身體產生損傷,誘發疾病。自身免疫性疾病中有許多自身抗體,其中最重要的是抗核抗體。

② 可以用於進行hiv抗體檢測的有哪些

1、人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法)

雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)用於體外,肉眼觀察,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,用於幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本品僅用於無償獻血員現場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,需進行進一步篩查確認。

2、InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑

InstantCHEKTM-HIV1+2為一種快速、簡單、靈敏的檢驗方法,用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。



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HIV1/2抗體篩查方法包括ELISA法、化學發光法或免疫熒光試驗、快速檢測(斑點ELISA和斑點免疫膠體金或膠體硒快速試驗、明膠顆粒凝集試驗、免疫層析試驗)等,確證試驗常用的方法是免疫印跡法。

篩查試驗呈陰性反應可出具HIV1/2抗體陰性報告,見於未被HIV感染的個體,但處於窗口期的新近感染者篩查試驗也可呈陰性反應。

若呈陽性反應,應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,如兩種試劑復測均呈陰性反應,則為HIV抗體陰性;如有一種或兩種試劑呈陽性反應,需進行HIV抗體確證試驗。確證試驗無HIV特異性條帶產生,報告HIV1/2抗體陰性。

③ 為什麼雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法

1)將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。 2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。 洗滌除去其他未結合物質。 3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合 的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。 4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。 在臨床檢驗中,此法適用於檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、 AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用於包被固相載體和制備酶結合 物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動 物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用於包被固相 載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標 抗體一起保溫反應,作一步檢測。 在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標 抗體結合,而不再形成夾心復合物。類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象,此時反應 後顯色的吸光值(位於抗原過剩帶上)與標准曲線(位於抗體過剩帶上)某一抗原濃度的 吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測讀,所得結果將低於實際的含量,這種現 象被稱為鉤狀效應(hook effect),因為標准曲線到達高峰後呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重 時,反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常 增高的物質(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,應注意可測范圍的最高值。用 高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。 假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可 用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型 問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應 性,這也是用單抗作夾心法應注意的問題。 雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF,它可充當抗原成份,同時與固相抗體和酶標抗體結合,表現出假陽性反應。採用F(ab')或Fab片段作酶結合物的試劑,由於去除了Fc段,從而消除RF的干擾。 雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項考核指標。 雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。

④ 艾滋病有什麼檢查方法

艾滋病有幾種檢測方法?艾滋病的檢測方法有很多種,目前應用最廣泛的當屬艾滋病抗體檢測,其他有P24抗原檢測、病毒載量檢測、CD4+T淋巴細胞檢測等等,因為艾滋病抗體一經出現終生攜帶,只有抗體檢測能夠用於艾滋病診斷,艾滋病抗體檢測也就成為了應用最廣泛的一種艾滋病檢測方法。
國內外艾滋病抗體檢測方法有哪些?目前國外用於 HIV 抗體篩查的方法很多,根據檢測原理不同分為酶聯免疫吸附法、凝集法和層析法,可對血液、唾液和尿液標本進行常規或快速檢測。
常用的艾滋病抗體檢測方法有哪些?在實際工作中常用的有酶聯免疫吸附試驗( ELISA )、明膠凝集試驗和各種快速診斷試劑。
自 1985 年第一代 ELISA 試劑問世以來,隨著醫學技術的飛速發展,包被抗原已從一代的全病毒裂解物發展為目前以基因重組和多肽抗原包被和標記、有著良好敏感性和特異性的三代雙抗原夾心試劑,檢測亞型包括 HIV-1 、 HIV-2 和 HIV-1 型的 O 亞型,窗口期由 10 周縮短至 3-4 周。為避免窗口期傳染,荷蘭、法國等國已研製出第四代以重組的多肽抗原和抗 P24 抗體包被的雙抗原夾心法試劑盒,可同時檢測抗原抗體,使窗口期縮短了 2-3 周,但其臨床價值有待評估。
按《規范》要求,我國采供血機構進行血液篩查和各醫療衛生機構常規篩查檢測宜採用 ELISA 法,自采自供血的單位必須進行 HIV 抗體檢測,在尚未建立艾滋病篩查實驗室的偏遠地區或大醫院急診手術前可由經過培訓的技術人員在規定的場所用快速試劑進行血液篩選。對用 ELISA 試劑或快速診斷試劑進行的篩查實驗如呈陰性反應,即報告 HIV 抗體陰性;對呈陽性反應的標本,篩查實驗室應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,如兩種試劑復測均呈陰性反應,則報告 HIV 抗體陰性;如均呈陽性反應,或一陰一陽,需送艾滋病確認實驗室進行確認。篩查試劑必須是 HIV-1/2 混合型、經國家葯品監督管理局( SDA )注冊批准、批批檢合格、臨床評估質量優良、在有效期內的試劑。
艾滋病抗體確證實驗方法:
HIV 抗體篩查呈陽性反應的標本由於存在假陽性的可能,必須做確認試驗。國際上有 3 種確認試驗方法,包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗及免疫熒光試驗,目前以免疫印跡試驗最為常用。確認試劑必須經 SDA 注冊批准。免疫印跡試劑有 HIV-1/2 混合型和單一型

⑤ 免疫學檢驗最常用的方法拜託各位了 3Q

以下是幾種常用的免疫學技術: 1.免疫熒光技術 免疫熒光技術是利用熒光素標記的抗體(或抗原)檢測組織、 細胞或血清 中的相應抗原(或抗體)的方法。由於熒光抗體具有安全、 靈敏的特點,因此已 廣泛應用在免疫熒光檢測和流式細胞計數領域。 根據熒光素標記的方式不同,可 分為直標熒光抗體和間標熒光抗體。 間標熒光抗體中一抗並不直接連接熒光素, 而是先將一抗結合到蛋白,然後帶有熒光素的二抗再結合至一抗。 通過二抗的結 合,能將信號進行放大,因此能在一定程度上提高檢測的靈敏度, 但是隨之帶來 的高背景也降低了檢測的特異性。近年來, 隨著熒光素和熒光檢測技術的不斷進 步,熒光檢測的靈敏度已經接近同位素檢測的水平, 直接標記的熒光抗體逐漸取 代間接標記抗體。這些標記了熒光素的抗體直接結合至抗原, 大大提高了檢測的 特異性,使檢測的結果更加准確可靠。熒光檢測技術的發展, 使得免疫熒光技術 在傳染病診斷上有廣泛的用途,如在細菌、病毒、 螺旋體感染的疾病,檢查IgM 抗體,做為近期接觸抗原的標志。 利用單克隆熒光直接標記抗體鑒定淋巴細胞的 亞類。通過流式細胞儀,針對細胞表面不同抗原, 可以同時使用多種不同的熒光 抗體,對同一細胞進行多標記染色。 2.放射免疫檢測 放射免疫檢測技術是目前靈敏度最高的檢測技術, 利用放射性同素標記抗 原(或抗體),與相應抗體(或抗原)結合後, 通過測定抗原抗體結合物的放射 性檢測結果。放射性同位素具有pg 級的靈敏度,且利用反復曝光的方法可對痕 量物質進行定量檢測。 但放射性同位素對人體的損傷也限制了該方法的使用。 3.酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 酶聯免疫檢測是目前應用最廣泛的免疫檢測方法。 該方法是將二抗標記上 酶,抗原抗體反應的特異性與酶催化底物的作用結合起來, 根據酶作用底物後的 顯色顏色變化來判斷試驗結果,其敏感度可達ng 水平。常見用於標記的酶有辣 根過氧化物酶(HRP)、鹼性磷酸酶(AP)等。 由於酶聯免疫法無需特殊的儀器, 檢測簡單,因此被廣泛應用於疾病檢測。常用的方法有間接法、 夾心法以及BAS -ELISA。間接法是先將待測的蛋白抱被在孔板內, 然後依次加入一抗、標記了 酶的二抗和底物顯色,通過儀器(例如酶標儀)定量檢測抗原。 這種方法操作簡 單但由於高背景而特異性較差。目前已逐漸被夾心法取代。 夾心法利用二種一抗 對目標抗原進行捕獲和固定, 在確保靈敏度的同時大大提高了反應的特異性。近 年來,抗原的定量檢測技術也不斷推陳出新。近年來, 在夾心法ELISA 的基礎上, 開發了多抗原檢測試劑盒, 能同時檢測微量液相樣本中多個抗原含量。這項技術 的應用大大縮短了診斷的時間,提高診斷的可靠性和及時性。 4.免疫金膠體技術 膠體金技術經過30 多年的發展到現在已日趨成熟,該方法是將二抗標記上 膠體金顆粒,利用抗原抗體間的特異性反應, 最終將膠體金標記的二抗吸附於滲 濾膜上,此方法簡單,快速,廣泛應用於臨床篩查。

⑥ 指出ELISA有哪幾種常用方法各種方法在操作上有什麼異同

⑦ 血型抗體篩查試驗最可靠的方法是

1D抗球蛋白法 ---臨床用的最多的是微板凝膠抗球蛋白法,准確方便可靠
2B垂體瘤 至於引起的是甲亢還是甲減,關鍵在於垂體瘤引起的哪種激素升高,正反饋激素還是 負反饋激素

⑧ 艾滋病抗體的檢查方法

艾滋病病毒抗體檢測
艾滋病病毒抗體檢測:檢測血液中的艾滋病病毒抗體是目前最常用的檢測艾滋病病毒感染的實驗室方法,一般要經過兩個步驟:首先做初篩試驗,如果為陽性,再做確認試驗,確認試驗陽性才可診斷為艾滋病病毒感染。
常用的方法有:
1病原檢測病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大,且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄-PCR)可用於臨床診斷。
2 抗體檢測血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍,可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
3 確證試劑篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot(WB),由於該法相對窗口期較長,靈敏度稍差,而且成本高昂,因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高,WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相對簡單,整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果,而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准,但不作為血液合格的標准。
4篩檢試驗篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查,因此要求操作簡便,成本低廉,而且靈敏、特異。目前世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA,還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性,操作簡單,僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用,特別適合於試驗室大規模篩檢使用。顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便,成本低廉的檢測方法,該方法結果可通過肉眼判定,靈敏度很高,特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用,缺點是必須使用新鮮樣品,特異性較差。80年代後期發展起來的斑點印跡檢測(Dot-blot assay)是一種快速ELISA(Rapid ELISA)方法,這種方法操作極為簡便,過程短暫,整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束,但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。金免疫測定是以膠體金為標記物,以硝酸纖維素膜為載體的固相免疫測定,分為滲濾和層析兩種形式。用於HIV抗體檢體金試紙條屬於金免疫層析,且大多數為間接法及雙抗原夾心法,兩種方法各有優缺點,但都簡單而快速,數分鍾即可得出結論,不需儀器設備,操作人員不需特殊訓練,試劑穩定,適用於單份測定等。

⑨ hiv抗體檢測是什麼意思

hiv抗體指的是艾滋病毒進入人體後,人體自身的免疫系統會產生抗體,但是,這種抗體幾乎沒有任何作用。時常聽見有人提起hiv抗體檢測,那麼,什麼是hiv抗體檢測呢?今天,小編就來為大家介紹一下hiv抗體檢測。
hiv抗體檢測什麼意思?
檢測血液中的艾滋病病毒抗體是目前最常用的檢測艾滋病病毒感染的實驗室方法,一般要經過兩個步驟:首先做初篩試驗,如果為陽性,再做確認試驗,確認試驗陽性才可診斷為艾滋病病毒感染。
hiv抗體檢測方法
1、病原檢測
病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大,且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄-PCR)可用於臨床診斷。
2、抗體檢測
血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍,可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
3、確證試劑
篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot(WB),由於該法相對窗口期較長,靈敏度稍差,而且成本高昂,因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高,WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。
FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相對簡單,整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果,而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准,但不作為血液合格的標准。
4、篩檢試驗
篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查,因此要求操作簡便,成本低廉,而且靈敏、特異。目前世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA,還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。
以上四種方法就是目前常用的hiv抗體檢測方法,感興趣的小夥伴可以來了解一下。另外,小編提醒hiv抗體檢測不提倡連續進行多次檢測,否則,很容易造成當事人心理負擔。同時,還應注意在檢測前不要服用具有免疫抑製作用的葯物,以免影響檢測結果。

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