A. 麥克比濁法怎麼確定細菌菌懸液濃度啊
用得最多的就是505nm測菌絲菌體、560nm測酵母、600nm測細菌。
原理:比濁法測菌體濃度:在菌體濃度小時,菌體量(g/L)與光密度OD值成正比
用得最多的就是505nm測菌絲菌體、560nm測酵母、600nm測細菌。
具體的g/L和OD之間好像沒有具體的數量對應關系,這個恐怕要憑感覺了:D 謝謝!你的意思是不是說,比如一般細菌濃度為108\ml,OD600下的數值我得自己測才行。請問有這方面的經驗嗎?紅多多(站內聯系TA)好像是的,我記得好像還有個OD多少比多少的比值的,不好意思這個我真能的忘記了,不過你具體需要的濃度還是要通過自己測吸光度來估算的。biocontrol(站內聯系TA)是需要測。如果測細菌。簡單說來。在細菌培養24小時內。每4小時或者其他時間取樣品,用LB平板測定活細菌數量,同時測定培養液的OD 值。等細菌長出後。根基細菌數量和相應OD知理論上就可以做成標準直線了。在以後的試驗中,你可以據此,直接得出細菌數,通過OD直線。
但不是所以的微生物都有這種對應關系。susizheng(站內聯系TA)簡單來說,就是先做一個菌液濃度與OD值的標准曲線,以後測OD值的話,直接根據標准曲線就知道菌液濃度了。波長的確定,可以拿你的菌液掃個譜,找出吸收峰。一般細菌600nm,但也不一定。
是需要測。如果測細菌。簡單說來。在細菌培養24小時內。每4小時或者其他時間取樣品,用LB平板測定活細菌數量,同時測定培養液的OD 值。等細菌長出後。根基細菌數量和相應OD知理論上就可以做成標準直線了。在以後的 ... 謝謝!不過必須要做標准曲線嗎?似乎有點麻煩啊!呵呵!一隻魚ddtt(站內聯系TA)Originally posted by susizheng at 2009-11-10 20:04:
簡單來說,就是先做一個菌液濃度與OD值的標准曲線,以後測OD值的話,直接根據標准曲線就知道菌液濃度了。波長的確定,可以拿你的菌液掃個譜,找出吸收峰。一般細菌600nm,但也不一定。
B. 麥氏標准比濁法原理是什麼怎麼做
麥氏標准比濁法的原理是:麥氏比濁法又稱Mcforland比濁法,它是根據細菌溶於水中存在一定的混濁度來測定細菌的濃度,是一種比較簡單粗列的計算細菌濃度的方法。一般Mcforland比濁法有5個標准管,分別代表不同的濃度,我們可以用肉眼來比較你所測的細菌管和哪個標准管濁度相似,即可判定濃度。另外,也可用分光光度計來和標准管來比較,而算出你的濃度。
操作方法:
輕搖標准試管。
無菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標准管相同直徑(大小)的無菌試管中。
以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標准管的濃度相同。
C. 用分光光度法測定水樣的濁度,如果需要質控樣,來檢驗方法的准確度,質控樣的選擇需要注意哪些
濁度測定方法的種類中,我國環保部門所承認的是分光光度法和目視比濁法兩種。濁度的分光光度法測定適用於飲用水、天然水和高濁度水的測定,它的測定濁度下限為3度。以下是濁度分光光度法的標准液配置和操作步驟。
1、濁度標准溶液配置
濁度的分光光度法測定需要使用到硫酸肼與六次甲基四胺聚合物懸浮液作為濁度標准溶液,來比對待測定水樣的濁度值,因此在進行濁度分光光度法測定操作前,我們要先了解濁度標准溶液的配置方法。
濁度標准溶液的配置要使用無濁度水和貯備液。
無濁度水是以蒸餾過的蒸餾水,通過0.2微米的濾膜制備而成的,無濁度水的盛放瓶要保證清潔,應使用過濾水盪洗兩次的燒瓶。
貯備液包括硫酸肼貯備液和六次甲基四胺貯備液。硫酸肼貯備液是將1.000g的硫酸肼溶於無濁度水後定容至100mL製得。六次甲基四胺貯備液是將10.00g六次甲基四胺溶於無濁度水後定容至100mL製得。
濁度標准溶液配置時,取5.00mL的硫酸肼貯備液和5.00mL六次甲基四胺貯備液,置入100mL量瓶內混合均勻,在25±3℃的溫度條件下靜置24小時後,以無濁度水將混合液稀釋至100mL標線並混合均勻,即為濁度400度的濁度標准溶液。
2、濁度分光光度法的操作步驟
濁度標准溶液配置完畢後,可以按照水樣的濁度吸取適量濁度標准液置於多個試管內,按照比例稀釋為不同濁度的系列溶液,例如採用0.50、1.25、2.50、5.00、10.00及12.50mL的濁度標准液,稀釋至50mL即可獲得4、10、20、40、80和100度的濁度系列溶液。
濁度測定的分光光度法是以吸光度來反應濁度值的,因此要將濁度系列溶液以680nm波長、30mm比色皿來測定溶液的吸光度,繪制濁度溶液的吸光度校準曲線。
濁度待測定水樣的濁度如果低於100度則直接取樣50.0mL,如果大於100度則取樣量酌減並以無濁度水稀釋至50.0 mL,以680nm波長、30mm比色皿來測定其吸光度,再將測定結果與校準曲線對比,即獲得水樣濁度測定值。
D. 濁度的測法是什麼
樓主你好:
分光光度法測濁度的原理是,在適當溫度下,硫酸肼與六次甲基四胺聚合,生成白色高分子聚合物,以此作為濁度標准溶液,在一定條件下與水樣濁度比較。濁度計(儀)是依據混濁液對光進行散射或透射的原理製成的測定水體濁度的專用儀器,使用時應參照說明書。
分光光度法測濁度的原理是,在適當溫度下,硫酸肼與六次甲基四胺聚合,生成白色高分子聚合物,以此作為濁度標准溶液,在一定條件下與水樣濁度比較。該方法適用於天然水、飲用水濁度的測定。測定要點如下。
(1)將蒸餾水用0.2um的濾膜過濾,以此作為無濁度水。
(2)用硫酸肼和六次甲基四胺及無濁度水配製濁度儲備液、濁度標准溶液和系列濁度標准溶液。更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考中檢所標准品對照品 www.rmhot.com
(3)於680nm波長處測定系列濁度標准溶液的吸光度,繪制吸光度一濁度標准曲線。
(4)取適量水樣定容,按照測定系列濁度標准溶液方法測其吸光度,並由標准曲線上查出相應濁度,按下式計算水樣的濁度。
濁度計(儀)是依據混濁液對光進行散射或透射的原理製成的測定水體濁度的專用儀器,使用時應參照說明書。其一般步驟是:採集代表性樣品於一個清潔的容器中,然後將容器中樣品倒入樣品管至刻線,小心地握住樣品管上部,擰上樣品管蓋;握住樣品管蓋,擦掉管壁外水滴,指印;將樣品管插入濁度計的管座中,合上座蓋;按相應按鍵讀取濁度值。
E. 比濁法的分析過程
當光束通過一含有懸浮質點的介質時,由於懸浮質點對光的散射作用和選擇性的吸收,使透射光的強度減弱。在比濁法中,透光度和懸浮物質濃度的關系類似於朗伯-比爾定律(見紫外-可見分光光度法)的數學式:
式中s為濁光度(或濁率),表示由於懸浮物的散射作用而引起的光強度衰減;I0和I分別為入射光強度(通過純溶劑)和透射光強度(通過混濁樣品);b為光程長度;c為懸浮質點的濃度;K為常數,有時又叫濁度系數,其值與粒子的大小、形狀、入射光的波長、懸浮物和介質的折射率有關。
在分析時,必須先做工作曲線,以s對已知散射物的濃度c作圖。顯然,比濁法和比色法所依據的原理是相同的,實驗方法也相似。通常,比色計或分光光度計都可用於比濁分析。也有專門用於比濁分析的儀器,即濁度計或比濁計。採用這種光散射測量技術必須注意:
①該法適合於分析混濁度較大的樣品,光束通過試樣後,透射光強度應有顯著減弱。I0與I相差較大,則測量誤差較小。
②在製作工作曲線和樣品時,應盡可能保持操作條件一致,以保證懸浮質點大小和形狀的均勻性,以及生成穩定的膠態懸浮體。反應物的濃度、加入的順序和速度,介質的酸度、溫度、放置時間等對懸浮質點的大小和均勻性都有影響。必要時可加入一些表面活性劑或其他保護膠體以防止懸浮物迅速沉降。
③如測量的懸浮物試樣具有顏色,則應選擇最小吸收的波長作入射光束。
F. 水中濁度的測定方法
水中濁度測定方法:
比濁法或射光法測定:
濁度可用比濁法或散射光法進行測定。我國一般採用比濁法測定,將水樣和用高嶺土配製的濁度標准溶液進行比較側度不高,並規定一升蒸餾水中含有1毫克二氧化硅為一個濁度單位。對不同的測定方法或採用的標准物不同,所得到的濁度測定值不一定一致。濁度的高低一般不能直接說明水質的污染程度,但由人類生活和工業生活污水造成的濁度增高,表明水質變壞。
濁度計測定
濁度也可以用濁度計來測定的。濁度計發出光線,使之穿過一段樣品,並從與入射光呈90°的方向上檢測有多少光被水中的顆粒物所散射。這種散射光測量方法稱作散射法。任何真正的濁度都必須按這種方式測量。濁度計既適用於野外和實驗室內的測量,也適用於全天候的連續監測。可以設置濁度計,使之在所測濁度值超出安全標准時發出警報。
其他方法
濁度也可以通過利用色度計或分光光度計測量樣品中顆粒物的阻礙作用造成的透射光強衰減程度來估計。然而,管理機構並不承認這種方法的有效性,這種方法也不符合美國公共衛生協會對濁度的定義。
利用透光率測量容易受到顏色吸收或顆粒物吸收等干擾的影響。而且,透光率和用散射光測量法測得的結果之間並無相關性。盡管如此,在某些時候色度計和分光光度計的測量結果可以在水處理系統或過程式控制制中用於測定濁度的大幅度變化。
G. 目視比濁法
方法提要
濁度與透視度呈反比關系,水樣與標准系列進行透視度比測,定值。本方法規定1000mL純水中含高嶺土1mg的濁度為1°。
本法適用於近海海域和大洋水濁度的測定。3個實驗室分析了用無濁純水配製水樣,濃度分別為7.0mg/L和50.0mg/L,測試結果重復性相對標准偏差為3.78%,相對誤差為4.10%。
試劑
無濁純水取蒸餾水或去離子水,通過0.2μm濾膜抽濾,貯存於聚乙烯桶中,用過濾水淋洗聚乙烯桶2次,棄去初濾水200mL,最好當天制備。
濾膜(0.2μm)。
二氯化汞溶液(50g/L)(注意:二氯化汞劇毒,小心操作!)。
焦磷酸鈉溶液(50g/L)。
高嶺土(機選特號)。
濁度標准儲備溶液將高嶺土置於(105±1)℃烘箱中烘乾2h,移入盛有硅膠的乾燥器中,冷卻30min。稱取3~5g高嶺土,置於瑪瑙研缽中加少量水調成稀糊狀,研磨約50min,全部轉移入1000mL量筒中,補加純水到1000mL標線處,充分攪拌均勻後,在(20±0.5)℃下靜置24h。用虹吸法吸取上層800mL懸濁液移入第2個1000mL量筒中,補加無濁純水到1000mL標線處,充分攪勻後,再次置於(20±0.5)℃下靜放24h。用虹吸法吸除上層液800mL,留取底層200mL懸濁液並加純水到1000mL標線,然後盛於1000mL棕色試劑瓶中,塞嚴保存。
濁度標准儲備溶液濁度的標定量取50.0mL標准儲備溶液於恆量(m1)的蒸發皿中,置於水浴鍋上蒸干,移於105℃乾燥箱中烘2h。置於硅膠乾燥器中冷卻30min,稱量(m2)。重復烘乾、冷卻、稱量步驟,直到兩次質量差小於0.2mg。按下式計算濁度標准儲備溶液中高嶺土的質量濃度:
岩石礦物分析第四分冊資源與環境調查分析技術
式中:ρ高嶺土為濁度標准儲備溶液中高嶺土的質量濃度,mg/mL;V為量取濁度標准儲備溶液的體積,50.0mL;m1為蒸發皿的質量,g;m2為蒸發皿加烘乾後高嶺土的質量,g。
此濁度標准儲備溶液濁度=ρ高嶺土×1000。
濁度標准中間溶液准確量取一定體積含有250mg高嶺土的標准儲備溶液置於1000mL容量瓶中,加入1.0g二氯化汞(HgCl2);溶解後,補加無濁純水至標線,充分混勻,轉入具橡皮塞的棕色試劑瓶中。此標准中間溶液濃度為0.25mg/mL。濁度為250°。
濁度標准溶液移取40.0mL濁度標准中間溶液置於100mL容量瓶中,加入0.50mL焦磷酸鈉溶液,加無濁純水至標線,混勻。此液濁度為100°。
校準曲線取12支100mL具塞比色管,分別加入0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL、7.00mL、8.00mL、9.00mL、10.0mL濁度標准溶液,再加入50.0mL二氯化汞溶液,然後再加無濁純水至標線,混勻。此系列濁度分別為0°、0.50°、1.00°、2.00°、3.00°、4.00°、5.00°、6.00°、7.00°、8.00°、9.00°、10.0°。
分析步驟
將混勻的水樣,傾入具塞比色管中至標線,立即同標准系列比較定量。水樣濁度為0°~10°范圍的測定,用黑色背景,垂直目視比較而定;10°以上的測定用黃色方格坐標紙為背景,水平透視方格線條的清晰程度而定量。然後將測定值記入渾濁度記錄表,取兩位有效讀數;若水樣濁度超過100°,則需用無濁純水稀釋水樣至可測范圍,將測定值乘以稀釋倍數,即為原水樣濁度。
注意事項
1)每次量取水樣或標准液時,必須將水樣瓶橫放,上下強烈振盪30次後,立即取出水樣。
2)玻璃試劑瓶磨口與磨口塞之間,在啟瓶對磨中,可增大所盛液體的濁度。因此所用水樣瓶及試劑瓶,均應配換橡膠塞,並將膠塞置於盛純水的燒杯中煮沸2h。
3)水樣中具有迅速下沉的碎屑及粗大沉澱物都可被測定為濁度。不潔凈的玻璃器皿和空氣泡,以及擾亂水樣表面能見度的振動都能造成虛假結果。
4)水樣保存,在取樣當天測定濁度。如果不可避免要保持更長時間,將水樣保存暗處可達24h。如若在樣品中加HgCl2固定劑,可保存22d。
5)除非另作說明,本法中所用試劑均為分析純,水為無濁水或等效純水。
H. 何為速率散射比濁法具體實驗步驟是什麼 我想測alpha1抗胰蛋白酶.想設計實驗方案.
在比濁分析中,一種是光直線通過,測定光直射後的吸收量,稱直射比濁法。
另一種利用光入射後,遇到溶液產生的漫散射,測定其散射光量。因不受色度影響,這種方法測定濁度要比直射更為精確。
在比色分析中,常用終點法。原理是加入試劑後,終點反應顯色(或產生濁度)不再變化,利用散射光比色的一種定量檢測方法。
速率法通常是用於自動生化儀器,加入試劑後,比較二次樣品(間隔三十秒或一分鍾)散射光濁度的光密度進行定量。
因不知具體測定什麼,也不好作解釋。
I. 濁度的測定的實驗步驟-目視比濁法
書上
J. 測定微生物生長量的時候,有一種方法叫做比濁法。哪位高手介紹下什麼叫比濁法詳細點。
比濁法又稱濁度測定法,原理是懸浮顆粒在液體中造成透射光的減弱,減弱的程度與懸浮顆粒的量相關,據此可定量測定物質在溶液中呈懸浮狀態時濃度的方法。也就是利用培養液中微生物的數量不同造成的吸光度差異來確定微生物的生長量。比濁法和比色法所依據的原理是相同的,實驗方法也相似。通常,比色計或分光光度計都可用於比濁分析。也有專門用於比濁分析的儀器,即濁度計或比濁計。