① 如何學好免疫學
一、掌握免疫學結構體系的特點 認識免疫學結構體系是學好免疫學的前提。 免疫學發展到今天，早已跳出抗感染免疫的范疇，形成了非常豐厚的知識結構體系。它包括免疫生物學、免疫生理學、免疫病理學、免疫葯理學、分子免疫學、免疫化學、免疫遺傳學、腫瘤免疫學、移植免疫學、生殖免疫學等。對醫學生(包括護理和臨床醫學專業)來說，核心是「基礎免疫學」和「臨床免疫學」。 基礎免疫學是學習免疫學必備的基本知識，是起步階段必需的知識基礎。基礎免疫學涉及免疫生物學、免疫化學、免疫生理學、免疫遺傳學、免疫病理學等方面的基本概念、基本知識、基本理論。基礎免疫學又可分為兩部分。第一部分介紹了有關的基本概念、基本知識：什麼是免疫?免疫有何功能作用，在生理、病理狀態下有何表現?免疫功能是靠什麼組織系統完成的，免疫系統的構成如何?免疫器官有哪些，各有何結構與功能特點?免疫細胞有哪些、各有何功能、各有何重要結構及其與功能的關系?免疫分子有哪些、各有何結構、分布及功能特點?第二部分介紹了免疫應答的發生及其調節機制：什麼是免疫應答、有哪些類型?免疫應答發生在哪裡，有何基本特點?免疫應答的基本過程是怎樣的?B細胞介導的體液免疫應答是怎樣發生的，抗體產生的一般規律如何，抗體怎樣發生免疫效應?T細胞介導的細胞免疫應答是怎樣發生的，其免疫效應機制的生理、病理作用是什麼?何謂免疫耐受、發生機理如何，有何實際意義?免疫調節機制有哪些，是怎樣發揮作用的?
臨床免疫學是把基礎免疫學中所學習的基礎知識應用於臨床實際問題。它介紹根據免疫學基本原理所設計的免疫學檢測或診斷技術的原理、方法和臨床應用；介紹根據免疫學基本原理所發展的免疫學防治方法的原理與應用；介紹了超敏反應性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤及移植排斥反應發生的免疫學原理、免疫診斷及防治的基本原則、方法及其原理。 因此，根據免疫學自身的結構體系特點，應把學習重點放在基礎免疫學部分，著重掌握免疫的功能、免疫器官、免疫細胞、抗原、抗體、補體、細胞因子和粘附分子、主要組織相容性抗原、免疫應答等方面的基本概念、基本知識；再在此基礎上深刻理解、融匯貫通，去認識和解決相關的臨床問題(免疫病理機制、免疫學診斷及免疫學防治)。 二、記憶是基礎，理解是關鍵，注意與臨床實際相結合 從學科特點看，免疫學具有形態學和機能學相結合的特點，常以形態學為基礎，但落腳在機能學上。因此，它的知識中既有形象、直觀的內容，又有抽象、理念性的內容。而形態結構是為功能服務的。所以學習中必須抓住功能這個「重中之重」。 免疫學中有許多基本概念，如中樞免疫系統、外周免疫系統、淋巴細胞再循環、抗原、抗體、免疫球蛋白、補體、細胞因子、粘附分子、過敏毒素、超化因子、調理作用、白細胞介素、主要組織相容性抗原、異嗜性抗原、腫瘤相關抗原、免疫粘附、超敏反應、免疫耐受等等，必須在充分理解的基礎上進行記憶。只有理解了、記住了，才談得上學習免疫學的系統性知識。免疫學中還有許多常用的英文縮寫名詞，如SIgA、SmIg、ADCC、TCR、IFN、TNF、APC、CTL、MHC、ELISA等，必須了解其英文原文，從而掌握其中文名稱及其含義。對於許多重要的免疫因素即免疫系統的組成成分，如T細胞、B細胞、NK細胞、CTL、TH、TDTH、巨噬細胞、抗體、CD分子、MHC－Ⅱ分子、細胞因子等，要通過理解基礎上的記憶，熟悉其形態或結構特點及其主要的生物學功能。在此基礎上，要進一步通過橫向比較，加深理解，在深層上掌握各自的特點，如異嗜性抗原與類屬抗原的區別、抗體與免疫球蛋白的區別、補體活化經典途徑與旁路途徑的區別、中樞免疫器官與外周免疫器官的區別、TCR與BCR的區別、CTL與NK細胞的區別、MHC－Ⅰ和MHC－Ⅱ類分子的區別、主動免疫與被動免疫的區別、活病苗與死疫苗的區別、免疫耐受與免疫抑制/免疫缺陷的區別、青黴素皮試與O.T/PPD試驗的區別等。另外還要注意掌握免疫細胞、免疫分子的結構與對應功能的關系。對免疫學中的許多機制問題，如抗原識別機制、淋巴細胞活化機制、抗體產生機制、抗體的免疫效應機制、CTL/NK細胞殺傷靶細胞的機制、TDTH細胞完成免疫效應的機制、免疫調節機制、各型超敏反應的發生機制、自身免疫病的發生機制、抗感染機制、抗腫瘤免疫機制、移植排斥反應發生機制、人工免疫機制、各種臨床常用免疫學檢測技術的原理等必須在充分理解的基礎上掌握，要把前面部分所學習的免疫學基本概念、基本知識有機地運用於對各種免疫機制的學習和領會。這里存在一個前後結合、匯融貫通、觸類旁通的問題。 要注意運用所學的免疫學知識認識、理解臨床實際問題，如抗體、補體、吞噬細胞缺陷會導致什麼後果? 細胞免疫功能缺陷臨床會出現哪些表現?臨床應用抗體制劑時怎樣避免或減少過敏反應的發生?器官移植時為什麼要做組織細胞配型?血清抗體或補體水平異常見於何種疾病?疫苗接種時為什麼要有多次接種或加強接種?為什麼特異性IgM抗體的檢出有助於某些傳染病的早期診斷，而以檢測IgG抗體輔助診斷時要測其滴度升高程度並作動態觀察? 又如用免疫學知識來認識、解釋臨床常用各種超敏反應性疾病的發病機理。這樣去學習既能學以致用，加深對所學免疫知識的認識理解。 三、多看多練，深入思考與討論，加強歸納總結、綜合應用的訓練 在學習的道路上是無捷徑可走的，必須腳踏實地、一步一個腳印地不斷跋涉。俗話說得好，「熟能生巧」。成功的關鍵在於勤學苦練。因此同學們在認真學習指定教材和輔導教材的基礎上多讀一些不同版本的醫學免疫學教材和專著，既可以起到相互補充、相互解釋的作用，又可以提供來自不同角度的認識、理解，通過學員自己的思考、比較，有助於形成正確理解與深刻領會，也有助於加深印象和記憶。同時，注意多收集一些練習題做做練習。通過做練習，往往可以發現學習中的薄弱環節、發現自己認識中的偏面和錯誤。做練習是一種很好的學習方式，能檢驗學習的效果、對書本知識的掌握程度；同時又是一種將所學書本知識加以運用以解決問題的實習機會。多做練習，無論是對加深理解，還是對加深記憶都是有益的。但要注意避免死記硬背習題的答案。考試的題目是多樣、多變的，只顧記題目而不了解其知識背景、知識基礎，那麼不僅無助於學習，考試時試題稍有變化就會做不出來的。只有真正吃透了所學知識的精髓，才能在試題的千變萬化中抓住實質、答中要害。討論交流也是一種很好的學習反饋形式，對啟迪思維、糾正錯誤，對加深理解、加深記憶也有很大益處。盡管讀書是學習的主要形式，但要取得好的成效，就要避免死讀書、把死記硬背作為掌握知識的唯一手段。 免疫學具有很強的哲理性、邏輯、滲透性。因此，在學習中要善於思考，例如前後左右聯系、分析推理、比較區別等；同時，在讀書、思考、做練習和討論交流的過程中應有意識地加強自己分析推理、歸納總結、綜合應用能力的訓練。讀死書也是千萬要不得的。 盡管免疫學的學習有一定的難度，但這種難度也是一種挑戰。只要我們掌握好免疫學結構體系的特點，抓住重點，努力做到理解基礎上的記憶，多看多練，深入思考與討論，加強分析推理、歸納總結、綜合應用的訓練，就一定能掌握免疫學的基本概念、基本知識、基本理論，在考試中取得好成績。
② 免疫分析方法有哪些
（1）放射免疫分析法（radioimmunoassay，RIA）。RIA技術是使用以放射性同位素（如125I、32P、3H等）作標記的抗原或抗體，用γ－射線探測儀或液體閃爍計數器測定γ－射線或β－射線的放射性強度，來測定抗體或抗原量的技術。它包括以標記抗原為特點的放射免疫分析和以標記抗體為特點的免疫放射分析（immunoradiometricassay，IRMA）。前者以液相競爭結合法居多，既測大分子抗原又測小分子抗原；後者以固相法測大分子抗原為主。
RIA在早期建立的農葯免疫分析方法中佔了很大比重，建立了狄氏劑、艾氏劑、2，4－D和2，4，5－T、對硫磷和百草枯等農葯的放射免疫分析法。盡管該方法靈敏度非常敏銳（RIA通常為10-9g、10-12g，甚至10-15g），應用范圍廣，但進行RIA需使用昂貴的計數器，也存在放射線輻射和污染等問題，因此在農葯殘留檢測領域的應用和發展受到了一定的限制，並逐步為其他免疫分析方法所取代。
（2）酶免疫分析法（enzymeimmunoassay，EIA）。EIA是繼RIA之後發展起來的一項免疫分析技術。其檢測原理與放射免疫法類似，但所用的標記物為酶，它將抗原、抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化作用有機結合起來，通過測定結合於固相的酶的活力來測定被測定物的量。用做標記物的酶有辣根過氧化物酶（horseradishperoxidase，HRP）和鹼性磷酸酶（alkalinephosphatase，AKP）、葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase，GO）、脲酶（urease）等。酶標記反應的固相支持物有聚苯乙烯塑料管、膜等。目前大多數採用96孔酶標板（MTP）作為固相支持物。這種板的檢測容量大，樣本數量多，只需有台簡單的酶標儀就可得出准確的檢測數據。也有學者採用磁珠作為固相材料進行EIA研究，其原理是將高分子材料（聚苯乙烯、聚氯乙烯等）包裹到金屬小顆粒（Fe2O3，Fe3O4）外面，再通過化學方法鍵合上氨基（－NH2）、羧基（－COOH）、羥基（－OH）等活性基團，再與抗體或抗原耦聯，製成免疫性微珠。該方法的優點是微珠比表面積大，吸附能力強，能懸浮在液相中快速均勻的捕獲樣品中的待測物，通過外加磁場後能夠實現微珠與樣品液的快速分離，從而減少檢測時間、提高檢測靈敏度。
由於酶標試劑制備容易、穩定、價廉，酶免疫分析的靈敏度接近放射免疫技術，故近年來EIA技術發展很快，已開發了多種EIA方法。其中酶聯免疫法（，ELISA）是目前農葯殘留檢測中應用最廣泛的酶免疫分析技術。
（3）熒光免疫分析法（fluorescenceimmunoassay，FIA）。FIA檢測的基本原理是將抗原抗體的高度特異性與熒光的敏感可測性有機地結合，以熒光物質作為示蹤劑標記抗體、抗原或半抗原分子，制備高質量的特異性熒光試劑。當抗原抗體結合物中的熒光物質受到紫外光或藍光照射時，能夠吸收光能進入激發態。當其從激發態回復基態時，能以電磁輻射形式放射出所吸收的光能，產生熒光。繪制農葯濃度－熒光強度曲線，可以定性、定量檢測樣品中的農葯殘留量。
適用於抗體、抗原或半抗原分子標記的熒光素須符合要求：①應具有能與蛋白質分子形成穩定共價鍵的化學基團，或易轉變成這類反應形式而不破壞其熒光結構；②標記後，熒光素與抗體或抗原各自的化學結構和性質均不發生改變；③熒光效率高，與蛋白質結合的需要量很少；④熒光素與蛋白質結合的過程簡單、快速，游離的熒光素及其降解產物容易除去；⑤結合物在一般儲存條件下性能穩定，可保存使用較長時間。
（4）化學發光免疫分析法（luminescentimmunoassay，LCIA）。LCIA又可分為化學發光免疫測定（chemiluminescentimmunoassay，CLCIA）和生物發光免疫測定（bio-luminescentImmunoassay，BLCIA）。
1976年，Shroeder首先用生物素（B）－親和素（A）系統建立了均相化學發光免疫測定技術，爾後Halman和Velan又將其引伸到非均相體系，現已滲入到生物學研究的各個領域。其原理是以發光指示抗原與抗體的結合，當發游標記物與相應的抗體或抗原結合後，底物與酶作用，或與發光劑產生氧化還原反應，或使熒光物質（例如紅熒烯等）激發，釋放光能。最後用光度計測定其發光強度，進行定量分析。常用發游標記物有辣根過氧化物酶（HRP）、魯米諾（luminol）、異魯米諾（isoluminol）、咯粉鹼（lophine）、光澤精（lucigen）、雙（2、4、6－三氯苯）草酸酯、聯苯三酚和6[N-（4－二氨基丁基）－N－乙基]－氨基-2，3－二氫吩嗪-1，4－二酮（ABEI）等。用上述發游標記物標記的抗體（或抗原）在一定的pH緩沖溶液中與相應的抗原（或抗體）結合時，在協同因子（例如H2O2等）的作用下發光，其發光強度與被測物的濃度成正比，故可以用於定量分析。
發光免疫測定具有特異性強、靈敏度高（檢測限量達10-15mol/L）、快速（1～3h）、發光材料易得等優點。但其發光過程和強度常受到發光物質本身的化學結構、介質的pH、協同發光物質和金屬離子雜質等影響。
（5）金免疫層析分析法（goldimmuno-chromatographyassay，GICA）。GICA檢測原理是將配體（抗體或抗原）以線狀包被固化於硝酸纖維素膜等微孔薄膜上，膠體金標記另以配體或其他物質並以干態固定在吸水材料上，通過毛細作用，使樣品溶液在層析條上泳動，當泳動至膠體金標記物處時，如樣品中含有待檢受體，則發生第一步高度特異性的免疫反應，形成的免疫復合物繼續泳動至線狀包被區時，發生第二步高度特異性的免疫反應，形成的免疫復合物被截留在包被的線狀區，通過標記的膠體金而顯紅色條帶（檢測帶），而游離的標記物則越過檢測帶，與結合的標記物自動分離。通過檢測帶上顏色的有無或色澤深淺來實現定性或定量測定2。
2金標試紙條檢測
GICA法具有快速（5～20min）、廉價、結果明確、無需復雜操作技巧和特殊設備、攜帶方便等優點。但相對於其他免疫分析方法，該方法檢測靈敏度稍低，主要適合現場快速定性或半定量測定。目前該方法已被應用於醫學和生物學等眾多研究領域，尤其在發達國家已經得到了廣泛的應用。
（6）免疫分析與儀器分析技術的聯用技術。使用單一的IA技術進行農葯殘留分析獲得的信息量少，而理化分析方法的選擇性又比較差。Kramer等人將免疫分析法和液相色譜法（LC）聯合起來使用，從而簡化了分析方法，提高了檢測效率。LC-IA的聯用，將LC的高分離能力和IA的高靈敏性和高特異性融為一體。該分析法尤其適合多組分殘留分析和微量分析。免疫分析與氣相色譜/質譜（GC/MS）的聯用可減少結構相似的農葯或代謝產物分析中的交叉反應，以降低假陽性。
③ 免疫學的檢測方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
④ 腫瘤免疫治療的方法有哪些
腫瘤免疫治療的基本原則有二：
一是免疫反應調節(免疫激動、免疫刺激和免疫修飾等)。
二是直接使用免疫相關細胞因子。至於免疫治療范疇外的生物治療，如內分泌(激素)治療、凋亡誘導治療、抗血管生成治療等，其理論基礎是該類生物葯物能夠通過受體、配體、信號傳導分子等發揮作用，對細胞的生長、分化、激活、凋亡、耐葯、轉移等生物學行為產生影響，或產生間接的生物學效應，減緩、抑制腫瘤的發生與發展。
腫瘤主動免疫治療的根本思想就是用腫瘤抗原在體內激發機體自身的免疫保護機制，從而達到治療腫瘤或預防復發的作用。與其它治療手段相比，主動治療有以下幾個特點：1 通過主動免疫能夠激發全身性的抗腫瘤效應，與手術、放療相比，作用范圍更加廣泛，特別適用於多發病灶或有廣泛轉移的惡性腫瘤；2 主動免疫治療通過調動機體自身的力量達到抗腫瘤作用，與放療和化療相比，副作用很小；3 由於部分腫瘤表達的抗原是自身組織的正常成分，所以用該抗原進行主動免疫可能打破自身免疫耐受而導致自身免疫性疾病的發生。
根據主動免疫所採用的抗原及免疫方式，將其分為以下幾種：
1、腫瘤細胞疫苗，以完整的腫瘤細胞作為腫瘤抗原的來源，通過不同方式進行修飾後用作疫苗。
2、多肽疫苗，T細胞在機體抗腫瘤作用中具有很重要的作用，而T細胞識別的腫瘤抗原是由MHC分子呈遞的抗原性多肽分子，這些具有免疫原性的多肽分子即為多肽疫苗。
3、表達腫瘤抗原的重組病毒和DNA疫苗，這種建立在迅速發展的分子生物學基礎上的腫瘤疫苗，是以某些病毒或質粒DNA作為載體，直接在體內表達相關腫瘤抗原。
4 、APC為基礎的腫瘤疫苗或稱為APC疫苗，此類腫瘤疫苗的理論基礎是APC的抗原呈遞功能。
5 、獨特型與抗獨特型疫苗。
6、細胞因子基因轉導的腫瘤疫苗。
7、MHC和B7分子轉基因的腫瘤疫苗。
⑤ 細胞凋亡的免疫學檢測方法有哪幾種（注意是免疫學的方法）
使用抗組蛋白和抗DNA的單克隆抗體酶聯免疫分析可以測得細胞凋亡形成的一種特殊復合物－－細胞凋亡時，細胞內DNA降解形成的核小體DNA可與核心組蛋白質H2A、H2B、H3、H4緊密結合形成的。
此法可定量、定性，但不能定位。
⑥ 免疫學的檢測方法有哪些
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
⑦ 免疫學的應用
免疫學的應用：
1、免疫預防和免疫治療
①免疫預防：患病前的預防，即把疫苗接種到人體內，使人產生對傳染病的抵抗能力，增強了人的免疫力。通過預防接種，使機體產生相應的抗體和記憶細胞（主要是得到記憶細胞），人們能夠積極地預防多種傳染病，但不能預防所有傳染病。
②免疫治療：患病後的治療，即在人體患病條件下，通過榆入抗體、胸腺素、淋巴因子等調整人的免疫功能，使機體抵抗疾病的能力增強，達到治療疾病的目的。
2、器官移植：器官移植的成敗主要取決於器官供者與受者的人類組織相容性抗原(HLA)是否一致或相近。
3、疾病的檢測：利用抗原、抗體發生特異性免疫反應，用相應的抗體檢驗是否有抗原；這里發生、分化，發育以及成熟，其中骨髓是B淋巴細胞生長發育和成熟的場所，T淋巴細胞則在胸腺生長發育和成熟；外周免疫器官可稱為刺激淋巴器官，外周免疫器官和組織包括淋巴結、脾臟和粘膜相關淋巴組織等，淋巴細胞（T細胞和B細胞）成熟以後就會在這里長住，也在此對外來抗原產生免疫應答，發揮作用免疫作用。其中淋巴結分布在全身各個非黏膜部位的淋巴通道匯集處，脾臟是最大的外周免疫器官，黏膜淋巴相關組織包括長線管淋巴組織、鼻相關淋巴組織以及支氣管相關淋巴組織等，比如扁桃體、闌尾等。免疫分子有免疫球蛋白、補體、各種膜分子以及細胞因子等，免疫球蛋白本質就是一種蛋白質，補體系統有三十多種組分，各成分均為糖蛋白，細胞因子的本質也是蛋白質，由免疫細胞及組織細胞分泌，可以調控免疫細胞的分化發育和其功能，對機體的免疫應答也有調控作用。
⑧ 免疫分子生物學技術有哪些
免疫化學實驗包括免疫血清的制備、沉澱反應定量法、對流免疫電泳、單向定量免疫電泳（火箭電泳）、雙向定量免疫電泳（交叉免疫電泳）、微量免疫電泳以及單向雙向免疫擴散、酶聯免疫吸附測定等。
免疫電泳法（immunoelectrophoresis）在凝膠介質中將電泳法與擴散法相結合的一種免疫化學方法，用以研究抗原和抗體。酶免疫測定（enzyme immunoassay, EIA）或免疫酶技術（immunoenzymatic technique）是指用酶標記抗體或酶標記抗體進行的抗原抗體反應。它採用抗原與抗體的特異反應與酶連接，然後通過酶與底物產生顏色反應，用於定量測定。目前常用的方法稱為酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。酶免疫測定技術還包括生物素―親和素系統（biotin-avidin system, BAS），均相酶免疫測定法（homogeneous enzyme immunoassay, HEI）等。
免疫標記技術中還有免疫熒光技術（immunofluorescence technique），放射免疫測定（radioimmunoassay, RIA）和發光免疫測定（luminescent immunoassay, LIA）等。
免疫印跡或免疫轉印技術（immunoblotting或Western blot）已廣泛應用於分子生物學和醫學領域，成為免疫學、微生物學及其它生命科學常用的一種重要研究方法。
流式細胞術、免疫組化、蛋白質晶元、免疫共沉澱等，在分子生物學方面的應用也越來越廣泛。
⑨ 有哪些免疫學方法常在葯學中的應用
"葯學"的范圍很廣啊，葯劑學、葯理學、葯物化學和葯物分析都包括，那麼免疫學一般的方法都會用到吧。比如葯理學，研究作用機制，那麼免疫熒光、放射免疫分析、發光免疫、免疫膠體金技術、生物素標記等免疫標記技術都能用到；還有免疫學檢測方法，如ELISA，免疫共沉澱等，用於檢測特異蛋白。
⑩ 免疫學檢驗常用技術有哪些
以下是幾種常用的免疫學技術：
1．免疫熒光技術
免疫熒光技術是利用熒光素標記的抗體（或抗原）檢測組織、細胞或血清 中的相應抗原（或抗體）的方法。由於熒光抗體具有安全、靈敏的特點，因此已 廣泛應用在免疫熒光檢測和流式細胞計數領域。根據熒光素標記的方式不同，可 分為直標熒光抗體和間標熒光抗體。間標熒光抗體中一抗並不直接連接熒光素， 而是先將一抗結合到蛋白，然後帶有熒光素的二抗再結合至一抗。通過二抗的結 合，能將信號進行放大，因此能在一定程度上提高檢測的靈敏度，但是隨之帶來 的高背景也降低了檢測的特異性。近年來，隨著熒光素和熒光檢測技術的不斷進 步，熒光檢測的靈敏度已經接近同位素檢測的水平，直接標記的熒光抗體逐漸取 代間接標記抗體。這些標記了熒光素的抗體直接結合至抗原，大大提高了檢測的 特異性，使檢測的結果更加准確可靠。熒光檢測技術的發展，使得免疫熒光技術 在傳染病診斷上有廣泛的用途，如在細菌、病毒、螺旋體感染的疾病，檢查IgM 抗體，做為近期接觸抗原的標志。利用單克隆熒光直接標記抗體鑒定淋巴細胞的 亞類。通過流式細胞儀，針對細胞表面不同抗原，可以同時使用多種不同的熒光 抗體，對同一細胞進行多標記染色。
2．放射免疫檢測
放射免疫檢測技術是目前靈敏度最高的檢測技術，利用放射性同素標記抗 原（或抗體），與相應抗體（或抗原）結合後，通過測定抗原抗體結合物的放射 性檢測結果。放射性同位素具有pg 級的靈敏度，且利用反復曝光的方法可對痕 量物質進行定量檢測。但放射性同位素對人體的損傷也限制了該方法的使用。
3．酶聯免疫吸附試驗（ELISA）
酶聯免疫檢測是目前應用最廣泛的免疫檢測方法。該方法是將二抗標記上 酶，抗原抗體反應的特異性與酶催化底物的作用結合起來，根據酶作用底物後的 顯色顏色變化來判斷試驗結果，其敏感度可達ng 水平。常見用於標記的酶有辣 根過氧化物酶(HRP)、鹼性磷酸酶（AP）等。由於酶聯免疫法無需特殊的儀器， 檢測簡單，因此被廣泛應用於疾病檢測。常用的方法有間接法、夾心法以及BAS －ELISA。間接法是先將待測的蛋白抱被在孔板內，然後依次加入一抗、標記了 酶的二抗和底物顯色，通過儀器（例如酶標儀）定量檢測抗原。這種方法操作簡 單但由於高背景而特異性較差。目前已逐漸被夾心法取代。夾心法利用二種一抗 對目標抗原進行捕獲和固定，在確保靈敏度的同時大大提高了反應的特異性。近 年來，抗原的定量檢測技術也不斷推陳出新。近年來，在夾心法ELISA 的基礎上， 開發了多抗原檢測試劑盒，能同時檢測微量液相樣本中多個抗原含量。這項技術 的應用大大縮短了診斷的時間，提高診斷的可靠性和及時性。
4．免疫金膠體技術
膠體金技術經過30 多年的發展到現在已日趨成熟，該方法是將二抗標記上 膠體金顆粒，利用抗原抗體間的特異性反應，最終將膠體金標記的二抗吸附於滲 濾膜上，此方法簡單，快速，廣泛應用於臨床篩查。