① 瘦肉精檢測問題
目前,檢測瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質譜法(GC-MS)、毛細管區帶電泳法(CE)和免疫分析技術(IA)。而我國結合自己的實際情況,2001年農業部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標准選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質譜法(GC-MS)。其中將HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測限為 0.05μg/kg,優點是檢測精確度高,而且假陽性率低;缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長,需貴重儀器、難於操作、價格昂貴。而GC一MS法優點是能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低,已將GC-MS法定為檢測瘦肉精的確證性方法。GC-MS法的缺點同HPLC相似。 (1)試劑和材料 以下所有試劑,除特別註明外,均為分析純試劑;水為符合GB/T6682規定的二級水。 ①鹽酸克倫特羅對照品:含鹽酸克倫特羅不得少於98.5% ②鹽酸 ③無水甲醇 ④氫氧化鈉 ⑤磷酸二氫鉀 ⑥磷酸 ⑦鹽酸溶液 取鹽酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀68g,加水800ml溶解並用磷酸調pH值至3.O,用水稀釋至1000ml,即得。 ⑨0.05mol幾磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀6.88,加水800ml溶解並用磷酸調pH值至3.0,用水稀釋至1000mi,即得。 a.氫氧化鈉溶液 取氫氧化鈉48,加水使溶解成100mi,即得。 b.鹽酸克倫特羅對照品儲備液(1mg/mi) 准確稱取28.3mg鹽酸克倫特羅對照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解並稀釋至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩鹽酸克倫特羅對照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi儲備液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。 ⑾鹽酸克倫特羅對照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。 ⑿鹽酸克倫特羅檢測試劑盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)儀器和設備 ①酶聯免疫反應讀數儀 ②分析天平 精度0.00001g ③天平 精度0.01g ④冷凍離心機 ⑤50mi具塞離心管 ⑥勻漿機 ⑦微型振盪器 ⑧迴旋振盪器 ⑨微量移液器 單道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩乾熱濃縮器 ①空氣壓縮機 (3)測定步驟 ①試料的制備(尿) 取供試尿lml,於3000r/min離心l0min,上清液作為供試試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 取空白尿lml,於3000r/min離心l0min,上清液作為空白試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 取空白尿2ml,於3000r/min離心l0min,上清液1.0ml添加l00ug/L的克倫特羅對照溶液20/H。作為2ug/l空白添加試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 ②試料的制備(肝) 取約l00g新鮮或冷凍後融化的空白或供試豬肝,用勻漿機以10000r/rain勻漿1-2min,使均勻呈糊狀,一20~C以下冰箱中貯存備用。 取均漿後的供試肝樣,作為供試試料。 取均漿後的空白肝樣,作為空白試料。 取均漿後的空白肝樣(1土0.05)e添加l00ng/m1的克倫特羅對照溶液20tzL作為2ng/g空白添加試料。 a:提取(肝) 取(1士o.05)z試料,置50ml離心管中;加鹽酸溶液5.0mi,旋渦混勻,中速振盪1.5h;在10-15~C下以4000r/mill以上速度離心15min;上清液移人另一50ml離心管中,加入氫氧化鈉溶液300gL,混勻,振盪15min;加0.5mol/l磷酸二氫鉀溶液4。0ml,混勻,2-8~C放置過夜;取上述溶液於10~15~C以4000r/111113以上的速度離心15min,上清液備用。 b.凈化(肝) C,,固相萃取柱依次用無水甲醇3mi、0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液2mi預洗,不使柱床乾涸;將備用上清液全部過柱;用0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液2ml淋洗,擠干,棄去所有淋洗液;用無水甲醇2mi洗脫,流速控制在0.5ml/mm以下,擠干,收集洗脫液;於50~60~C下用氮氣或空氣緩緩吹乾洗脫液;殘余物用水1.0ml溶解,以4000r/mill以上的速度離心15rain,清液作為試樣溶液供酶聯免疫測定法測定。 ③測定 a.室溫應控制在19~30~C。 b.取在19-30~C放置1-2h的試劑盒,按每個標准溶液和試樣溶液至少兩孔計算所需酶聯板條的數量,插入框架。每個微孔加入用緩沖溶液100倍稀釋的抗體100~tL,封口膜封板,室溫孵育30min。 c倒出孔內液體,將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,使孔內沒有殘余液體。用多道移液器加水250pL到酶聯板的微?L內,稍後倒出孔內液體,再將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,如此重復操作洗板3次。 d.分別吸取標准溶液、空白試料、空白添加試料和供試試料各20uL,分別放入不同微孔底中央,並在每孔內加入用緩沖溶液100倍稀釋的酶結合物100~I。,在微型振盪器上混勻,用封口膜封好,室溫孵育30min。 e.倒出孔內液體,將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,使孔內沒有殘余液體,重復洗板3次。 f.用多道移液器加入用底物緩沖溶液10倍稀釋的底物100uL,室溫避光孵育15min。 g.用多道移液器每孔加終止液100uL。 h.在1h內將酶聯板放於酶標儀內,於450nm波長處測定吸光度值。 (4)計算 用數據分析軟體對結果進行分析,繪出標准曲線,並得出試料中克倫特羅的含量。 (5)靈敏度和回收率 本方法的平均檢測下限為0.1mg/Kg。 本方法在1ug/kg添加濃度水平上豬尿回收率范圍為60%一120%,豬肝回收率范圍為40%~120%。參考資料/ http://www.zgny17.com
② 含瘦肉精的肉怎麼判定
含瘦肉精的肉 從感官上是無法辨認的,和正常肉沒有區別
需要專門的檢測才能判定
目前檢測方法有三種:膠體金卡(檢測卡)法。酶標儀法、質譜聯動法
檢測卡適應於尿樣,目前廠家較多,質量不一,有的根本起不到作用。
要想保證產品沒有問題,最好買大企業的,小廠家的連檢驗能力都沒有,不可能檢測
大企業為保證信譽,不敢不檢測,尤其是像雙匯這樣的企業,現在頭頭檢測,恐怕再出問題
③ 怎樣辨別瘦肉精
1、看豬肉皮下脂肪層的厚度。在選購豬肉時皮下脂肪太薄、太松軟的豬肉不要買。一般情況下,瘦肉精豬因吃葯生長,其皮下脂肪層明顯較薄,通常不足1厘米;正常豬在皮層和瘦肉之間會有一層脂肪,肥膘約為1cm—2cm,太少就要小心了。
2、看豬肉的顏色。一般情況下,含有瘦肉精的豬肉特別鮮紅、光亮。因此,瘦肉部分太紅的,肉質可能不正常。
3、另外,還可以將豬肉切成二三指寬,如果豬肉比較軟,不能立於案上,可能含有瘦肉精。
4、如果肥肉與瘦肉有明顯分離,而且瘦肉與脂肪間有黃色液體流出則可能含有瘦肉精。
④ 瘦肉精的危害與檢測方法有哪些
瘦肉精的危害有:苯乙醇胺A對人體的危害較大。人食用了含這種瘦肉精的豬肉後,會出現惡心、頭暈、四肢無力、手顫等中毒症狀,特別是對心臟病、高血壓患者危害更大。長期食用則有可能導致染色體畸變,會誘發惡性腫瘤.
瘦肉精的檢測方法:
看: 豬肉時皮下脂肪太薄、太松軟的豬肉不要買;
顏色:含有苯乙醇胺A的豬肉特別鮮紅、光亮。健康瘦肉是淡紅色。
松軟程度:將豬肉切成二三指寬,如果豬肉比較軟,不能立於案上,可能含有苯乙醇胺A。
肥肉與瘦肉有明顯分離,而且瘦肉與脂肪間有黃色液體流出則可能含有苯乙醇胺A。而一般健康的豬瘦肉是淡紅色,肉質彈性好,肉上沒有出汗現象。
食品安全黑名單 手機軟體可以掃描條形碼立馬識別是否合格。
⑤ 如何檢測"瘦肉精"豬肉
可以用瘦肉精檢測儀,瘦肉精檢測儀HED-SSJ 可現場快速檢測鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇。儀器預留其他項目檢測程序和埠,根據日後需求可方便的自主增加檢測項目。日後可升級為檢測抗生素、獸葯殘留、動物疫病、病害肉、的綜合類型儀器。
⑥ 瘦肉精檢測方法有哪幾種
(1)膠體金快速檢測法將待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後,待檢物與金標試劑的結合物又與試紙條發生特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果,從而實現特異性免疫診斷。測試卡分析快速,僅需3~5分鍾,無需專業人員操作,無需藉助儀器,可以憑肉眼觀察到結果,定性檢測,測試卡可常溫保存。
(2)酶聯免疫吸附法(ELISA)酶聯免疫吸附法是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其原理是利用抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用,通過化學方法將辣根過氧化物酶(HRP)與克侖特羅(CL)結合,形成酶偶聯克侖特羅。將固相載體上已包被的抗體與特異性的抗克侖特羅抗體結合,然後加入待測克侖特羅和酶偶聯克侖特羅,它們競爭性與克侖特羅抗體結合,洗滌後加底物,根據有色物的變化計量待測克侖特羅含量。若待測克侖特羅多,則被結合的酶偶聯克侖特羅少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克侖特羅含量,比色法的最佳波長為450納米。
⑦ 如何檢查瘦肉精
檢測方法
GB/T
5009.192-2003
動物性食品中克倫特羅殘留量的
瘦肉精
測定
氣相色譜-質譜法(GC-MS)
GC-MS法優點是把色譜高效快速的分離效果和質譜高靈敏度的定性分析有機合起來,能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析,而且具更高的檢測極限。Fente
C.
A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留,最低檢測限為5ng/g[6];Pteer
Batioens應用氣相色譜-串聯質譜法(GC-MS-MS)對牛、羊、豬組織中的CLB含量進行檢測,最低檢測限為2ng/g[7];劉琪等用GC-MS法(EI離子源)檢測豬尿中的CLB,檢測限為0.5ng/mL;VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB,衍生物用電脈沖方式或化學離子化方式掃描,會產生更高的靈敏度。另外,GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低。因此,我國將GC-MS法定為檢測CL
B的確證性方法(NY/T468~2001)。
高效液相色譜法(HPLC)
HPLC適合測定熱不穩定和強極性的β-激動劑及其代謝產物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱後熒光衍生化反應和質譜(MS)等系統聯用,容易實現分析過程的自動化。黃士新等(1995)應用紫外檢測器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,最低檢測限可達2ng/g[4]。國外有人應用HPLC
(二極體陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留,測得最低檢測限為1.26ng/g,回收率達98.9%[5]。目前,我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法,最低檢測限范圍為1~15ng/g,其優點是專屬性好、選擇性強、檢測精確度較高,而且假陽性率低;缺點是樣品處理時間長,檢測過程煩瑣、難於操作,需貴重儀器,在實際應用中受到一定的限制。
酶聯免疫吸附法(ELISA
)
利用免疫學抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用,通過化學方法將植物辣根過氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結合,形成酶偶聯克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結合,然後加入待測克倫特羅和酶偶聯克倫特羅,它們競爭性與克倫特羅抗體結合,洗滌後加底物,根據有色物的變化計量待測克倫特羅量。若待測克倫特羅多,則被結合的酶偶聯克倫特羅少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量,比色的最佳波長為450
nm,參比波長應大於600
nm。
液相色譜-質譜/質譜法(HPLC-MS/MS)
參見SN/T
1924-2007
進出口動物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測方法。
本標准適用於動物源性食品肌肉和內臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測。
試樣中的葯物殘留採用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,同時加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進行酶解後,提取液經C18和SCX雙SPE柱凈化,液相色譜-質譜進行測定,內標法定量。
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⑧ 總聽說肉為了瘦肉多都會添加瘦肉精,有什麼好的鑒別瘦肉精的方法嗎
對於肉類中的瘦肉精,首要判斷方法也是感官鑒別。
1. 一般含瘦肉精的豬肉肉色異常鮮艷,且皮下脂肪層明顯較薄,通常不足1厘米,瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,正常的豬肉不具有這些特徵。
2. 如果手上有PH試紙,可以使用試紙蘸取肉上的液體,正常新鮮肉即使經過多時,仍多呈中性和弱鹼性,而含有「瘦肉精」的肉則偏酸性,pH值明顯小於正常范圍。
3.如果以上方法都無法確認,或是購買的肉加工製品無法使用上述方法鑒別,可以通過快速檢測方法來進行進一步確認現在的快速檢測方法操作方便,結果准確,測定時間短,使您免受"毒肉"困擾。
⑨ 現在瘦肉精的檢測方法有哪些
(1)膠體金快速檢測法將待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後,待檢物與金標試劑的結合物又與試紙條發生特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果,從而實現特異性免疫診斷。測試卡分析快速,僅需3~5分鍾,無需專業人員操作,無需藉助儀器,可以憑肉眼觀察到結果,定性檢測,測試卡可常溫保存。
(2)酶聯免疫吸附法(ELISA)酶聯免疫吸附法是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其原理是利用抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用,通過化學方法將辣根過氧化物酶(HRP)與克侖特羅(CL)結合,形成酶偶聯克侖特羅。將固相載體上已包被的抗體與特異性的抗克侖特羅抗體結合,然後加入待測克侖特羅和酶偶聯克侖特羅,它們競爭性與克侖特羅抗體結合,洗滌後加底物,根據有色物的變化計量待測克侖特羅含量。若待測克侖特羅多,則被結合的酶偶聯克侖特羅少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克侖特羅含量,比色法的最佳波長為450納米。