① 檢驗氨基酸用什麼方法謝謝了,大神幫忙啊
你若是問蛋白質,我可以直接告訴你又雙縮脲試劑(中學階段),但氨基酸的檢驗比蛋白質麻煩多了。 一、氨基酸的分離和檢測 氨基酸的分離和檢測手段,以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。隨著高效液相色譜及填料的發展,HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優越性。但大多數氨基酸無紫外吸收和熒光發射特性,為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性,通常將氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法與柱後衍生法。HPLC與各種衍生相結合的氨基酸分析技術,構成了具有廣泛適用性的現代氨基酸分析技術。 二、鑒定是哪種氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。 1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸環境加熱) 紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色) (檢驗α-氨基) 2、坂口反應 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸 α-萘酚+鹼性次溴酸鈉 紅色 (檢驗胍基 精氨酸有此反應) 3、米隆反應(又稱米倫氏反應) HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應,未加熱則為白色) 4、Folin-Ciocalteau反應(酚試劑反應) 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應) 5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應) 6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應) 加入乙醛酸混合後徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應) 9、Sulliwan反應 1,2萘醌、4磺酸鈉+Na2SO3 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應) 10、Folin反應 1,2萘醌、4磺酸鈉在鹼性溶液 深紅色 (檢驗α-氨基酸) 三、關於氨基酸態氮的測定:(定量分析) 1.雙指示劑甲醛滴定法 2.電位滴定法 另請參閱: http://www.docin.com/p-69133358.html
② 怎麼辨別氨基酸的真假
辨別氨基酸的真假,方法比較多:
1、等電點法。
2、紫外分光分析。
3、還有色譜分析。
等電點法和色譜分析都是提供一個分離的環境,需要已知氨基酸作對照。
關於紫外吸收,使用得並不廣泛,特地查書,看到以下描述:
有機化合物在紫外區中有些沒有吸收譜帶,有的僅有較簡單而寬闊的吸收光帶;
另一方面,如果物質組成的變化不影響生色團及助色團,就不會顯著得影響其吸收光譜,例如甲苯和乙苯的紫外吸收光譜實際上是相同的。
因此物質的紫外吸收光譜基本上是其分子中生色團及助色團的特性而不是它的整個分子的特性。所以物質的紫外光譜不能完全決定物質的結構,還必須與紅外吸收光譜、核磁共振波譜、質譜以及其它化學的和物理化學的方法共同配合起來,才能得出可靠的結論。
③ 怎樣辨別氨基酸的酸鹼性
辨別氨基酸的酸鹼性的方法是用ph試紙。
在鹼性溶液中,氨基酸的羧基離解出氫離子而帶負電荷呈酸性,ph試紙呈藍色。
在酸性溶液中,氨基酸的氨基結合氫離子而帶正電荷呈鹼性。-NH₂+是氨基結合氫離子的形式。寫全是R-NH₂+。ph試紙呈黃色。
由於氨基酸分子中有羧基和氨基,因此,氨基酸既可以提供質子呈酸性,又可以接受質子呈鹼性。氨基酸為HA,得到一個質子H₂A+失去一個質子A₂-,H₂A-(Ka₁)->HA-(Ka₂)->A-。
Ka₁、Ka₂分別是兩步反應的平衡常數,根據溶液酸鹼度,氨基酸濃度可以求出當前狀態的濃度積,與Ka₁、Ka₂比較可以判斷氨基酸在當前狀態呈酸性還是鹼性。
(3)氨基酸用什麼化學方法鑒別擴展閱讀:
酸鹼性判斷的常用方法:
測酸鹼性可以用石蕊試液和酚酞,石蕊試液遇中性不變色,遇酸性變紅,遇鹼性變藍;酚酞遇中性、酸性均不變色,遇鹼性變成紅色。
測量酸鹼性的較精確方法是pH試紙,酸度計與中和滴定。其中pH試紙的精確度較差,一般只有一位,或沒有有效數字,酸度計的精確度可達2~3位有效數字,滴定則可以達到小數點後兩位。
隨著科學的進步,還可以使用ph計來測量酸鹼度,並且採用pH計能更好地控制化學反應,達到提高生產率和產品質量以及安全生產的目的。帶有自動記錄的pH測量系統還可對污染公害提供訴訟的證據。
其應用范圍從工業用水和廢物處理到采礦中的浮選過程,包括紙漿和造紙、金屬加工、化工、石油、合成橡膠生產、發電廠、制葯、食品加工等廣泛領域。
1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。
⑤ 檢驗氨基酸用什麼方法
你若是問蛋白質,我可以直接告訴你又雙縮脲試劑(中學階段),但氨基酸的檢驗比蛋白質麻煩多了。 一、氨基酸的分離和檢測氨基酸的分離和檢測手段,以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。隨著高效液相色譜及填料的發展,HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優越性。但大多數氨基酸無紫外吸收和熒光發射特性,為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性,通常將氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法與柱後衍生法。HPLC與各種衍生相結合的氨基酸分析技術,構成了具有廣泛適用性的現代氨基酸分析技術。
二、鑒定是哪種氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸環境加熱) 紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色) (檢驗α-氨基)
2、坂口反應 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸
α-萘酚+鹼性次溴酸鈉 紅色 (檢驗胍基 精氨酸有此反應)
3、米隆反應(又稱米倫氏反應) HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應,未加熱則為白色)
4、Folin-Ciocalteau反應(酚試劑反應) 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)
5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應)
6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應) 加入乙醛酸混合後徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)
7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)
8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)
9、Sulliwan反應 1,2萘醌、4磺酸鈉+Na2SO3 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)
10、Folin反應 1,2萘醌、4磺酸鈉在鹼性溶液 深紅色 (檢驗α-氨基酸)
三、關於氨基酸態氮的測定:(定量分析)1.雙指示劑甲醛滴定法2.電位滴定法 另請參閱: http://www.docin.com/p-69133358.html
⑥ 氨基酸的定性鑒定原理
紙層析法(paper chromatography)是生物化學上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術,可用於蛋白質的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定。
紙層析法又稱紙色譜法,是用濾紙為支持物,所用展層溶劑大多由水和有機溶劑組成,濾紙纖維與水的親和力強,與有機溶劑的親和力弱,因此在展層時,紙纖維上吸附的水分是固定相,有機溶劑是流動相。溶劑由下向上移動的,稱上行法;由上向下移動的,稱下行法。將樣品點在濾紙上(此點稱為原點),進行展層,樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進行分配。
由於它們的分配系數不同,不同氨基酸隨流動相移動的速率就不同,於是就將這些氨基酸分離開來,形成距原點距離不等的層析點。
引申:
精密稱取酪氨酸、色氨酸、苯內氨酸各適量,分別用水製成1ml含20μg(色氨酸)、40μg(酪氨酸)、200μg(苯丙氨酸),在波長230~300nm測定各氨基酸的吸收光譜。 在20種天然氨基酸中,只有酪氨酸、色氨酸和苯內氨酸,在紫外區最大吸收,酪氨酸的最大吸收峰的波長275nm處,色氨酸的最大吸收峰在波長280nm處,同時在波長288nm處有一個肩峰,苯丙氨酸最大的吸收峰在波長258nm處,同時在257nm和264nm處有兩個較小的吸收峰。由此可見,這三種氨基酸可以通過紫外吸收光譜加以鑒別。
⑦ 怎樣用化學方法鑒別氨基酸詳細點,謝謝
氨基酸,主要含有兩個官能團,羧基和氨基,而一般的氨基酸的,羧基個數和氨基的個數不同,位置不同,造成酸鹼性也不同,,因此鑒別可以使用測量酸鹼性的方法。。。。。