1. 細菌的鑒定有哪些
細菌的鑒定有哪些:
實驗室使用常用的培養方法通常可以識別常見細菌的典型菌株。然而,當資料庫中沒有非典型菌株或稀有或新出現的細菌時的確會出現問題。
細菌培養往往是通過形態特徵以及生長特徵分辨細菌,進一步的鑒定還包括:
生化鑒定:主要是藉助細菌對營養物質分解能力的不同及其代謝產物的差異對細菌進行鑒定,包括蛋白質分解產物試驗、觸酶試驗、糖分解產物試驗、氧化酶試驗、凝固酶試驗等。
血清學鑒定:適用於含較多血清型的細菌,用已知抗體檢測未知抗原(待檢測的細菌),或用已知抗原檢測患者血清中的相應抗細菌抗體及其效價。血清學鑒定操作簡單快速,特異性高,可在生化鑒定基礎上為細菌鑒定提供確定診斷。
分子生物學檢測:適用於人工培養基不能生長、生長緩慢及營養要求高不易培養的細菌,主要是對基因、蛋白質、細胞及其他生物進行大信息量分析的檢測技術。16S rRNA 基因序列分析法逐漸成為臨床細菌鑒定、分離的金標准。
免疫學鑒定:通過 ELISA 的方法進行細菌檢測。這種方法度敏感高,但它依賴於非常特異的抗體和高度區分的蛋白質。
質譜分析:通常使用氣相色譜法和質譜法的組合對脂肪酸進行分析。脂肪酸在細菌細胞膜中是必不可少的,不同的細菌種類會產生不同的脂肪酸組合。 該脂肪酸譜可用於通過與已知譜匹配來確定未鑒定的細菌種類。
2. 免疫學的檢測方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
3. 免疫學中的 瓊脂免疫試驗方法及結果判定
怎樣用傳統生物學檢測技術來檢測馬鈴薯中的農殘留
生物技術檢測方法具有特異的生物識別功能、極高的選擇性,它可與現代的物理化學方法相結合,產生一些簡單、結果精確、靈敏、專一、微量和快速、成本低廉的檢測方法,因此其在食品檢驗中佔有越來越重要的地位。
在食品檢驗中應用的幾種生物檢測技術
1 免疫法
免疫法是最靈敏的生物檢測方法,具有高特異性和高靈敏性(靈敏度可達1ppb,1ppm)、操作簡便、再現性好,應用前景看好。用免疫法可進行蛋白質檢測,由於不同蛋白質的物理、化學性質差別極小,只能通過各種免疫方法或標記探針法加以區別。
(1) 熒光抗體法
將熒光抗體溶液滴加於固定的標本上,一定時間後用緩沖液沖洗,若有相應抗原存在,即與熒光抗體結合,在熒光顯微鏡下即可看到發熒光的抗體復合物。熒光抗體法在微生物污染鑒定中經常使用,最常用於沙門氏菌的檢測。
(2) 放射免疫法
靈敏度高,但操作相對復雜,放射免疫法同位素半衰期短,保存及操作不便。目前應用情況受到限制。
(3) 酶聯免疫吸附法
是一種基本的酶免疫檢測方法,其選擇性好、靈敏度高、快速、易操作、結果判斷客觀准確、實用性強。酶免疫法和其他免疫法一樣,都是以抗體和抗原的特異性結合為基礎的。以酶或輔酶為標記物,標記抗原或抗體,用酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應。
酶聯免疫吸附法除可檢測食品中的毒素、殘留農及微生物外還可用於營養素的測定。
(4) 凝集反應法
當有電解質存在時,顆粒狀的抗原與其特異性的抗體結合並生成可見凝集塊的反應稱為凝集反應,有直接反應和間接反應法。利用凝集反應可測定抗體的效價,也可用於細菌、病毒等的分類。
(5) 沉澱反應法
沉澱反應法常見的是一種瓊脂擴散試驗。單向擴散是利用不同抗原抗體在瓊脂中不同的擴散速度而會在瓊脂中出現幾條相互分離的沉澱帶。雙向擴散則是利用抗原抗體都向中間層―――瓊脂擴散而形成沉澱帶,根據分離沉澱帶的數量可確定抗原抗體種類。
(6) 免疫擴散法
利用蛋白質在半固體基質上的擴散作用,使抗原和抗體在濃度比例合適的部位產生沉澱帶或沉澱環,從而檢測蛋白質。如血清中IgG、IgA、IgM含量的測定。
(7) 免疫電泳法
免疫電泳法是將電泳和瓊脂擴散沉澱反應相結合的一種方法,即先將血清或蛋白質抗原在瓊脂凝膠中進行電泳。帶電的蛋白質抗原向負極移動,加入抗血清後,不同區點的抗原再與抗體進行沉澱,當相應抗原抗體接觸,在適當比例下形成弧形沉澱帶,根據沉澱帶的位置對蛋白質的各組分進行檢測。如免疫球蛋白含量的測定。
4. 對新建細胞系或株的細胞確認試驗可採用哪些方法列舉一種或以上方法並說明其原理
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5. 免疫法鑒定微生物的原理是什麼
酶聯免疫法主要通過將抗原抗體免疫反應的特異性與酶的高效催化性相結合,用於檢測抗原與抗體。酶免疫法又稱為EL丨SA法,它通過該固相載體吸附抗體或抗原,加待測抗原或抗體,與其相應的酶標記抗體或抗原進行抗原抗體的特異免疫性反應,從而生成抗體或抗原一待測抗原或抗體一酶標記抗體或抗原的復合物,通過該復合物與酶的底物發生反應,生成有色產物。酶聯免疫法抗原進行定性與定量的檢測,當待測抗原或抗體後定量與有色產特量成正比,即可結合吸光度值計算出抗原或抗體後具體含量,即為酶聯免疫法後檢測原理
檢測食品中的病原微生物
酶聯免疫法可以有效檢測食品中的沙門氏菌、軍團菌、大腸桿菌等微生物
1.通過酶聯免疫法可以可以簡便,快速址檢測出含沙門氏菌的食品,而且准確度較高。目前,沙門氏菌嚴重影響著食品的安全衛生質量,它是產生細菌性食物中毒的主要致病菌。採用EL丨SA法束檢測沙門氏菌時,所採用的抗體為單克隆抗體或多克隆抗體,但是一般情況下,主要通過制備單克隆抗體的ELⅠSA方法進行檢測,進行了以ELⅠSA技術為基礎的全自動檢測
2可以採用ELⅠSA法檢測食品中的單核白細胞增多症李氏桿菌,加上該檢測方法敏感度較高,而且不與沙門氏菌、耶氏菌、蠟樣芽孢桿菌等發生交叉反應。因此,採用ELⅠSA法不僅檢測速度較國際法42h,而且具備較高的靈敏度。
3.ELⅠSA法不工可用於食品介導的病毒的檢測……
6. 實驗室中抗血清制備後,抗體特異性鑒定最常採用的方法是
正確答案:B
解析:單向免疫擴散常用於待測抗原的定量測定;親和層析和免疫吸附是分離純化的方法;可以用特異性抗原與制備的抗血清進行雙向免疫擴散試驗來鑒定抗血清的特異性
。
7. 金黃色葡萄球菌的鑒別要點有哪些
1、形態染色鑒別:
革蘭陽性球菌,葡萄串狀排列。
2、菌落特徵鑒別:
在血平板上菌落中等大小、光滑濕潤、菌落呈金黃色、菌落周圍有透明溶血環。
3、鑒定試驗鑒別:
甘露醇發酵試驗陽性,血漿凝固酶試驗陽性,觸酶陽性球菌,耐熱核酸試驗酶陽性,新生黴素試驗敏感。
(7)鑒別實驗的免疫學方法擴展閱讀:
金黃色葡萄球菌的檢驗規定:
根據 GB4789.10-2016《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗》第一法定性檢驗和第二法平板計數法進行實驗操作。
其中定性檢驗的主要步驟有檢樣處理、增菌、分離、鏡檢、腸毒素檢驗等,定量實驗主要步驟有:檢樣處理、接種、培養、計數和確認試驗等,常規的計數培養方法時間需要48 h左右。
衛生部於2012年12月21日實施的《速凍面米製品食品安全國家標准》,將金黃色葡萄球菌檢測由定性轉向定量,規定每批產品抽檢5個樣品中,至多隻能有1個樣品每克生製品中檢出的金黃色葡萄球菌含量在1000至10000個之間。
8. 免疫學實驗有哪些
本書主要介紹免疫學的常用實驗操作操作,如實驗原理、試劑配製及注意事項等。全書共分為24章,包括抗體的制備、純化和鑒定,免疫擴散和免疫電泳技術,免投細胞功能檢測,常見的細胞因子檢測技術,放射免疫檢測,酶免疫檢測方法,熒光和化學發光免疫技術,免疫組織化學實驗方法,原位雜交免疫組織化學和免疫PCR技術,免疫微球的應用,免疫電子顯微鏡實驗方法,以及人白細胞抗原(HLA)的分型,細胞凋亡的檢測方法
9. 葡萄球菌生化鑒定試劑盒有哪些試驗
(1)血漿凝固酶試驗:血漿凝固酶是金黃色葡萄球菌所產生的,與其致病力有關的一種侵襲性酶,其作用是使血漿中的纖維蛋白在菌體表面沉積和凝固以阻礙吞噬細胞的吞噬。血漿凝固酶分為結合型和游離型。前者結合在細菌的細胞壁上,能直接作用於血漿中的纖維蛋白原,使之轉化為纖維蛋白,環繞菌體而形成凝塊。而游離型血漿凝固酶則在產生後被分泌到菌體外,不能直接作用於纖維蛋白原,但可以激活血漿凝血酶原,使之轉化成凝血酶,後者再作用於纖維蛋白原使其轉化為纖維蛋白。具體的測量方法也因此分為玻片法和試管法兩種。
玻片法將待試菌落乳化於玻片上的鹽水中,經10~20S證實無自凝後,用接種環取人或兔血漿一環,與乳化菌液混合,出現凝集者為陽性,另設生理鹽水為陰性對照。
試管法吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯24小時培養物充分混勻,置37℃培養,每隔半小時觀察一次,連續觀察6小時,出現凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內容物不流動,判為陽性。
(2)耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養物沸水浴處理15min,用接種環劃線刺種於甲苯胺蘭-DNA平板,35℃培養24小時,在刺種線周圍出現淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。
(3)甘露醇發酵實驗金黃色葡萄球菌可發酵甘露醇。
(4)Staphaurex 膠乳凝集實驗是鑒定金黃色葡萄球菌的一種快速、簡便的商品化直接凝集試驗。其基本原理是在紙片上滴加包被有纖維蛋白原和IgG抗體的聚苯乙烯膠乳,然後用接種環挑取待鑒定菌株的新鮮培養物加入混勻,若出現凝集塊現象即為陽性。
5. 生化鑒定如上述,注意與其他凝固酶陽性的葡萄球菌的鑒別要點:PYR(吡咯烷酮-β-萘基醯胺試驗陰性;VP試驗陽性;鳥氨酸脫羧酶試驗陰性。
6. 免疫學方法用酶聯免疫吸附試驗和對流免疫電泳方法可檢測金葡菌的磷壁酸抗體。
7. 分子生物學方法包括PFGE脈沖場凝膠電泳以及酶切圖譜分析等。
10. 免疫學的檢測方法有哪些
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。