Ⅰ 什麼是培養基簡述選用和設計培養基的原則和方法
培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等.有的培養基還含有抗菌素和色素,用於單種微生物培養和鑒定.
(一)四個原則
1.目的明確在設計新培養基前,首先要明確配製該培養基的目的,例如,要培養何菌?獲何產物?用於實驗室作科學研究還是用於大規模的發酵生產?作生產中的「種子」,還是用於發酵?等等.
2.營養協調
3.物理化學條件適宜
4.經濟節約
(二)四種方法
1.生態模擬 在自然條件下,凡有某微生物大量生長繁殖的環境,則可認為該處一定具備該微生物生長繁殖所必需的營養和其他條件.因此,就可以模擬該天然基質或直接取用該天然基質(經過滅菌)來培養相應的微生物.在實踐中,的確可以利用生態模擬的辦法來配製各類「初級的」天然培養基.例如,可用肉湯、魚汁來培養多種細菌;用水果汁來培養各種酵母菌;用潤濕的麩皮、米糠來培養多種黴菌;用米飯或麵包來培養根霉;用肥土來培養放線菌;以及用玉米芯來培養脈孢菌(Neurosporaspp.),等等.
2.查閱文獻 一個科學工作者決不能事事都依靠直接經驗.多查閱、分析和利用一切文獻資料上的對自己直接或間接有關的信息,對設計有自己特色的培養基配方有著重要的參考價值.
3.精心設計 在設計、試驗新配方時,常常要進行各項因素的比較或反復試驗,因此,工作量是很大的.為了提高工作效率,應努力藉助優選法或正交試驗設計法等行之有效的數學工具.
4.試驗比較 要設計一種優化的培養基,在上述三個方法的基礎上,最終還得通過實際試驗和比較來加以確定.試驗的規模一般都遵循由定性到定量、由小而大地逐步擴大的原則.例如,可先在培養皿上作生長譜試驗(auxanographicmethod),然後進行搖瓶培養試驗,再進行台式發酵罐試驗,最後才擴大到試驗型發酵罐和生產型發酵罐的規模.
生長譜試驗的基本操作是這樣的:如果我們要試的是某一微生物的碳源,則先准備一個不加碳源的瓊脂培養基,待融化並冷卻至45℃左右時,混入供試菌懸液,搖勻後倒成瓊脂平板,俟其凝固後,將待試碳源一一用小鑷子夾取少許並整齊地放在平板上.經溫箱培養適當時間後,凡在某碳源周圍出現該菌的「生長圈」者,即為它可利用的碳源.用同樣原理也可尋找合適氮源和生長因子.
Ⅱ 培養基的配製
培養基的配製:
1、稱量和熬煮
按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。
2、加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然後放在石棉網上,小火加熱,並用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解後,再補充水分至所需量。
3、分裝
按實訓要求,將配製的培養基分裝入試管或500ml三角瓶內。分裝時可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培養基分裝完畢後,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入培養基內造成污染,並保證有良好的通氣性能。
5、包紮
加塞後,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋紮好,用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。
培養基配製注意事項:
1、培養基經滅菌後,必須放在37C溫箱培養24h,無菌生長者方可使用。
2、PDA培養基一般不需要調pH。對於要調節pH的培養基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏鹼時,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。
3、調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過鹼破壞培養基成分。
4、培養基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養基,用於菌類的震盪培養。
5、培養基也可以加入氯黴素或土黴素,加入量為0.2g/L培養基,主要是為了抑制細菌的生長,減少干擾性。
(2)鑒別培養基設計方法擴展閱讀
培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配製而成的營養基質。
一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。
培養基種類很多,根據配製原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基。
根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。
根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、真菌培養基等。培養基配成後一般需測試並調節pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。
培養基由於富含營養物質,易被污染或變質。配好後不宜久置,最好現配現用。
Ⅲ 請舉例如何運用鑒別性培養基和選擇性培養基
首先要了解鑒別培養基和選擇培養基的目的:
1.
鑒別培養基的目的是鑒定出是否有某種菌,比如大腸桿菌在伊紅美蘭培養基中能被准確的鑒定出來,但是讓大腸桿菌迅速繁殖,用的卻是肉湯培養基。這點說明鑒別培養基的本質是鑒別,但不一定是微生物旺盛繁殖的培養基。
2.
選擇性培養基的目的是使得目標菌大量繁殖,成為培養基中的優勢菌群。比如馬丁氏富集培養基,對於酵母菌的生長非常有利。這說明選擇培養基的本質是富集目標菌,經過培養可以得到大量的目標菌,方便後期的篩選分離和純化。
通過以上分析,只要看出鑒別培養基和選擇性培養基的本質區別,即可有更深的理解。
Ⅳ 選擇培養基和鑒別培養基的區別是什麼
一、含義不同:
選擇培養基根據某一種或某一類微生物的特殊營養要求或對一些物理、化學抗性而設計的培養基。利用這種培養基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。
鑒別培養基是在培養基中加入某種試劑或化學葯品,使培養後會發生某種變化,從而區別不同類型的微生物。
二、時間不同:
選擇培養基上的菌類,有2種或兩種以上時,只有適應環境(選擇培養基的基底)的菌種才能存活。
鑒別培養基上的菌類,有兩種或兩種以上時,在培養基中加入某種試劑或化學葯品,使培養後會發生某種變化,從而區別不同類型的微生物(但培養基上的各個菌種均不死亡)。
(4)鑒別培養基設計方法擴展閱讀:
鑒別培養基(differentialmedium)用於鑒別不同類型微生物的培養基。在培養基中加入某種特殊的化學物質,某種微生物在培養基中生長後能產生某種代謝產物,而這種代謝產物可以與培養基中的特殊化學物質發生特定的化學反應,產生明顯的特徵性變化,根據這種特徵性變化,可將該種微生物與其他微生物區分開來。
Ⅳ 高中生物書中~有哪些選擇培養基~鑒別培養基
高中生物需要知道的選擇培養基主要有:
1.以尿素作為唯一氮源的培養基用於分離分解尿素的細菌
2.不添加氮源的培養基用於分離固氮微生物
3.培養基中加入青黴素分離得到酵母菌和黴菌
4.培養基中加入高濃度的食鹽用於分離得到金黃色葡萄球菌
鑒別培養基主要有:
伊紅--美藍培養基可以鑒別大腸桿菌
Ⅵ 鑒別培養基和選擇培養基怎麼分辨,分別舉個
鑒別培養基加入一些化學物質,微生物的代謝產物什麼的可以和這種物質發生反應,產生明顯的變化,以便鑒別和篩選。
選擇培養基是根據所要選擇的微生物的特殊營養需求,在培養基中減少某種養分等操作,通過 抑制別的微生物的生長 ,來達到篩選所需微生物的目的。
Ⅶ 什麼是選擇性培養基什麼是鑒別性培養基闡述各自的原理。
選擇性培養基是通過條件的改變來篩選出來眾多微生物中的一種,通常是在培養基中加入對其他雜菌抑制的葯物來抑制其他類群的生長只留下想要的一種,或者不加其他類群所需的營養只留下這一種。鑒別性培養基只是要鑒定出混合菌中有這一種菌,通常都用鑒別的試劑加進去看反應結果就可以。
Ⅷ 選擇培養基和鑒別培養基區別
選擇培養基和鑒別培養基區別:
一、定義不同
選擇培養基是指一類根據特定微生物的特殊營養要求或其對某理化因素抗性的原理而設計的培養基。
鑒別培養基是指一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養基。
二、用途不同
選擇培養基用於抑制大多數其他微生物的生長,或者造成有利於該菌生長的環境,一段時培養間後使得該菌成為優勢菌。
鑒別性培養基用於鑒定不同微生物。
(8)鑒別培養基設計方法擴展閱讀:
培養基注意事項:
確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、真菌及支原體無菌試驗來確認並排除。
同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配製好的培養液中取少量加入營養瓊脂於恆溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。
另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,並有各自獨立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。
Ⅸ 什麼是選擇性培養基什麼是鑒別性培養基
選擇培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌,從而提高該菌的篩選效率。
鑒別性培養基又稱鑒別培養基,一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養基。此類培養基一般用於鑒定不同微生物。