㈠ 微生物檢測-黴菌
黴菌和酵母計數操作細則
1 設備和材料
1.1 溫箱：25～28℃。
1.2 振盪器。
1.3 天平。
1.4 顯微鏡。
1.5 玻塞三角瓶：300mL。
1.6 試管：15mm×150mm。
1.7 平皿：直徑9cm。
1.8 吸管：1mL及10mL。
1.9 酒精燈。
1.10 載物玻片。
1.11 蓋玻片。
1.12 廣口瓶。
1.13 牛皮紙袋：121℃滅菌20min。
1.14 金屬勺、刀等。
1.15 試管架。
1.16 接種針。
1.17 橡皮乳頭。
2 培養基和試劑
2.1 馬鈴薯－葡萄糖瓊脂培養基，附加抗菌素，按GB 4789.28中4.79規定。
2.2 孟加拉紅培養基：按GB 4789.28中4.81規定。
2.3 滅菌蒸餾水。
2.4 乙醇。
3 操作步驟
3.1 采樣：取樣時須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。首先准備好滅菌容器和采樣工具，如滅菌牛皮紙袋或廣口瓶，金屬刀或勺等。在衛生學調查基礎上，採取有代表性的樣品。樣品採集後應盡快檢驗，否則應將樣品放在低溫乾燥處。
糧食(包括糧庫貯糧，糧店或家庭小量存糧)樣品的採集，可根據糧囤或糧垛的大小和類型，分層定點取樣，一般可分三層五點，或分層隨機採取不同點的樣品，充分混合後，取500g左右送檢。小量存糧可使用金屬小勺採取上、中、下各部位的混合樣品。
穀物加工製品(包括熟飯、糕點、麵包等)、發酵食品、乳及乳製品以及其他液體食品，用滅菌工具採集可疑霉變食品250g，裝入滅菌容器內送檢。
3.2 以無菌操作稱取檢樣25g(或25mL)，放人含有225mL滅菌水的玻塞三角瓶中，振搖30min，即為1：10稀釋液。
3.3 用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使黴菌孢子充分散開。
3.4 取1mL1∶10稀釋液注入含有9mL滅菌水的試管中，另換一支1mL滅菌吸管吹吸5次，此液為1∶100稀釋液。
3.5 按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管，根據對樣品污染情況的估計，選擇3個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿，然後將涼至45℃左右的培養基注入平皿中，待瓊脂凝固後，倒置於25～28℃溫箱中，3d後開始觀察，共培養觀察5d。
3.6 計算方法：通常選擇菌落數在10～150之間的平皿進行計數，同稀釋度的2個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克(或毫升)檢樣中所含黴菌和酵母數。
3.7 報告：每克(或毫升)食品所含黴菌和酵母數以個/g(個/mL)表示。
㈡ 食物中的黴菌可以用什麼方法檢測出來
我們說的黴菌類食物就是需要通過發霉腌制的食物，這類食物包括豆腐乳，臭豆腐，黃豆醬，西瓜醬，腌製品內一般也會含有部分黴菌。
㈢ 食品微生物學檢驗 黴菌和酵母計數採用了什麼檢測技術
1、應選擇菌落總數恰當的稀釋倍數的平板進行菌落計數。
2、同一稀釋倍數應計數兩塊平板取平均值。
3、最好劃分出獨立的房間進行菌落計數，因為黴菌孢子一旦飄灑出來，將很難清除，計數過程也應盡量避免孢子飄散的情況發生，做好防護。A、對培養液中酵母菌進行計數採用抽樣檢測法，A正確；B、野馬的活動能力強，活動范圍廣，應採用標記重捕法調查其種群密度，B錯誤；C、分離真核細胞的細胞器採用差速離心法，C正確；D、分離高等植物葉綠體中的色素採用層析法，D錯誤．故選：AC．
㈣ 飼料中黴菌毒素怎麼檢測
黴菌毒素的檢測方法很多，但由於黴菌毒素的化學結構和物理化學特性復雜，在樣品中分配不均和基質的干擾，使其分析更加復雜。飼料的樣品基質對黴菌毒素的影響最大，因為飼料是由多種物質混合在一起的，不同的物質中的黴菌毒素檢測的程序是不同的。
通常，首先要對懷疑被污染的物質進行嚴格的樣品處理，從樣品中提取毒素，分析之前再進行洗脫除去雜質的干擾。在實際的分析中，有些方法可直接進行分離和定量，有些方法在分離和定量之前需要對黴菌毒素進行衍生。
有些黴菌毒素具有一個熒光特性的發色基團，如黃麴黴毒素(AF)、赭麴黴毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE)，樣品的提取物經常用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)來分離結構相似的化合物和污染物。
通過比較樣品和標准品色譜的比移值(Rf)和保留時間來定性黴菌毒素，通過熒光強度和吸光度來定量黴菌毒素。一些黴菌毒素含有單端孢霉烯團，最大吸收值還不清楚，通常用氣相色譜和氣質聯用色譜進行檢測。這些樣品在提取後，上樣之前通常需要進行柱前衍生。
TLC和HPLC的方法對單端孢霉烯團有效，但對黃麴黴毒素的敏感性和特異性不強。TLC對穀物中的脫氧血腐鐮刀菌烯醇的檢測限是50～100μg/kg。
㈤ 飼料中黴菌毒素怎麼檢測
黴菌毒素的檢測方法很多，但由於黴菌毒素的化學結構和物理化學特性復雜，在樣品中分配不均和基質的干擾，使其分析更加復雜。飼料的樣品基質對黴菌毒素的影
響最大，因為飼料是由多種物質混合在一起的，不同的物質中的黴菌毒素檢測的程序是不同的。通常，首先要對懷疑被污染的物質進行嚴格的樣品處理，從樣品中提
取毒素，分析之前再進行洗脫除去雜質的干擾。在實際的分析中，有些方法可直接進行分離和定量，有些方法在分離和定量之前需要對黴菌毒素進行衍生。
有些黴菌毒素具有一個熒光特性的發色基團，如黃麴黴毒素(AF)、赭麴黴毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE)，樣品的提取物經常用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)來分離結構相似的化合物和污染物。
通過比較樣品和標准品色譜的比移值(Rf)和保留時間來定性黴菌毒素，通過熒光強度和吸光度來定量黴菌毒素。一些黴菌毒素含有單端孢霉烯團，最大吸收值
還不清楚，通常用氣相色譜和氣質聯用色譜進行檢測。這些樣品在提取後，上樣之前通常需要進行柱前衍生。TLC和HPLC的方法對單端孢霉烯團有效，但對黃
麴黴毒素的敏感性和特異性不強。TLC對穀物中的脫氧血腐鐮刀菌烯醇的檢測限是50～100μg/kg。
㈥ 食品微生物檢測內容有哪些
三個方面的內容：
第一類是致病菌及其毒素，比如沙門氏菌、副溶血性弧菌、單增李斯特菌、金葡菌腸毒素等，它們主要導致胃腸道疾病，嚴重的會造成肝、腦、腎等臟器的損害，甚至死亡。；
第二類是產毒真菌和真菌毒素，包括黃麴黴毒素、伏馬菌素、展青黴素等，它們或造成人的急性中毒事件，或因長期攝入，造成消化道癌症和某些地方病。
第三類是病毒和寄生蟲。
㈦ 食品黴菌和酵母分別計數是怎麼樣的
黴菌和酵母計數 1主題內容與適用范圍
本標准規定了各類糧食、食品和飲料黴菌和酵母菌計數的檢驗方法。
本標准適用於各類糧食、食品和飲料中黴菌和酵母菌的計數。
2引用標准
GB 4789.28食品衛生微生物學檢驗染色法、培養基和試劑
3設備和材料
3.1溫箱：25～28℃。
3.2振盪器。
3.3天平。
3.4顯微鏡。
3.5玻塞三角瓶：300mL。
3.6試管：15mm×150mm。
3.7平皿：直徑9cm。
3.8吸管：1mL及10mL。
3.9酒精燈。
3.10載物玻片。
3.11蓋玻片。
3.12廣口瓶。
3.13牛皮紙袋：121℃滅菌20min。
3.14金屬勺、刀等。
3.15試管架。
3.16接種針。
3.17橡皮乳頭。
4培養基和試劑
4.1馬鈴薯－葡萄糖瓊脂培養基，附加抗菌素，按GB 4789.28中4.79規定。
4.2孟加拉紅培養基：按GB 4789.28中4.81規定。
4.3高鹽察氏培養基：按GB 4789.28中4.78規定。
4.4滅菌蒸餾水。
4.5乙醇。
5檢驗程序
檢驗程序如下：
（圖略）
6操作步驟
6.1采樣：取樣時須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。首先准備好滅菌容器和采樣工具，如滅菌牛皮紙袋或廣口瓶，金屬刀或勺等。在衛生學調查基礎上，採取有代表性的樣品。樣品採集後應盡快檢驗，否則應將樣品放在低溫乾燥處。
糧食(包括糧庫貯糧，糧店或家庭小量存糧)樣品的採集，可根據糧囤或糧垛的大小和類型，分層定點取樣，一般可分三層五點，或分層隨機採取不同點的樣品，充分混合後，取500g左右送檢。小量存糧可使用金屬小勺採取上、中、下各部位的混合樣品。
海運進口糧的采樣：每一船倉採取表層、上層、中層及下層四個樣品，每層從五點取樣混合，如船倉盛糧超過10000t，則應加采一個樣品。必要時採取有疑問的樣品送檢。
穀物加工製品(包括熟飯、糕點、麵包等)、發酵食品、乳及乳製品以及其他液體食品，用滅菌工具採集可疑霉變食品250g，裝入滅菌容器內送檢。
6.2以無菌操作稱取檢樣25g(或25mL)，放人含有225mL滅菌水的玻塞三角瓶中，振搖30min，即為1：10稀釋液。
6.3用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使黴菌孢子充分散開。
6.4取1mL1∶10稀釋液注入含有9mL滅菌水的試管中，另換一支1mL滅菌吸管吹吸5次，此液為1∶100稀釋液。
6.5按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管，根據對樣品污染情況的估計，選擇3個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿，然後將涼至45℃左右的培養基注入平皿中，待瓊脂凝固後，倒置於25～28℃溫箱中，3d後開始觀察，共培養觀察5d。
6.6計算方法：通常選擇菌落數在10～150之間的平皿進行計數，同稀釋度的2個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克(或毫升)檢樣中所含黴菌和酵母數。
6.7報告：每克(或毫升)食品所含黴菌和酵母數以個/g(個/mL)表示。
㈧ 檢測食物中黴菌微生物可以用什麼方法
食品中黴菌可引起食物霉變，還會刺激人體消化道、胃部等，嚴重的還可損傷肝臟，造成食物中毒。
一般檢測可以用孟加拉紅培養基檢測，或者用黴菌總數檢測紙片都可以的。
㈨ 黴菌和酵母菌的測定還有什麼方法
黴菌和酵母菌介紹及檢測方法
一、黴菌和酵母菌介紹：
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類，通常是單細胞，呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。黴菌也是真菌，能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴菌和酵母廣泛分布於自然界並可作為食品中正常菌相的一部分。長期以來，人們利用某些黴菌和酵母加工一些食品，如用黴菌加工乾酪和肉，使其味道鮮美；還可利用黴菌和酵母釀酒、制醬；食品、化學、醫葯等工業都少不了黴菌和酵母。但在某些情況下，黴菌和酵母也可造成中腐敗變質。由於它們生長緩慢和競爭能力不強，故常常在不適於細菌生長的食品中出現，這些食品是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品，含有抗菌素的食品等。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍，以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術，它們能轉換某些不利於細菌的物質，而促進致病細菌的生長；有些黴菌能夠合成有毒代謝產物－黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在新鮮的和加工的食品中繁殖，可使食品發生難聞的異味，它還可以使液體發生混濁，產生氣泡，形成薄膜，改變顏色及散發不正常的氣味等。因此黴菌和酵母也作為評價食品衛生質量的指示菌，並以黴菌和酵母計數來制定食品被污染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的黴菌和酵母限量標准。我國已制訂了一些食品中黴菌和酵母的限量標准。
二、檢驗方法：
黴菌和酵母的計數方法，與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為：將樣品製作成10倍梯度的稀釋液，選擇3個合適的稀釋度，吸取1mL於平皿，傾注培養基後，培養觀察，計數。對黴菌的計數，還可以採用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標准參見：
GB4789.15-94，《中華人民共和國國家標准食品衛生微生物檢驗黴菌和酵母計數》
三、說明：
1．樣品的處理。為了准確測定黴菌和酵母數，真實反映被檢食品的衛生質量，首先應注意樣品的代表性。對大的固體食品樣品，要用滅菌刀或鑷子從不同部位採取試驗材料，再混合磨碎。如樣品不太大，最好把全部樣品放到滅菌均質器杯內攪拌2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2．樣品的稀釋：為了減少櫚稀釋倍數的誤差，在連續遞增稀釋時，每一稀釋度應更換一根吸管。在稀釋過程中，為了使黴菌的孢子充分散開，需用滅菌吸管反復吹吸50次。
3．培養基的選擇：在黴菌和酵母計數中，主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基（PDA）：黴菌和酵母在PDA培養基上生長良好。用PDA作平板計數時，必項加入抗菌素以抑制細菌。
孟加拉紅（虎紅）培養基：該培養基中的孟加拉紅和抗菌素具有抑制細菌的作用。孟加拉紅還可抑制黴菌菌落的蔓延生長。在菌落背面由孟加拉紅產生的紅色有助於黴菌和酵母菌落的計數。
高鹽察氏培養基：糧食和食品中常見的麴黴和青黴在該培養基上分離效果良好，它具有抑制細菌和減緩生長速度快的毛霉科菌種的作用。
4．傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度，每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45℃，立即傾注並旋轉混勻，先向一個方向旋轉，再轉向相反方向，充分混合均勻。培養基凝固後，把平皿翻過來放溫箱培養。大多數黴菌和酵母在25－30℃的情況下生長良好，因此培養溫度25~28℃。培養3d後開始觀察菌落生長情況，共培養5d觀察記錄結果。
5．菌落計數及報告：選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板，取兩個平板菌落數的平均值，乘以稀釋倍數報告。固體檢樣以g為單位報告，液體檢樣以mL 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6．黴菌直接鏡檢計數法：對黴菌計數，可以採用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下，黴菌菌絲具有如下特徵：
平行壁：黴菌菌絲呈管狀，多數情況下，整個菌絲的直徑是一致的。因此在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是區別黴菌菌絲和其他纖維時最有用的特徵之一。
橫隔：許多黴菌的菌絲具有橫隔，毛霉、根霉等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀：薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質，在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝：如菌絲不太短，則多數呈分枝狀，分枝與主幹的直徑幾乎相同，有分枝是鑒定霉功得出可靠的特徵之一。
菌絲的頂端：常呈鈍圓形。無折射現象。
凡有以上特徵之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲，凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6；
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6；
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
一叢菌絲可視為一個菌絲，所有菌絲（包括分枝）總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果，計算陽性視野所佔比例，並以陽性視野百分數（%）報告結果。計算公式：
每件樣品陽性視野（%）=（陽性視野數 / 觀察視野數）×100
㈩ 大腸桿菌和黴菌的檢測方法
請參照；
GB4789-2003《食品微生物檢驗方法》中大腸菌群和黴菌檢驗。