A. 基因檢測有哪些方法可以做
基因檢測采樣方法及流程
(采樣方法有2種,下面分別描述)
(一)、口腔黏膜采樣檢測方法
很多檢測單位採用口腔粘膜脫落細胞樣本採集方式,採集程序如下:
口腔清潔:用清水漱口一到二次。
采前准備:從盒內取出1號管(平底),輕甩一下上下搖動使生理鹽水全部沉積在管底。擰開蓋子將管立於桌上備用。
刮取細胞:取出口腔粘膜刮勺,伸入口腔將刮勺的頭部帶齒部分貼在一側口腔內側的臉頰部位於上下牙齒之間的部位,稍用力(相當於刷牙的力氣)按前後方向在口腔粘膜上刮十餘次,再用刮勺頭部的另一側(勿須轉動刮勺)刮取另一側的口腔粘膜,刮取十餘次。
收集細胞:將刮勺迅速浸入到1號管的生理鹽水中攪動,將粘膜細胞洗到水中。將刮勺提離水面,提留片刻並抖動刮勺使勺上的水全部滴入管中。此時可見生理鹽水溶液由清變濁。
固定細胞:取出2號管,輕甩一下使溶液全部沉積在管底。將1號管中的溶液全部倒入2號管中,蓋上並擰緊2號管的螺旋蓋,上下用力搖10次。
郵寄樣品:將2號管置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
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(二)唾液采樣檢測方法
目前出現較新的基因樣本採集方法——唾液采樣檢測法,此方法更加方便快捷,並且實現無創採集,檢測效果和提取口腔黏膜檢測效果一樣。
基因樣本採集流程如下:
1、口腔清潔:講解采樣流程及注意事項,要求客戶用清水漱口,半小時內不得進食、飲水、吸煙、飲酒或嚼口香糖等。
2、采前准備:戴上一次性醫用手套(採用醫院標准戴法及程序),打開採集箱准備采樣。從包裝盒內取出采樣管,拔出塞蓋後,將采樣管插入到采樣漏斗中。
4、採取唾液:通過采樣漏斗將唾液收集到采樣管中,直至采樣管上標簽所示位置。
注意:要保證實際的唾液量能達到刻度線,上層的泡沫不包括在內,且必須在半小時內完成唾液采樣過程。
5、保存樣品:從包裝盒內取出杯蓋,杯蓋內含有固定液,將杯蓋對准采樣漏斗順時針方向旋緊。確認杯蓋旋緊後,顛倒10次,使唾液和固定液充分混勻,保持杯蓋在上方,將采樣管垂直放置5分鍾。保持采樣管垂直,拔出采樣漏斗,用塞蓋蓋緊采樣管,上下顛倒混勻10次。
注意:杯蓋內的固定液應該清亮、無色、透明,如有渾濁請拋棄。請不要用手撕開杯蓋內的塑料薄膜。
6、郵寄樣品:丟棄采樣漏斗與采樣杯蓋,將采樣管與填妥的資料置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
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★ ★★ ★★ ★
★ 中源協和基因 ★
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B. 檢測基因表達的方法有哪些
基因工程第四步中包括導入檢測,轉錄檢測和翻譯檢測,方法分別是dna分子雜交技術、分子雜交技術、抗原-抗體雜交技術。有的還可在個體水平是進行檢測,如抗性檢測等
C. 檢測受體細胞中的目的基因是否表達的方法是什麼
首先要確認目的基因已經傳入受體細胞。然後再檢測其表達情況,一般有兩種方法:一個是通過特定性狀來判斷目的基因是否表達,比如導入的目的基因是編碼某種酶的,那麼最簡便有效的方法就是經過表達後檢測有沒有相應酶的活力,同時跑蛋白膠,看有沒有預期的目的條帶,因為對於酶來說,有時候目的基因雖然表達了,但是酶沒有活力,這時就不是表達的問題了。另外一個就是利用抗原-抗體特異性結合原理,檢測目的基因是否翻譯成蛋白。
D. 基因檢測有哪些方法
檢測基因表達的方法:
轉錄水平檢測:RT-PCR,real-time PCR,northern blot
翻譯水平檢測:western blot
還有直接檢測,如報告基因、融合熒光蛋白等。
E. 基因檢測方法有哪些
基因是遺傳的基本單元,攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,通過復制,把遺傳信息傳遞給下一代,指導蛋白質的合成來表達自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表達。基因檢測是通過血液、其他體液、或細胞對DNA進行檢測的技術,是取被檢測者外周靜脈血或其他組織細胞,擴增其基因信息後,通過特定設備對被檢測者細胞中的DNA分子信息作檢測,分析它所含有的基因類型和基因缺陷及其表達功能是否正常的一種方法,從而使人們能了解自己的基因信息,明確病因或預知身體患某種疾病的風險。
基因檢測可以診斷疾病,也可以用於疾病風險的預測。疾病診斷是用基因檢測技術檢測引起遺傳性疾病的突變基因。應用最廣泛的基因檢測是新生兒遺傳性疾病的檢測、遺傳疾病的診斷和某些常見病的輔助診斷。
一般有三種基因檢測方法:生化檢測、染色體分析和DNA分析。
1.生化檢測
生化檢測是通過化學手段,檢測血液、尿液、羊水或羊膜細胞樣本,檢查相關蛋白質或物質是否存在,確定是否存在基因缺陷。用於診斷某種基因缺陷,這種缺陷是因某種維持身體正常功能的蛋白質不均衡導致的,通常是檢測測試蛋白質含量。還可用於診斷苯丙酮尿症等。
2.染色體分析
染色體分析直接檢測染色體數目及結構的異常,而不是檢查某條染色體上某個基因的突變或異常。通常用來診斷胎兒的異常。
常見的染色體異常是多一條染色體,檢測用的細胞來自血液樣本,若是胎兒,則通過羊膜穿刺或絨毛膜絨毛取樣獲得細胞。將之染色,讓染色體凸顯出來,然後用高倍顯微鏡觀察是否有異常。
3.DNA分析
DNA分析主要用於識別單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。
基因檢測可以分為以下五類:
1.基因篩檢
主要是針對特定團體或全體人群進行檢測。大多數通過產前或新生兒的基因檢測以達到篩檢的目的。
2.生殖性基因檢測
在進行體外人工授精階段可運用,篩檢出胚胎是否帶有基因變異,避免胎兒患有遺傳性疾病。
3.診斷性檢測
多數用來協助臨床用葯指導。
4.基因攜帶檢測
基因攜帶者如果與某些特殊基因相結合,可能會導致下一代患基因疾病,通過基因攜帶者的檢測可篩檢出此種可能,作為基因攜帶者婚前檢查、生育時的參考。
5.症狀出現前的檢測
檢測目的是了解健康良好者是否帶有某種突變基因,而此基因與特定疾病的發生有密切的聯系。
臨床意義
1.用於疾病的診斷
如對結核桿菌感染的診斷,以前主要依靠痰、糞便或血液培養,整個檢驗流程需要在兩周以上,採用基因診斷的方法,不僅敏感性大大提高,而且在短時間內就能得到結果。
2.了解自身是否有家族性疾病的致病基因,預測患病風險
資料證實10%~15%的癌症與遺傳有關,糖尿病、心腦血管疾病等多種疾病都與遺傳因素有關。如具有癌症或多基因遺傳病(如老年痴呆、高血壓、糖尿病等)的人可找出致病的遺傳基因,就能夠有針對性地調整生活方式,預防或者延緩疾病的發生。
3.正確選擇葯物,避免濫用葯物和葯物不良反應
由於個體遺傳基因上的差異,不同的人對外來物質產生的反應也會有所不同,因此部分患者使用正常劑量的葯物時,可能會出現葯物過敏、紅腫發疹的現象。根據基因檢測的結果,可制定特定的治療方案,從而科學地指導使用葯物,避免葯物毒副反應。
F. 基因檢測方法
一般有三種基因檢測方法:生化檢測、染色體分析和DNA分析。
1.生化檢測
生化檢測是通過化學手段,檢測血液、尿液、羊水或羊膜細胞樣本,檢查相關蛋白質或物質是否存在,確定是否存在基因缺陷。用於診斷某種基因缺陷,這種缺陷是因某種維持身體正常功能的蛋白質不均衡導致的,通常是檢測測試蛋白質含量。還可用於診斷苯丙酮尿症等。
2.染色體分析
染色體分析直接檢測染色體數目及結構的異常,而不是檢查某條染色體上某個基因的突變或異常。通常用來診斷胎兒的異常。
常見的染色體異常是多一條染色體,檢測用的細胞來自血液樣本,若是胎兒,則通過羊膜穿刺或絨毛膜絨毛取樣獲得細胞。將之染色,讓染色體凸顯出來,然後用高倍顯微鏡觀察是否有異常。
3.DNA分析
DNA分析主要用於識刖單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。
G. 介紹幾種檢測基因表達水平的方法
1 western bloting
a.將編碼目標蛋白基因通過載體進行體外重組,然後導入宿主細胞表達
b.將目標蛋白注入兔子或其他動物體內獲得一抗
c.將樣品蛋白進行聚丙烯醯胺凝膠電泳、轉移、吸附固定
d.用一抗與之雜交再用二抗檢測其是否表達
2 fluorescent real-time PCR
a.提取樣品總RNA,再通過超速離心獲得mRNA
b.用逆轉錄酶獲得cDNA
c.加入特異性探針
d.利用專門的儀器檢測熒光強度即可
3半定量 PCR
a.提取樣品總RNA,再通過超速離心獲得mRNA
b.用逆轉錄酶獲得cDNA
c.做半定量PCR
4cDNA microarray
5蛋白質 晶元
實質就是高通量的分子雜交,免疫酶連反應再運用計算機處理
H. 檢測dna上的目的基因是否表達常用的檢測方法是
A 對目的基因的檢測和表達檢測的方法混淆,不能准確應用。目的基因的檢測常採用DNA分子雜交技術,即將含有目的基因的DNA片段用放射性同位素作標記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,若出現雜交帶,則表明目的基因已插入到染色體中。DNA—RNA分子雜交與抗原——抗體雜交法是目的基因的表達檢測。目的基因是否轉錄出了相應的信使RNA分子,用DNA—RNA分子雜交法檢測。細胞內是否合成了由目的基因控制的蛋白質,使用抗原——抗體雜交法檢測。要准確區分目的基因的檢測和表達檢測使用的方法。顯微注射技術是目的基因導入受體細胞的方法。
I. 基因檢測是怎麼做的流程是什麼樣的
中源協和基因檢測采樣方法及流程(采樣方法有2種,下面分別描述)
(一)、口腔黏膜采樣檢測方法很多檢測單位採用口腔粘膜脫落細胞樣本採集方式,採集程序如下:口腔清潔:用清水漱口一到二次。采前准備:從盒內取出1號管(平底),輕甩一下上下搖動使生理鹽水全部沉積在管底。擰開蓋子將管立於桌上備用。刮取細胞:取出口腔粘膜刮勺,伸入口腔將刮勺的頭部帶齒部分貼在一側口腔內側的臉頰部位於上下牙齒之間的部位,稍用力(相當於刷牙的力氣)按前後方向在口腔粘膜上刮十餘次,再用刮勺頭部的另一側(勿須轉動刮勺)刮取另一側的口腔粘膜,刮取十餘次。收集細胞:將刮勺迅速浸入到1號管的生理鹽水中攪動,將粘膜細胞洗到水中。將刮勺提離水面,提留片刻並抖動刮勺使勺上的水全部滴入管中。此時可見生理鹽水溶液由清變濁。固定細胞:取出2號管,輕甩一下使溶液全部沉積在管底。將1號管中的溶液全部倒入2號管中,蓋上並擰緊2號管的螺旋蓋,上下用力搖10次。郵寄樣品:將2號管置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
(二)唾液采樣檢測方法目前出現較新的基因樣本採集方法——唾液采樣檢測法,此方法更加方便快捷,並且實現無創採集,檢測效果和提取口腔黏膜檢測效果一樣。基因樣本採集流程如下:1、口腔清潔:講解采樣流程及注意事項,要求客戶用清水漱口,半小時內不得進食、飲水、吸煙、飲酒或嚼口香糖等。2、采前准備:戴上一次性醫用手套(採用醫院標准戴法及程序),打開採集箱准備采樣。從包裝盒內取出采樣管,拔出塞蓋後,將采樣管插入到采樣漏斗中。4、採取唾液:通過采樣漏斗將唾液收集到采樣管中,直至采樣管上標簽所示位置。注意:要保證實際的唾液量能達到刻度線,上層的泡沫不包括在內,且必須在半小時內完成唾液采樣過程。5、保存樣品:從包裝盒內取出杯蓋,杯蓋內含有固定液,將杯蓋對准采樣漏斗順時針方向旋緊。確認杯蓋旋緊後,顛倒10次,使唾液和固定液充分混勻,保持杯蓋在上方,將采樣管垂直放置5分鍾。保持采樣管垂直,拔出采樣漏斗,用塞蓋蓋緊采樣管,上下顛倒混勻10次。注意:杯蓋內的固定液應該清亮、無色、透明,如有渾濁請拋棄。請不要用手撕開杯蓋內的塑料薄膜。6、郵寄樣品:丟棄采樣漏斗與采樣杯蓋,將采樣管與填妥的資料置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
中源協和基因檢測建議:利用基因檢測技術在疾病發生前就發現疾病發生的風險,提早預防、或採取有效的干預措施。
J. 如何檢測基因表達水平
1 western bloting
a.將編碼目標蛋白基因通過載體進行體外重組,然後導入宿主細胞表達
b.將目標蛋白注入兔子或其他動物體內獲得一抗
c.將樣品蛋白進行聚丙烯醯胺凝膠電泳、轉移、吸附固定
d.用一抗與之雜交再用二抗檢測其是否表達
2 fluorescent real-time PCR
a.提取樣品總RNA,再通過超速離心獲得mRNA
b.用逆轉錄酶獲得cDNA
c.加入特異性探針
d.利用專門的儀器檢測熒光強度即可
3半定量 PCR
a.提取樣品總RNA,再通過超速離心獲得mRNA
b.用逆轉錄酶獲得cDNA
c.做半定量PCR
4cDNA microarray
5蛋白質 晶元
實質就是高通量的分子雜交,免疫酶連反應再運用計算機處理