『壹』 氯化鋁測總黃酮步驟
首先進行樣品溶液的制備，制備好樣品後進行測試。
准備70%乙醇溶液，料液比1_8 ，80度下迴流2h。 取10g樣品放入圓底燒瓶中加入80ml， 70%乙醇溶液迴流2h,抽濾定容至100ml備用。使用時先離心再用70%乙醇稀釋10倍做樣品溶液。3AlCl3法測定總黃酮含量准確移取一定量的蘆丁標准溶液或箬葉總黃酮提取液於10mL容量瓶中，加入乙醇5mL，0.5mol.L-l三氯化鋁溶液0.50mL，pH為5.4的HAc-NaAc緩沖液2mL，用水定容至10.00mL。顯色20min後，在415nm下以不加AlCl3的試液為空白，測定吸光度。
『貳』 硝酸鋁顯色法測定總黃酮含量的原理是什麼啊 所加試劑的作用是什麼
硝酸鋁絡合分光光度法測定總黃酮的原理為:在中性或弱鹼性及亞硝酸鈉存在條件下,黃酮類化合物與鋁鹽生成螯和物,加入氫氧化鈉溶液後顯紅橙色,在500波長處有吸收峰且符合定量分析的比爾定律,一般與蘆丁標准系列比較定量.
如果細說,硝酸鋁顯色法是先用亞硝酸鈉還原黃酮， 再加硝酸鋁絡合，最後加氫氧化鈉溶液使黃酮類化合物開環，生成 2』羥基查耳酮而顯色.
它的顯色原理發生在黃酮醇類成分鄰位無取代的鄰二酚羥基部位,不具有鄰位無取代鄰二酚羥基的黃酮醇類成分加入上述試劑時是不顯色的.
『叄』 黃酮抗氧化性活性的測定方法有哪些
1 抗氧化活性的化學評價方法
1. 1 FRAP 法
1. 2 TEAC 法
1. 3 DPPH 法
1. 4 ORAC 法
1. 5 TRAP 法
1. 6 TOSC 法
1. 7 F - C 法
2 抗氧化活性的生物評價方法
2.1CAP - e 法
2.2CAA 法
『肆』 如何快速檢測物質中是否含有黃酮類物質
用有機溶劑例如四氫呋喃萃取之後，用HPLC（高效液相色譜）的方法檢測其中是否含有黃酮類物質，這是定性，同時也可以做定量的方法。
使用TLC（薄層色譜）的方法可以進行定性的檢測。注意需要至少用兩種不同的展開劑使樣品與標准品對比。
另外，也可以用將黃酮在鹼性環境下與鋁絡合而形成的有色絡合物，通過分光光度計檢測的方法進行定量或半定量的檢測。
『伍』 為什麼用三種方法對黃酮進行定性分析
用機溶劑例四氫呋喃萃取用HPLC（高效液相色譜）檢測其否含黃酮類物質定性同做定量
使用TLC（薄層色譜）進行定性檢測注意需要至少用兩種同展劑使品與標准品比
另外用黃酮鹼性環境與鋁絡合形色絡合物通光光度計檢測進行定量或半定量檢測
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『陸』 總黃酮與單體黃酮的測定方法有什麼不同
總黃酮採用蘆丁為標准品即可測定，單體黃酮需要對應的標准品。
黃酮含量的測定方法：
1、 對照法
1）
① 對照品制備：精密稱取蘆丁對照品20.8mg，置於100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解並稀釋至刻度，搖勻。
② 樣品溶液制備
精密稱取樣品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鍾，稱定重量，用70%乙醇補足減失重量，即得。
③ 標准曲線的制備
精密稱取對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別置於25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鍾，加1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，加70%乙醇置刻度，搖勻，放置15分鍾。各取10ml置於50ml容量瓶中，用70%乙醇稀釋至刻度。在510nm的波長下測定吸光度。
2）
①樣品溶液的制備：
分別精確稱取80℃恆溫乾燥的樣品用50%甲醇迴流提取，料液比1：15,提取兩次，每次30min，將兩次提取液合並濃縮至一定體積，用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。從其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀釋至刻度，再從100ml容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，為待測樣品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波長的選擇：分別作樣品液Ⅰa、Ⅱa及蘆丁標准品的吸收曲線，均在350 nm 處有一強吸收，因此選擇350 nm為測定波長。
③標准曲線的制定：
精密稱取蘆丁對照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解後，轉移至50ml容量瓶，用蒸餾水定容至刻度。分別精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml蘆丁溶液置於100ml容量瓶中，於350 nm 波長處測定吸光值，以蘆丁空白為參比，以蘆丁濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標繪制標准曲線，提示在4.12～12.36mg／103ml濃度之間，吸光度值與濃度呈現良好的線性關系。
④含量測定結果：
分別吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待測樣品液各適量於石英比色池中，按標准蘆丁一吸光度測定法，以樣液空白參比，於350nm 波長下測定吸光值，計算各提取液中總黃酮含量。
計算公式為:樣品總黃酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式為通過回歸方程轉化而來，式中A為測得樣品液的吸光度值，W為稱樣量。
『柒』 怎樣准確建立總黃酮的檢測方法
本人最近提取植物總黃酮，其主要成分含有蘆丁、槲皮素、異槲皮素、金絲桃苷、紫雲英苷等多種黃酮類化合物。經查閱《國葯大典》，以蘆丁作標樣建立標准曲線： 精密稱取蘆丁25mg ，加甲醇定容至25 ml ，取10ml 並且用蒸餾水釋至100 ml 。分別准確吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 於25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml，加含5 % NaNO2 水溶液1ml ，搖勻靜置6 min ，再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ，搖勻靜置6 min，再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ，用蒸餾水稀釋定容至刻度，搖勻靜置16 min，在480～540 nm波長范圍內掃描，確定最大吸收波長在508 nm處，得到蘆丁濃度( x) 與吸光度( y) 的關系的回歸方程。
『捌』 用蘆丁測黃酮含量的方法
稱取0.010g蘆丁，用30%乙醇溶解並定容至100ml 的容量瓶中，製成0.1mg/ml的蘆丁標准溶液。
分別吸取剛配製好的蘆丁標液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml置於6個50ml的容量瓶中，依次編號0~5，用30%乙醇補至10ml後，加入0.8ml的5%的NaNO2搖勻，靜置6分鍾再加入0.8ml的10%的硝酸鋁搖勻，靜置6min，加入10ml的1mol/l的氫氧化鈉，搖勻15min後顯色置於510nm處分光光度計測吸光度。
蘆丁就是個標准 黃酮就是以蘆丁為計量的.
測黃酮的吸光度，標准曲線上，讀出黃酮含量就是蘆丁含量。
『玖』 黃酮類化合物的含量測定方法哪些
黃酮類化合物的含量測定方法哪些
黃酮類化合物（flavonoids）是一類存在於自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）結構的化合物。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具鹼性，能與強酸成鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃鹼素或黃酮。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結合成苷類，小部分以游離態（苷元）的形式存在。絕大多數植物體內都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發育、開花、結果以及抗菌防病等方面起著重要的作用。
鹽酸-鎂粉還原反應
取葯材粉末少許與試管中，用乙醇或甲醇數毫升溫浸提取，取提取液加鎂粉少許振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2min內即出現顏色。大多黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類顯紅-紫紅色，黃酮類顯橙色，異黃酮及查爾酮類無變化。如蘆丁的鹽酸鎂粉反應中溶液由黃色變紅色。
其他還原反應還有：鹽酸-鋅粉反應，黃酮、黃酮醇類常不顯色，只有二氫黃酮醇類可被鋅粉還原呈深紅色；鈉-汞齊反應，黃酮類成分可產生黃、橙、紅等色；四氫硼鈉（鉀）反應，僅二氫黃酮醇類可被四氫硼鈉還原呈紅色，其他黃酮類不反應。
金屬鹽類試劑絡合反應
黃酮類成分和鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽、鋯鹽等試劑反應，生成有色的絡合物，可供某些類型黃酮的鑒別。產生絡合作用的條件是黃酮類成分必須具備下列條件之一，如5-羥基、3-羥基或鄰二羥基。根據有色絡合物的最大吸收波長，可進行定量測定。常用的試劑有三氯化鋁、醋酸鉛、醋酸鎂與二氯氧化鋯等試劑。