Ⅰ 家庭如何檢驗黃麴黴素
摘要 一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。
Ⅱ 現在黃麴黴怎麼怎麼檢測
在紫外線下,黃麴黴毒素b1,b2發藍色熒光,黃麴黴毒素g1,g2發綠色熒光.黃麴黴毒素的相對分子量為312-346.難溶於水,易溶於油,甲醇,丙酮和氯仿等有機溶劑,但不溶於石油醚,己烷和乙醚中.一般在中性溶液中較穩定,但在強酸性溶液中稍有分解,在ph9-10的強鹼溶液中分解迅速.其純品為無色結晶,耐高溫,黃麴黴毒素b1的分解溫度為268℃紫外線對低濃度黃麴黴毒素有一定的破壞性.
液相色譜法
液相色譜(liquid chromatography,lc)與薄層層析在許多方面具有相似性,二者互相補充.通常用tlc進行前期的條件設定,選擇適宜的分離條件後,再用lc進行黃麴黴毒素的定量測定.
免疫化學分析方法
利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設計的黃麴黴毒素的免疫分析方法,也是最常用的黃麴黴毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法(radioimmunoassay,ria),酶聯免疫法(enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫層析法(immunoaflinity column assay,ica).它們均可以對黃麴黴毒素進行定量測定.
(1) 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術-hplc法
免疫親和柱法和酶聯免疫吸附法雖然都可達到速簡便效果,但酶聯免疫吸附法僅能檢測單一毒素(如黃麴黴毒素b1)含量,而且易出現假陽性結果,難以控制.免疫親和柱法(包括熒光光度法和hplc法)卻能達到既定量准確又快速簡便的要求.
免疫親和柱的使用可以避免傳統tlc和hplc的缺點,同時免疫親和柱與tlc和hplc法結合可以大大提高工作效率,提高靈敏度和准確度.
黃麴黴毒素免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段,用熒光計,紫外燈作為檢測工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標定標准物和在樣品預處理過程中使用多種有毒,異味的有機溶劑,毒害操作人員和污染環境的缺點.同時黃麴黴毒素免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快,一個樣品只需10-15min,比傳統方法快幾個小時甚至幾天時間;儀器設備輕便容易攜帶,自動化程度高,操作簡單,直接讀出測試結果,可以在小型實驗或現場使用.可以進行黃麴黴毒素總量 (b1b2g1g2) 的測定,檢測限可達到1ug/kg,達到黃麴黴毒素標准限量值以下測定范圍為1-300ug/kg.
黃麴黴毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統的hplc法更加安全,可靠,靈敏度和准確度高.它採用單克隆抗體免疫技術,可以特效性地將黃麴黴毒素或其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高.
分析原理試樣中的黃麴黴毒素用一定比例的甲醇/水提取液經過過濾,稀釋後,用免疫親和柱凈化,以甲醇將親和柱上的黃麴黴毒素淋洗下來,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高測定靈敏度,然後用熒光分光光度計進行定量.也可以將甲醇-黃麴黴毒素淋洗液的一部分注入hplc中,對黃麴黴毒素b1,b2,g1,b2分別進行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的黃麴黴毒素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上,然後裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg.
(2) 酶聯免疫吸附法:
1996年,nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術.由於該方法簡便,敏感,特異,可作為多種抗原或抗體的測定,20世紀70年代後期,該方法引入真菌毒素的檢測中,下面介紹的是競爭性酶聯免疫吸附間接法檢測黃麴黴毒素b1.
原理:將已知抗原吸附在固態載體表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液,競爭培養後,在固相載體表面形成抗原抗體復合物.洗除多餘抗體成分,然後加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體結合物相結合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物發生降解反應,產生有色物質,通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量,從而推知被測樣品中的抗原量.
(3) 微柱篩選法 可以用來半定量測定各種食品中黃麴黴毒素b1,b2,g1,g2的總量.
原理 樣品提取液中的黃麴黴毒素被微柱管風硅鎂型吸附層吸附後,在波長365nm紫外光燈下顯示藍紫色熒光環,其熒光強度與黃麴黴毒素在一定的光密度范圍內成正比例關系.若硅鎂型吸附劑層未出現藍紫色熒光,則樣品為陰性(方法靈敏度為5-10ug/kg).由於在微柱上不能分離黃麴黴毒素b1,b2,g1,g2,所以測得結果為總的黃麴黴毒素含量.
(4) 一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法
一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法.由此產生的一步式黃麴黴毒素快速檢測試紙可在5—10分鍾完成對樣品中黃麴黴毒素的定性測定.藉助黃麴黴毒素標准樣品,這種方法能估算黃麴黴毒素的含量,非常適用於現場測試和進行大量樣品的初選.
Ⅲ 黃麴黴毒素怎麼檢測
檢測方法
1、薄層分析法(TLC)
TLC法是檢測黃麴黴素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化後,再在薄板上展開後分離。
利用黃麴黴素的熒光特性,根據熒光斑點的強弱與標准比較確定其含量,對於一些組分很復雜的試樣要雙向展開,才能獲得較高的靈敏度。
TLC法設備簡單,檢測費用低,但操作繁瑣、費時,萃取和凈化效果不理想,靈敏度差,對操作人員的身體健康存在較大程度的危害。
2、液相色譜法(HPLC)
HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離,再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離,其凈化效果優異。
該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),檢測速度快且定性與定量准確,檢測限低,可作為仲裁法使用,但儀器設備價格昂貴,前處理方法相對繁瑣,若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加,對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。
3、酶聯免疫法(ELISA)
ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最後用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。
該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
4、毛細管電泳法(CE)
毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃麴黴素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。
Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高,操作復雜,不適宜在試樣檢測中廣泛應用。
5、熒光光度法(IA C/S FB)
IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃麴黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃麴黴素的含量。
該方法對檢測人員身體健康無危害,檢測速度迅速,靈敏度高,適用於大量試樣檢測,且定量准確,但檢測費用較高,需要配置專用設備,且不能對單一的毒素進行檢測。
6、金標試紙法
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃麴黴素。
該法可在5~10 min內完成對試樣中黃麴黴素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的准確度、精度有待進一步的研究。
7、生物感測器法
生物感測器是使用固定化技術將具有分子識別能力的生物活性物質與物理化學換能器結合,可以用來探測生物體內外的環境化學物質或與之起特異性交互作用後產生響應的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物感測器為免疫感測器口。
根據能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同,免疫感測器可分為電化學免疫感測器、光學免疫感測器、壓電晶體免疫感測器等。由於生物感測器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合於現場檢測等優點,因此各國科研工作者正積極探索研製新型生物感測器用於檢測黃麴黴素。
(3)總黃麴黴素檢測方法擴展閱讀:
黃麴黴毒的危害
1993年黃麴黴毒素被世界衛生組織(WHO)的癌症研究機構劃定為1類致癌物,是一種毒性極強的劇毒物質,足以說明黃麴黴毒素對身體的危害是極大的。黃麴黴毒素毒性遠遠高於氰化物、砷化物和有機農葯的毒性,其中黃麴黴毒素B1毒性最大。
黃麴黴毒素進入體內後,主要在肝細胞內質網微粒體混合功能氧化酶系的作用下進行代謝。因此,黃麴黴毒素的危害性在於對人的肝臟組織有破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡。 當然,黃麴黴毒素沒有經過代謝活化是無致癌性的。
參考資料來源:網路-黃麴黴毒素檢測方法
Ⅳ 某種食物中含黃麴黴素,用最簡單的方法怎麼檢測
薄層分析法(TLC)、液相色譜法(HPLC)、酶聯免疫法(ELISA)、毛細管電泳法(CE)、熒光光度法(IA C/S FB)。
1、薄層分析法(TLC)
TLC法是檢測黃麴黴素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化後,再在薄板上展開後分離。
5、熒光光度法(IA C/S FB)
IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃麴黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃麴黴素的含量。
該方法對檢測人員身體健康無危害,檢測速度迅速,靈敏度高,適用於大量試樣檢測,且定量准確,但檢測費用較高,需要配置專用設備,且不能對單一的毒素進行檢測。
(4)總黃麴黴素檢測方法擴展閱讀:
黃麴黴毒素的毒性有三種臨床特徵:急性中毒、慢性中毒和致癌性,有致癌、致畸、致突變的作用。
其致癌特點是:致癌范圍廣,能誘發魚類、禽類,各種實驗動物、家畜及靈長類等多種動物的癌症,除主要誘發肝癌外,還可誘發胃癌、腎癌、直腸癌、乳腺癌,卵巢及小腸等部位的腫瘤,亦可導致出現畸胎。因此許多國家都制定了有關食品中黃麴黴毒素限量標准。
Ⅳ 黃麴黴素怎麼檢測
CSY-E96H黃麴黴毒素快速檢測儀採用固相酶聯免疫吸附ELISA的原理,即酶聯免疫法;可定量檢測糧食、食品、飼料、油脂、乳製品、葯物、飲料、牛奶、酒等產品中的黃麴黴毒素(B1,B2,G1,G2 M1 M2 AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2,3-環氧化物)含量。
Ⅵ 怎樣檢查白酒里的黃麴黴素
咨詢記錄 · 回答於2021-01-14
Ⅶ 家庭如何檢驗黃麴黴素
一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。
由此產生的一步式黃麴黴毒素快速檢測試紙可在5—10分鍾完成對樣品中黃麴黴毒素的定性測定,藉助黃麴黴毒素標准樣品這種方法能估算黃麴黴毒素的含量,非常適用於現場測試和進行大量樣品的初選。
薄層分析法(TLC)是檢測黃麴黴素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化後,再在薄板上展開後分離。
(7)總黃麴黴素檢測方法擴展閱讀:
HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離,再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離,其凈化效果優異。
該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),檢測速度快且定性與定量准確,檢測限低,可作為仲裁法使用,但儀器設備價格昂貴,前處理方法相對繁瑣,若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加,對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。
Ⅷ 怎樣檢測黃麴黴毒素
檢測黃麴黴毒素的方法有很多,最為常見定性的方法是快速檢測卡,定量的檢測方法一般用液相 真菌毒素分析儀 還有ELISA檢測試劑盒等!網上有很多介紹的。
Ⅸ 怎樣檢查白酒里的黃麴黴素
檢查白酒里的黃麴黴素的方法:
1、薄層分析法,此法是檢測黃麴黴素最為經典的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化後,再在薄板上展開後分離。
2、液相色譜法,此法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離,再用熒光檢測器測定。此法能准確地分離不同種類的黃麴黴素,檢測速度快且定性與定量准確,檢測限低,可作為仲裁法使用,但儀器設備價格昂貴,前處理方法相對繁瑣。
3、酶聯免疫法,此法為近年較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最後用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
Ⅹ 牛奶黃麴黴素在臨潼什麼地方檢測
黃麴黴毒素(黃麴黴毒素)是生長在食物和飼料黃麴黴和一組化學結構類似的產物的寄生麴黴代謝,特別是黑麴黴可產生黃麴黴毒素,但更少的生產,已經分離並鑒定了黃色有17種麴黴毒素,主要黃麴黴毒素B1,B2,G1,G2和M1代謝物在體內由通過羥基化和衍生化的,M2等B1和B2
黃麴黴毒素主要存在於發霉的花生,穀物,堅果和米飯等食品;溶解在水中的范圍是從10毫克/升20毫克/升,可大量溶解於氯仿,甲醇,二甲亞碸等在中等極性的有機溶劑中不溶解於己烷,石油醚和乙醚;容易損壞的鹼或強氧化劑;主要通過消化道,大多分布於肝,腎,小的分布血液,肌肉,脂肪組織的部分被吸收到體內,在體內的代謝過程主要是羥基化,甲基化和環氧化。人體暴露於黃麴黴
的主要來源被污染的食物,有兩種膳食攝入的可能是:首先,由黃麴黴毒素(主要是B1)污染的植物食物攝入的方法,二是通過進料的方式進入牛奶或乳製品(包括乾酪,牛奶等等)的黃麴黴毒素(主要是M1)。
黃麴黴毒素危害人體和動物健康都與相關的黃麴黴毒素抑制蛋白質的合成。 1961年,科學家發現了黃麴黴毒素污染的花生粕可誘發大鼠肝癌,發現黃麴黴毒素1962年的致癌物質。黃麴黴毒素是致癌,致突變和致畸性,可魚,鳥,猴子等動物,家禽和誘發實驗性肝癌的靈長類動物,肝臟疾病主要是出血,壞,膽管增生,肝硬化等。據報道含有B10.1毫克/公斤飼料對鱒魚的,有可能要6個月的肝臟後;以B10.015毫克/公斤飼料含喂養大鼠,經過68至82周所有肝癌;國產致癌的黃麴黴毒素的動物實驗發現,用含有黃麴黴毒素的飼料喂養小鼠已經出現在肝,乳頭狀瘤前胃,胃鱗狀細胞癌,纖維組織的腫瘤,腎小管腺瘤之前,淚腺瘤,垂體瘤和甲狀腺腫瘤。另外,M 1,G 1和B 2也有致癌作用。
吃的食物被黃麴黴素污染,會有急性中毒。基於黃疸,嘔吐,厭食和發燒等症狀的臨床表現。腹水,下肢水腫,甚至亡,亡前出現胃腸道出血後,嚴重的會出現在兩到三個星期。黃麴黴毒素
危險,廣泛存在,以防止黃麴黴毒素中毒事件的發生,保護人類健康,世界上有70多個國家和地區的食品毒素黃麴黴毒素含量的限量要求。下面是一些國家和食品檢驗檢疫要求的黃麴黴毒素地區:
美國聯邦政府有關法律規定,人食用的食品和奶牛飼料中黃麴黴毒素含量(指B1 + B2 + G1 +共G2)是不大於20克/公斤,M1的牛奶中,其量不超過300克/千克的內容供人類食用和不超過0.5克/千克,和其它動物的飼料。
EC 1525/98規定,歐盟開始於1999年1月1日執行的直接向人食用的食品和食品成分選自由黃麴黴毒素B1的不能超過2克/千克的內容提供的規定,黃麴黴毒素B1,總B2,G1,G2,不得超過4毫克/千克。 - 日本提供不超過10微克/千克食品中黃麴黴毒素B1的含量。
食品中黃麴黴毒素B1標准允許量(GB2761-81)規定,玉米,花生,花生油不得超過20微克/公斤,玉米及花生製品(按原料翻譯)不得超過20微克/公斤,大米,其他的食用油不應超過10微克/公斤,其他糧食,豆類,發酵食品不得超過5微克/千克,不得檢出食品嬰兒代乳品,其他食品可參照以上標准執行;牛奶及其製品中黃麴黴毒素M1的衛生標准(GB9676-88),且不得超過0.5微克/千克。方法
目前,黃麴黴毒素的測定食品中有薄層色譜法,高效液相色譜法,放射免疫測定法,酶聯免疫吸附測定,免疫色譜法,微柱的篩選方法,該黃金標准試紙等。中國目前的國家標准GB用於/ T 5009.22-1996規定的毒素黃麴黴毒素B1的食物決心,GB / T 5009.23-1996規定了食品中的B1,B2,G1,G2的測定,黃麴黴毒素GB / T 5009.24-1996規定黃麴黴毒素測定食品中M1和B1的。此外,衛生部於1990年11月教育部下發了「防止食品衛生管理辦法黃麴黴毒素污染。」霉
食品解毒措施是:
(1)白粉病:12%至13%或更少的糧食和花生殼模控制穀物的水分含量保持在使用化學薰蒸劑的完整性,以防止真菌感染也有一定的作用
日(2)解毒方法:。我們1)挑除霉粒:花生因黃麴黴毒素主要存在於發霉,變色,損壞和花生的收縮,除了選秀權,可以顯著降低黃麴黴毒素的含量頁2)冷軋加工和水擦洗:適合種植水稻,主要是由於目前的米糠和大米的表面(3毒素脫胚排毒:玉米胚芽適用法律有兩種:一是浮選,磨玉米碎粒3MM所以加水攪拌,輕搓,胚光線和漂浮物,撈出浮層;二軋法,軋玉米,去掉皮和胚0.4)鹼破壞毒素:適用於食用油.5)其他:如紫外線照射,鹽炒法有一定的解毒作用日(三)加強食品衛生監管。