大腸桿菌種屬鑒別方法

❶ 生理鑒別試驗的原理和反應有哪些

細菌鑒定中常用的生理生化反應
〔目的要求〕了解細菌生理生化反應原理，掌握細菌鑒定中常用的生理生化反應方法；通過對不同細菌對不同含碳、氮化合物的分解利用情況，了解基代謝多樣性；學習不同培養基基中的不同生長現象及其代謝產物在鑒別細菌中的意義。
〔實驗原理〕各種細菌所具有的酶系統不盡相同，對營養基質的分解能力也不一樣，因而代謝產物存在差別。細菌的這種代謝方式可供鑒別細菌之用。用生理生化試驗的方法檢測細菌對各種基質的代謝作用及其代謝產物，從而鑒別細菌的種屬，稱為細菌的生理生化反應。有些細菌能發酵葡萄糖，而不能分解乳糖；有些細菌能分解某種糖產生有機酸和氣體；有的細菌則只產酸不產氣。在配製培養基時預先加入溴甲酚紫（pH4.4紅色～pH6.2黃色），當發酵產酸時，培養基由紫色變黃，氣體的產生則可由試管中倒置的杜氏小管中有無氣泡來判斷。大腸桿菌不產生丁二醇，V.P.試驗為陰性。其進行混合酸發酵，故甲基紅試驗為陽性。產氣桿菌則進行丁二醇發酵，V.P試驗為陽性，甲基紅試驗為陰性。
〔材料用具〕E.coli ，變形桿菌，枯草芽孢桿菌，產氣桿菌，糞水中分離的未知菌種斜面，糖發酵培養基；超凈工作台，恆溫培養箱，試管，移液管，杜氏小管。甲基紅試劑、V.P. 試劑。
〔實驗步驟〕各取4支相應的培養基，標記好發酵培養基的名稱、所接菌種名及組號，1支接大腸桿菌，1支接變形桿菌，1支接未知斜面菌種，1支不接。
1、 糖發酵試驗
2、 甲基紅試驗
3、 V.P.試驗
接種後37℃分別培養24h、48h、48h，觀察實驗結果，將實驗結果填入表中。
〔實驗結果〕

表7－1實驗結果
編號大腸桿菌枯草芽孢桿菌產氣桿菌未知菌CK葡萄糖發酵乳糖發酵甲基紅實驗V.P.試驗〔實驗討論〕
如：討論通過哪些生理生化反應可以區分大腸桿菌，產氣桿菌？

大腸桿菌不產生丁二醇，V.P.試驗為陰性。其進行混合酸發酵，故甲基紅試驗為陽性。產氣桿菌則進行丁二醇發酵，V.P試驗為陽性，甲基紅試驗為陰性。

❷ 怎麼看出大腸桿菌

用依紅-美藍培養基鑒定，依紅-美藍培養基鑒 是一種鑒別培養基，是用來鑒別大腸桿菌的，若有大腸桿菌，則培養基會變成紫色，並帶有金屬光澤。

❸ 腸道桿菌的鑒定依據有哪些

大腸桿菌測定
伊紅美藍平板上典型大腸桿菌菌落接種到營養瓊脂平板，在(36土1)℃培養18h -24 h 。每個平板至少挑選2個菌落。挑取上述菌落純培養物接種3.6.3生化培養基和乳糖發酵管，(36士1)0C培養24h 後觀察結果。
大腸桿菌與非大腸桿苗鑒別試驗方法
靛基質試驗:
滴加Kovacs氏靛基質試劑0.1 m L於靛基質試驗培養基中混合，靜置，觀察結果。
出現紅色環的為反應陽性;出現黃色環的為反應陰性。
甲基 紅(MR)試驗:
滴加甲基紅指示劑0.2 m 1於MR-VP培養基中混合，觀察結果。
出現紅色為陽性反應;出現黃色為陰性反應。
維 培(VP)試驗:
滴加VP試劑甲液0. 2 mL於MR-VP培養基中混勻，再滴加VP試劑乙液0.1mL混勻，靜置，觀察結果。在15min內出現紅色的為陽性反應;無顏色變化的為陰性反應。陰性結果1h後再觀察一次出現紅 色也為陽性反應。
西蒙氏檸檬酸鹽試驗:觀察培養基顏色變化，出現藍色為陽性反應;不變色為陰性反應。
大腸桿菌鑒定結果
靛基質 MR VP 西蒙氏檸檬酸鹽 鑒定
＋
－ ＋
＋ －
－ —
－ 典型大腸艾希氏桿菌
非典型大腸艾希氏桿菌
＋
－ ＋
＋ －
－ ＋
＋ 典型檸檬酸鹽桿菌
非典型檸檬酸鹽桿菌
－
＋ －
－ －
－ ＋
＋ 典型產氣腸桿菌
非典型產氣腸桿菌
如出現表1以外的生化反應類型，表明培養物可能不純，應重新劃線分離，必要時做重復試驗。
結果報告
1M Vic 試 驗結果為++一一、一+一一和乳糖發酵管產氣者，查其EC肉湯產氣管數及其稀釋倍
數，對照附錄B(資料性附錄)中MPN檢索表報告樣品中大腸埃希氏桿菌MPN /a (mL)值

❹ 如何鑒別大腸桿菌和枯草芽包桿菌

1.裝個塗片,用革蘭氏染色,枯草芽孢桿菌革蘭氏陽性菌,大腸桿菌是革蘭氏陰性菌,顯微鏡看看就知道了。
2.劃線分離,大腸桿菌的菌落濕潤緊實圓溜溜的,枯草芽孢桿菌的菌落表面粗糙不透明。

❺ 水中大腸桿菌怎麼分離鑒定啊

分離就是常規的塗平板
劃線分離
大腸桿菌測定
伊紅美藍平板上典型大腸桿菌菌落接種到營養瓊脂平板，在(36土1)℃培養18h
-24
h
。每個平板至少挑選2個菌落。挑取上述菌落純培養物接種3.6.3生化培養基和乳糖發酵管，(36士1)0C培養24h
後觀察結果。
大腸桿菌與非大腸桿苗鑒別試驗方法
靛基質試驗:
滴加Kovacs氏靛基質試劑0.1
m
L於靛基質試驗培養基中混合，靜置，觀察結果。
出現紅色環的為反應陽性;出現黃色環的為反應陰性。
甲基
紅(MR)試驗:
滴加甲基紅指示劑0.2
m
1於MR-VP培養基中混合，觀察結果。
出現紅色為陽性反應;出現黃色為陰性反應。
維
培(VP)試驗:
滴加VP試劑甲液0.
2
mL於MR-VP培養基中混勻，再滴加VP試劑乙液0.1mL混勻，靜置，觀察結果。在15min內出現紅色的為陽性反應;無顏色變化的為陰性反應。陰性結果1h後再觀察一次出現紅
色也為陽性反應。
西蒙氏檸檬酸鹽試驗:觀察培養基顏色變化，出現藍色為陽性反應;不變色為陰性反應。

❻ 如何鑒別大腸桿菌

大腸桿菌是革蘭氏陰性細菌，用革藍氏染色法能將其染成紅色。而革蘭氏陽性細菌則顯紫色。
或者伊紅美藍平板培養
http://ke..com/view/29729.htm

❼ 怎樣鑒別大腸桿菌

用依紅-美藍培養基鑒定，依紅-美藍培養基鑒
是一種鑒別培養基，是用來鑒別大腸桿菌的，若有大腸桿菌，則培養基會變成紫色，並帶有金屬光澤。

❽ 如何在光學顯微鏡下區分大腸桿菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌

大腸桿菌：菌體大小0.5×（1～3）um，周身鞭毛
沙門氏菌：（0.6～0.9)×（1～3)um，有周身鞭毛
銅綠假單胞菌：菌體大小寬（(0.5～1)um×（1.5～5.0)um，細長且長短不一，有時呈球桿狀或線狀，成對或短鏈狀排列。

三種菌全部屬於革蘭氏陰性無芽孢桿菌，其中銅綠假單胞菌相對較大，可分辨。而大腸桿菌和沙門氏菌大小上相差無幾很難分辨。

❾ 大腸桿菌怎麼鑒定

大腸桿菌測定
伊紅美藍平板上典型大腸桿菌菌落接種到營養瓊脂平板，在(36土1)℃培養18h -24 h 。每個平板至少挑選2個菌落。挑取上述菌落純培養物接種3.6.3生化培養基和乳糖發酵管，(36士1)0C培養24h 後觀察結果。

大腸桿菌與非大腸桿苗鑒別試驗方法

靛基質試驗:
滴加Kovacs氏靛基質試劑0.1 m L於靛基質試驗培養基中混合，靜置，觀察結果。
出現紅色環的為反應陽性;出現黃色環的為反應陰性。

甲基 紅(MR)試驗:
滴加甲基紅指示劑0.2 m 1於MR-VP培養基中混合，觀察結果。
出現紅色為陽性反應;出現黃色為陰性反應。

維 培(VP)試驗:
滴加VP試劑甲液0. 2 mL於MR-VP培養基中混勻，再滴加VP試劑乙液0.1mL混勻，靜置，觀察結果。在15min內出現紅色的為陽性反應;無顏色變化的為陰性反應。陰性結果1h後再觀察一次出現紅 色也為陽性反應。

西蒙氏檸檬酸鹽試驗:觀察培養基顏色變化，出現藍色為陽性反應;不變色為陰性反應。

大腸桿菌鑒定結果
靛基質 MR VP 西蒙氏檸檬酸鹽 鑒定
＋
－ ＋
＋ －
－ —
－ 典型大腸艾希氏桿菌
非典型大腸艾希氏桿菌
＋
－ ＋
＋ －
－ ＋
＋ 典型檸檬酸鹽桿菌
非典型檸檬酸鹽桿菌
－
＋ －
－ －
－ ＋
＋ 典型產氣腸桿菌
非典型產氣腸桿菌

如出現表1以外的生化反應類型，表明培養物可能不純，應重新劃線分離，必要時做重復試驗。

結果報告
1M Vic 試 驗結果為++一一、一+一一和乳糖發酵管產氣者，查其EC肉湯產氣管數及其稀釋倍
數，對照附錄B(資料性附錄)中MPN檢索表報告樣品中大腸埃希氏桿菌MPN /a (mL)值

❿ 如何鑒定大腸桿菌

1、發酵法

這種方法主要是在44.5℃下的培養基上進行大腸桿菌的培養，該培養基含有熒光底物，需要培養 24 h。然後對熒光底物進行釋放，需要採用葡萄糖醛酸進行，讓培養基能夠在紫外光的照射下發出熒光。

採用這樣的方式方法，還可以進行統計學估計原來樣品中的菌落。主要步驟包括發酵、分離培養、二次發酵、顯微鏡觀察等 。

2、濾膜法

該方法主要過程：加入 10 mL 左右的無菌水於濾器中，然後摻入一些無菌水進行清潔濾器的內壁，再進行過濾，將濾膜放在 M-FC 培養基中，兩者之間不能夠有氣泡，然後進行密封，存放溫度為 44.5℃，存放時間約 24 h，直到大腸桿菌的菌群變成藍色或藍綠色。

然後記錄數據，估算每一單位的水溶液菌群數量，然後進行大腸桿菌量值的換算 。

(10)大腸桿菌種屬鑒別方法擴展閱讀：

大腸桿菌是短桿菌，兩端呈鈍圓形，革蘭陰性。有時因環境不同，個別菌體出現近似球桿狀或長絲狀 ；大腸桿菌多是單一或兩個存在，但不會排列呈長鏈形狀。

大多數的大腸桿菌菌株具有莢膜或微莢膜結構，但是不能形成芽孢；多數大腸桿菌菌株生長有菌毛，其中一些菌毛是針對宿主及其他的一些組織或細胞具有黏附作用的宿主特異性菌毛 。

生化特性

大腸桿菌在常用的生化特性檢測項目中，甲基紅試驗呈陽性，吲哚產生和乳糖發酵是陽性（個別菌株表現陰性），維-培試驗是陰性，尿素酶和檸檬酸鹽利用呈陰性（極個別菌株表現陽性），硝酸鹽還原試驗表現陽性，氧化酶表現陰性，氧化-發酵試驗表現為F型