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精氨酸液相檢測方法

發布時間:2022-07-02 04:45:24

⑴ 檢驗氨基酸用什麼方法

1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。

⑵ 精氨酸 在高效液相條件下出峰嗎

氨基酸在紫外條件下沒有吸收,所以直接進樣是不出峰,一般測定都採用滴定的方法。
如果液相儀器有條件,可以考慮用衍生的方法檢測。衍生就是通過一些活性物質,把沒有紫外吸收的樣品轉化成有紫外吸收的樣品,這樣就可以檢出色譜峰了。有柱前衍生和柱後衍生的一些方法,具體的可以查一下相關的文獻。
之前用柱前衍生檢測過酪氨酸、組氨酸等氨基酸,不過精密度特別不好。

⑶ 精氨酸的測定方法

該方法採用電位滴定法測定精氨酸(C6H14N4O2)的含量。
該方法適用於精氨酸的含量測定。 供試品加無水甲酸使溶解後,加冰醋酸,照電位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,並將滴定的結果用空白試驗校正,即得。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當於8.710mg的C6H14N4O2。
試劑:1. 水(新沸放置至室溫)
2. 冰醋酸
3. 無水甲酸
4. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)
5. 基準鄰苯二甲酸氫鉀
6. 無水冰醋酸
7.結晶紫指示液
儀器設備:
試樣制備:1. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)
配製:取無水冰醋酸(按含水量計算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70~72%)8.5mL,搖勻,放冷,加無水冰醋酸適量使成1000mL,搖勻,放置24小時。若所測供試品易乙醯化,則須用水分測定法測定本液的含水量,再用水和醋酐調節至本液的含水量為0.01%~0.2%。
標定:取在105℃乾燥至恆重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g,精密稱定,加無水冰醋酸20mL使溶解,加結晶紫指示液1滴,用本液緩緩滴定至藍色,並將滴定結果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當於20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,算出本液的濃度。
2.結晶紫指示液
取結晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解。
貯藏:置棕色玻璃瓶中,密閉保存。
操作步驟:取該品約80 mg,精密稱定,加無水甲酸3mL使溶解,加冰醋酸50mL,照電位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,並將滴定的結果用空白試驗校正,即得。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當於8.710mg的C6H14N4O2。
注1:「精密稱取」系指稱取重量應准確至所稱取重量的千分之一,「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。
注2:「水分測定」用烘乾法,取供試品2~5g,平鋪於乾燥至恆重的扁形稱瓶中,厚度不超過5mm,疏鬆供試品不超過10mm,精密稱取,打開瓶蓋在100~105℃乾燥5小時,將瓶蓋蓋好,移置乾燥器中,冷卻30分鍾,精密稱定重量,再在上述溫度乾燥1小時,冷卻,稱重,至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量,計算供試品中含水量(%)。
參考文獻:中華人民共和國葯典,國家葯典委員會編,化學工業出版社,2005年版二部,p.831。

⑷ 精氨酸液相檢測為什麼要進行衍生化

一般氨基酸都沒有紫外吸收,如果你直接進液相,那麼根本就不會有色譜峰的。
衍生化其實是讓氨基酸和衍生試劑反應,然後轉化成一種有紫外吸收的物質,這樣就會出現色譜峰了。
一般柱前衍生,是吸取氨基酸樣品,吸取衍生試劑和緩沖液適量,然後混合,最後一起進樣。就像是在色譜柱前做了一個小型的反應似的。

⑸ 18種氨基酸用液相色譜該怎麼檢測

建立一種准確、快速柱前衍生高效液相色譜法測定腦卒中患者血清 中18種游離氨基酸的方法,為臨床治療腦卒中提供依據.方法:利用高效液相色譜二極體陣列檢測法對AQC衍生的氨基酸產物進行分離.採用thermo C18(250mm×4.6mm,5μm)色譜柱,PH 5.09的乙酸銨溶液和60%的乙腈水溶液為流動相,檢測波長248nm,利用梯度洗脫的方式測定血清中1 8種氨基酸.結果:谷氨醯胺在0.0125-2mmol/L濃度范圍內,胱氨酸在0.00625-0.25mmol/L濃度范圍內,其餘16種氨基酸在 0.0 125-0.5mmol/L濃度范圍內線性關系良好.R2為0.9907-0.9999,RSD為1-4%.結論:利用此方法可以檢測缺血性腦卒中患者血 清中游離氨基酸,測定結果准確可靠,方法簡單易行.

⑹ 氨基酸態如何檢測

檢測概述
科標檢測在氨基酸檢測方面具有資深經驗,為廣大客戶提供專業、全面的檢測服務:

氨基酸是構成蛋白質的基本單位,在食品、醫葯、飼料添加劑、化妝品及工農業等諸多方面有著廣泛的應用。隨著生物工程技術產業的發展逐漸成為21世紀全球的主要產業之一,氨基酸的需求量越來越大,品種變更越來越快,工藝改革越來越新。

檢測領域

檢測產品:豆類穀物、葯材、魚類、肉類、飼料、食用菌類、保健品、化妝品等等。

檢測項目:甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、

蘇氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸和組氨酸、胱氨酸、色氨酸、谷氨醯胺、天冬醯胺等。

檢測標准
GB/T 15924.10-2008 實驗動物 配合飼料 氨基酸的測定
GB/T 15399-1994 飼料中含硫氨基酸測定方法--離子交換色譜法
GB/T 15400-1994 飼料中色氨酸測定方法--分光光度法
GB/T 17419-1998 含氨基酸葉面肥料
GB/T 18246-2000 飼料中氨基酸的測定
GB/T 18654.11-2008 養殖魚類種質檢驗 第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的測定
GB/T 23296.12-2009 食品接觸材料 高分子材料 食品模擬物中11-氨基十一酸的測定 高效液相色譜法
GB/T 28722-2012 氨基酸中鐵和鉛的測定 原子吸收光譜法
GB/T 5009.124-2003 食品中氨基酸的測定
GB/T 8315-2013 茶 游離氨基酸總量的測定
NY 1529-2010 含氨基酸水溶肥料
NY/T 1518-2008 鹿茸中氨基酸的測定 氨基酸自動分析儀法
NY 39-1987 飼料級L-賴氨酸鹽酸鹽
NY/T 56-1987 穀物籽粒氨基酸測定的前處理方法
QB/T 2409-1998 化妝品中氨基酸含量的測定
QB/T 4356-2012 黃酒中游離氨基酸的測定 高效液相色譜法
SN/T 0930-2000 進出口花粉中全氨基酸的測定方法氨基酸自動分析儀法
YC/T 282-2009 煙葉 游離氨基酸的測定 氨基酸分析儀法
YC/T 448-2012 煙草及煙草製品 游離氨基酸測定 離子色譜-積分脈沖安培法
如果有需要可以到第三方檢測機構,青島科標檢測

⑺ 氨基酸的檢測方法哪些

1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。

⑻ 如何用液相色譜儀測氨基酸

反相高效液相色譜法測定煙葉中的游離氨基酸
氨基酸是煙草中的一類重要化學物質,在煙草調制、醇化或發酵、加工直至燃燒過程中,游離氨基酸與還原糖之間可發生酶催化及非酶催化的棕色化反應,生成多種具有蒸煮、烤香、爆米花香味特徵的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶類等雜環化合物,某些氨基酸如苯丙氨酸還可自身分解成香味化合物,如苯甲醇、苯乙醇等。氨基酸含量與煙草製品的吃味有著密切的關系,氨基酸在燃燒裂解過程中一般形成具有刺激性的含氮化合物,對煙氣香吃味產生不良影響,個別氨基酸還產生HCN等危害健康的煙氣成分。一般說來,氨基酸含量太高,煙氣辛辣、味苦、刺激性強烈;含量太低時煙氣則平淡無味缺少豐滿度。因此對氨基酸的分析是一項很有意義的工作,二十世紀60年代以來,國內外在這方面做了大量的工作[1-5]。
植物游離氨基酸樣品的制備,國內外採用的提取劑和純化方法各不相同。據文獻報道[6-7],鹽酸、不同濃度的乙醇溶液均可以用來提取植物組織中的游離氨基酸;提取液純化則有用陽離子交換樹脂、5%磺基水楊酸、活性炭或乙醚等方法。本實驗對不同的提取方式和不同的純化方法進行了對比研究,確定提取煙葉中游離氨基酸的較佳提取劑和純化方法。提取、純化後的樣品,採用OPA、FMOC聯合柱前衍生反相高效液相色譜法對煙葉中的游離氨基酸進行了測定。該方法使帶氨基和亞氨基基團的氨基酸能夠被同時測定,且得到較好的定性定量結果。
1 實驗
1.1 儀器
Agilent公司HP1100型高效液相色譜儀(帶可變波長紫外檢測器和自動進樣器),PE公司Lambda Bio40 紫外-可見分光光度計。
1.2 試劑
正纈氨酸(Norvaline,內標),OPA ,FMOC,均為色譜純,Agilent公司提供;硼酸緩沖溶液,Agilent公司提供;
醋酸鈉(NaAc),分析純,中國醫葯(集團)上海化學試劑公司;三乙胺(TEA),四氫呋喃(THF),乙腈(CH3CN),甲醇(MeOH),均為色譜純,Fisher公司試劑;
氨基酸標樣包括:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬醯胺(Asn)、谷氨醯胺(Gln)、絲氨酸(Ser)、組氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、蘇氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、酪氨酸(Tyr)、胱氨酸(Cys)、纈氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、脯氨酸(Pro),均為生化試劑,中國醫葯(集團)上海化學試劑公司;
苯乙烯陽離子交換樹脂(732型),天津樹脂廠。
1.3 樣品處理
將煙葉在烘箱中恆溫40℃烘乾至恆重,粉碎,過80目篩,篩下物為實驗用煙樣粉末,置於廣口瓶中備用。准確稱取煙樣粉末1.000g於乾燥的潔凈試管中,用一定濃度的乙醇溶液室溫超聲波提取半小時,過濾,相同濃度的乙醇溶液洗滌,再提取一次,合並後的濾液用陽離子交換柱洗脫,然後用95ml 4mol/L氨水淋洗陽離子交換柱,淋洗液恆溫濃縮至干,最後用3ml 0.1mol/L稀鹽酸溶液溶解濃縮物,將此溶液離心分離20min,0.45μm微孔濾膜過濾,加入濃度為5nmol/μ1的內標10μ1,定容至50ml,HP1100液相色譜儀進行氨基酸分析。
樣品自動柱前衍生化:Agilent公司G1313A自動進樣器進樣。程序為:吸取5μl硼酸緩沖液,再吸取1μ1 OPA試劑,洗針一次,吸取樣品2μl,原位混合6次。吸取1μl FMOC試劑,洗針一次,原位混合3次,進樣。
1.4 色譜條件
色譜柱:Hypersil AA-ODS C18 2.1×200mm
流動相A:1.36±0.025g醋酸鈉,加入500ml純水溶解,加90μl三乙胺,用1%醋酸調pH=7.20±0.05,再加入1.5ml四氫呋喃,混合均勻。
流動相B:1.36±0.025g醋酸鈉,加入100ml純水溶解,用1%醋酸調pH=7.20±0.05,將此溶液加至200ml乙腈和200ml甲醇的混合物中,並混合均勻。
流速:0.45ml/min
柱溫:40℃
紫外檢測波長: 0~16min, 338nm; 16~25min,262nm
淋洗梯度:見表1
表1 流動相的淋洗梯度表
Table 1 The gradient time table of mobile phase
序列 時間(min) 流動相A(%) 流動相B(%) 流速(ml/min)
1 0.00 100.0 0.0 0.450
2 15.50 40.0 60.0 0.450
3 18.00 0.0 100.0 0.450
4 21.00 0.0 100.0 0.800
5 23.90 0.0 100.0 0.800
6 24.00 0.0 100.0 0.450
7 25.00 100.0 0.0 0.450
1.5 氮基酸的定性
用標樣色譜圖、文獻參照和標樣加入的方法,通過對照保留時間進行定性,對氨基酸的出峰順序加以確認。
1.6 內標法定量
准確移取濃度為10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合標樣100μl於帶內襯管的樣品瓶中,再加入250pmol/μ1內標溶液100μl,充分混合,液相色譜分析,儀器自動計算各氨基酸的標准曲線。
2 結果與討論
2.1 萃取溶劑的比較
氨基酸可溶解於水、乙醇、甲醇、稀酸等,因此它們均可作為煙葉中游離氨基酸的萃取溶劑,傳統的方法是用乙醇和0.1mol/L的鹽酸。實驗發現,乙醇和0.1mol/L的鹽酸萃取方法比較,提取出的煙葉中的游離氨基酸的總量變化不大,但用鹽酸提取的樣品分析時RSD%較大,平均8.51%,其中超過10%的有4個,甘氨酸的RSD%最大為20%;而用乙醇提取的樣品分析時RSD%相對較小,平均5.12%,超過10%的只有1個。而且鹽酸提取液過濾速度慢,需要30-40min,而乙醇提取液過濾只需10min左右;因此,本實驗選擇乙醇作為煙葉中游離氨基酸的萃取溶劑。
2.2 乙醇濃度的選擇
選擇五種不同濃度的乙醇溶液進行了煙樣中游離氨基酸的提取,測定不同條件下提取液中游離氨基酸的總量,結果如圖1。圖中顯示,在乙醇溶液濃度為80%時,煙樣中總游離氨基酸的提取量最大。而且不同濃度下游離氨基酸的RSD%沒有明顯的變化,因此,選擇80%的乙醇溶液來進行煙樣中游離氨基酸的提取。

2.3 不同純化方法的確定
在最佳乙醇溶液濃度下,分別用活性炭加入提取液吸附雜質、乙醚加入提取液萃取分離雜質、5%磺基水楊酸加入提取液沉澱去除雜質和陽離子交換樹脂吸附雜質四種方法進行了純化實驗。結果發現,活性炭作為純化劑時其色譜圖中雜質峰較少,但同時氨基酸峰亦有多個消失,主要是因為活性炭對氨基酸也有較強的吸附,它在吸附雜質的同時也吸附了需要檢測的氨基酸,故活性炭不適合作為純化劑使用。乙醚和5%磺基水楊酸作為純化劑時,雜質去除不完全,其色譜圖均表現為雜質峰較多,湮沒了大量氨基酸峰,且基線漂移嚴重,給定性定量工作帶來困難。當用陽離子交換樹脂進行純化時,其色譜圖中雜質峰較少,基線平穩,氨基酸峰分離較好,均可以進行定性和定量分析,故本實驗選擇了陽離子交換樹脂作為純化手段。
2.4 色譜分離
2.5 線性范圍及標准曲線
分別取濃度為10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合標樣加入等體積的250 pmol/μ1的內標溶液,進行HPLC分析,以氨基酸濃度為橫坐標,氨基酸與內標的面積比為縱坐標,得到各個氨基酸的標准曲線,如表2所示。從表中可以看出,各氨基酸在10-1000 pmol/μ1的濃度范圍內均有良好的線性,各氨基酸標准曲線的線性相關系數均大於0.99。
表2 氨基酸的標准曲線
Table 2 Standard curves of 17 amino acids
氨基酸 線性方程 相關系數
Asp Y=0.007037x+0.004689 0.9972
Glu Y=0.007520x+0.005375 0.9961
Ser Y=0.006903x+0.038212 0.9988
His Y=0.003719x+0.020168 0.9945
Gly Y=0.005851x+0.018235 0.9966
Thr Y=0.006932x+0.021072 0.9978
Ala Y=0.006275x+0.015314 0.9912
Arg Y=0.006088x+0.016113 0.9920
Tyr Y=0.006734x+0.015022 0.9993
Cys Y=0.006004x+0.009876 0.9985
Val Y=0.006432x+0.009932 0.9927
Met Y=0.006574x+0.010346 0.9905
Phe Y=0.005098x+0.019023 0.9962
Ile Y=0.005976x+0.016235 0.9953
Leu Y=0.006044x+0.015332 0.9964
Lys Y=0.006833x+0.010437 0.9969
Pro Y=0.022455x+0.009376 0.9922
2.6 重現性實驗
取雲南C2F99煙樣做平行實驗(n=5),進行煙葉中游離氨基酸含量的檢測,結果發現: Asp和 Glu含量的RSD%分別為8.0%和8.6%,這可能是二者的分離度不高引起的;His的RSD%為9.0%,這可能與其含量較低,分離效果不好有關。其它氨基酸含量的RSD%均處在3%~7%。
2.7 回收率實驗
用標樣加入法進行回收率實驗,結果見表3。 Thr的回收率僅為68.0%,原因可能與其含量較少有關;其它15種氨基酸的回收率在81.0%~110.5%,平均回收率為93.9%,說明該方法的回收率結果令人滿意。
表3 分析方法的回收率
Table 3 Recovery percents of the analytical method
氨基酸 加入量(mg/g煙樣) 樣品含量(mg/g煙樣) 測定值(mg/g煙樣) 差值(mg/g煙樣) 回收率%
Asp 0.200 0.320 0.499 0.179 89.5
Glu 0.200 0.309 0.484 0.175 87.5
Asn 0.200 0.986 1.208 0.222 110.0
Ser 0.200 0.172 0.334 0.162 81.0
Gln 0.200 0.186 0.368 0.182 91.0
His 0.200 0.106 0.297 0.191 95.5
Gly 0.200 0.064 0.279 0.215 107.5
Thr 0.200 0.052 0.188 0.136 68.0
Ala 0.200 0.642 0.835 0.193 96.5
Arg 0.200 0.266 0.463 0.197 98.5
Val 0.200 0.090 0.259 0.169 84.5
Phe 0.200 0.218 0.406 0.188 94.0
Ile 0.200 0.026 0.191 0.165 82.5
Leu 0.200 0.028 0.199 0.171 85.5
Pro 0.200 1.432 1.653 0.221 110.5
Tyr 0.200 0.062 0.245 0.183 91.5
2.8 樣品分析
利用該方法對不同等級的煙葉中游離氨基酸的含量進行了分析,結果見表4。從表中可以看出,在所分析的樣品中,烤煙煙葉中含量最高的氨基酸是Pro,白肋煙煙葉中含量最高的氨基酸是Asp和Asn;白肋煙煙葉中氨基酸的含量高於烤煙煙葉;相同等級的烤煙煙葉,雲南煙葉中的氨基酸含量高於其它產區。
表4 不同等級煙葉中游離氨基酸的含量(mg/g煙樣)
Table 4 Amounts of free amino acids in different
grade tobacco leaves(mg/g tobacco leaves)
氨基酸 雲南烤煙C1F 雲南烤煙C2F 雲南烤煙C1L 雲南烤煙B1F 雲南烤煙B2F 福建烤煙B1F 福建烤煙C1F 四川烤煙C1F 四川烤煙B1F 貴州烤煙C1F 貴州烤煙B1F 貴州烤煙C1L 鄂西白肋中一 鄂西白肋中二
Asp 0.24 0.31 0.60 0.40 0.38 0.37 0.26 0.37 0.26 0.26 0.32 0.35 1.73 1.59
Glu 0.36 0.32 0.21 0.17 0.16 0.11 0.15 0.20 0.30 0.32 0.29 0.25 0.54 0.61
Asn 0.91 0.34 1.50 0.95 0.38 0.18 0.25 0.35 0.32 0.44 0.55 0.48 7.70 7.62
Ser 0.16 0.10 0.18 0.16 0.10 0.12 0.24 0.21 0.19 0.20 0.19 0.15 0.62 0.58
Gln 0.19 0.05 0.22 0.17 0.04 0.06 0.10 0.11 0.10 0.11 0.15 0.10 0.18 0.20
His 0.11 0.02 0.14 0.10 0.06 0.06 0.11 0.09 0.07 0.09 0.08 0.09 0.20 0.22
Gly 0.10 0.09 0.19 0.17 0.07 0.08 0.12 0.15 0.12 0.15 0.13 0.12 0.16 0.19
Thr 0.05 0.05 0.08 0.06 0.05 0.04 0.08 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.19 0.16
Ala 0.65 0.55 0.84 0.69 0.54 0.51 0.65 0.59 0.55 0.48 0.53 0.70 0.57 0.55
Arg 0.29 0.21 0.32 0.28 0.18 0.26 0.32 0.28 0.25 0.33 0.29 0.33 0.48 0.42
Tyr 0.06 0.07 0.06 0.07 0.06 0.05 0.07 0.05 0.06 0.06 0.07 0.06 0.10 0.15
Val 0.10 0.10 0.12 0.11 0.10 0.14 0.15 0.13 0.12 0.15 0.14 0.13 0.21 0.25
Met 0.07 0.07 0.09 0.08 0.06 0.06 0.08 0.08 0.08 0.07 0.09 0.08 0.12 0.13
Phe 0.26 0.12 0.28 0.23 0.10 0.21 0.25 0.21 0.25 0.28 0.30 0.33 0.44 0.59
Pro 1.14 0.83 2.13 1.51 0.69 0.66 1.03 1.23 1.11 1.32 1.18 1.09 0.25 0.35
總量 4.69 3.23 6.96 5.15 2.97 2.91 3.86 4.14 3.86 4.33 4.37 4.31 13.49 13.61
3 結論
本煙葉中游離氨基酸的分析方法採用80%的乙醇作為萃取溶劑,陽離子交換樹脂對提取液進行純化,能夠最大程度地提取煙葉中的游離氨基酸並較好地去除了影響氨基酸測定的雜質,使色譜圖中雜質峰較少;OPA、FMOC聯和柱前衍生使帶氨基和亞氨基基團的氨基酸同時得到測定;良好的梯度洗脫使各個氨基酸峰得到較好的分離,並使定量結果更加可靠。

⑼ 國家標准檢測蛋白質含量測定方法

蛋白質含量測定方法就是檢測N元素的含量,像三聚氰胺的問題,就是通過增加N的含量使「蛋白質」含量提高的。

國家標准檢測蛋白質含量的方法叫做凱氏定氮法,食物中的蛋白質在催化加熱條件下分解,導致氨和硫酸結合產生硫酸銨。 鹼蒸餾採用無硫,硼酸吸收,用硫酸或鹽酸標准滴定溶液滴定,根據酸耗計算氮含量,再乘以轉化系數,即蛋白質含量。

具體操作步驟如下:

1.樣品處理

精確稱量0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸收10-20ml液體樣品(約30-40mg氮當量)。將其轉移至乾燥的100毫升或500毫升氮氣固定瓶中,加入0.2克硫酸銅,6克硫酸鉀和20毫升硫酸,輕輕搖動,在瓶口放置一個小漏斗,將瓶子傾斜石棉網上有45度角,有小孔。

加熱小火後,內容物碳化,泡沫完全停止,加強火力,保持瓶內液體稍微沸騰,直至液體呈藍綠色澄清透明,然後繼續加熱0.5小時。取出並冷卻,小心加入20毫升水,冷卻,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗凈氮氣瓶,洗凈液放入容量瓶中,然後用水沖洗至刻度,混勻備用。

取相同量的硫酸銅,硫酸鉀和濃硫酸作為試劑進行空白試驗。然而,這種方法很危險,很難在實驗室中證明。大多數實驗室都有一個消化器,可以一次處理16個以上的樣品和一個可以自行設定溫度的呼吸機。它更安全,更可操作。

(9)精氨酸液相檢測方法擴展閱讀

除了凱氏定氮法以外,標準的測量方法還有:

食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解,分解產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨,在pH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液中與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色的3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1,4-二氫化吡啶化合物。在波長400nm 下測定吸光度值,與標准系列比較定量,結果乘以換算系數,即為蛋白質含量。

樣品在900~1200℃下燃燒。在燃燒過程中,產生混合氣體。 諸如碳,硫和鹽的干擾氣體被吸收管吸收,氮氧化物被還原成氮。 形成的氮氣流由熱導檢測器(TCD)檢測。

⑽ 如何檢測精氨酸含量

要攀蒸鬢攜馨馨纂筍馨羲l繽篆黔景瑟墓馨鬢鑫摹暴鶩翼摹囊{霎)馨蠢鬃鬢夔敖{蔚簸蘸簍羹纓豁如湯矛竺L一精氨酸是合成蛋白質和肌酸的重要原料,幾是人和動物體內的半必需氨基酸,在醫葯和食品工業上具有廣泛用途。目前,L一精氨酸的生產很多是通過發酵進行,因而對發酵液中L一精氨酸的測定有著相當重要的意義。建立一種簡單、快速而又有效的檢側方法,對篩選出產酸高,具有優良比狀的菌環嗦也是必要的。本文針對類似的文獻報道,就發酵液中L-精氨酸定量檢測的甲蔡酚一雙乙酞法進行了研究。1材料與方法1 .1顯色液409幾NaoH溶液,8電幾甲茶酚正丙醇…

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